KOREASCHOLAR

본 연구는 온시디움에 있어서 particle bombardment 및 아그로박테리움 매개 형질전환 최적 조건을 구명하 고자 실시하였다. 실험재료는 ‘Sharry Baby’의 PLBs를 사용하였으며, 유전자는 pCAMBIA3301 vector에 삽입 되어 있는 bar와 intron-gus를 사용하였다. Particle bombardment 법에 있어서는 직경이 0.6 μm인 금 입자 에 유전자를 혼합하여 9 cm의 거리에서 1,100 psi 헬륨 가스 압으로 발사하는 것이 유전자 도입에 효과적이었 다. 아그로박테리움 매개법에 있어서는 미성숙 PLBs를 O.D 0.6 정도인 균주에 접종 후 5일간 광조건 없이 공동 배양하는 것이 유전자 도입에 효과적이었다.

To establish an efficient transformation method for Oncidium cultivar Sharry Baby, protocorm like bodies (PLBs) and their clumps were used for particle bombardment and Agrobacterium–mediated transformation using the transient expression of bar and intron-gus genes. The regeneration medium containing 7.5 mg·L-1 PPT was used to select shooting plants. For the particle bombardment method, using gold particle of 0.6 μm, helium gas pressure of 1,100 pounds per square inches (psi) and a flight distance of 9 cm was found to be effective for the gene transfer. In the case of Agrobacterium-mediation, inoculating immature PLBs with a bacterial liquid suspension of optical density (O.D.) 0.6 and then co-culturing under a dark condition for five days was also found to be effective for the gene transfer.

• Su Young Lee(National Horticultural Research Institute, RDA) | 이수영 Corresponding author
• Mi Seon Kim(National Horticultural Research Institute, RDA) | 김미선
• Jae Young Kim(National Horticultural Research Institute, RDA) | 김재영
• Il Gin Mok(National Horticultural Research Institute, RDA) | 목일진