한국응용과학기술학회지(구 오일 및 응용과학 학회지) Vol. 35 No. 2 (p.423-432)

UVB 로부터 ROS를 유도한 제브라피쉬에 스피룰리나 에탄올 추출물의 항산화 및 보호효과에 관한 연구

Anti-oxidative and protective effects of Arthrospira platensis ethanol extracts on zebrafish ROS Induced by UVB Induction
키워드 :
스피룰리나,활성산소종,UVB 조사,DCFH-DA,항산화효과,Arthrospira platensis,reactive oxygen species,ultraviolet B radiation,DCFH-DA,Anti-oxidative

목차

요 약
Abstract
1. 서 론
2. 실 험
  2.1. 추출물 제조
  2.2. DPPH radical scavenging
  2.3. SOD-like activity
  2.4. UVB에 의한 제브라피쉬의 ROS 측정
  2.5. 세포배양
  2.6. 세포 생존율 측정
  2.7. UVB에 의한 HaCaT 세포내 ROS 측정
3. 결과 및 고찰
  3.1. DPPH radical scavenging
  3.2. SOD-like activity
  3.3. UVB에 의한 제브라피쉬의 ROS 측정
  3.4. 세포 생존율 측정
  3.5. UVB에 의한 HaCaT 세포내 ROS 측정
4. 결 론
References

초록

스피룰리나는 지구상의 가장 오래된 조류중 하나이며 피코시아닌, 토코페롤, 베타카로틴을 함유하고 있어 노화를 방지한다고 보고된 바 있다. 본 연구에서는 재배방법이 다른 스피룰리나 에탄올추출물의 UVB로 유도된 활성산소종(reactive oxygen species, ROS)의 저해와 항산화효과를 확인하였다. 실내배양 스피룰리나 에탄올추출물(ICAE)과 야외배양 스피룰리나 에탄올추출물(OCAE) 0.1, 0.5, 1 ㎎/㎖의 DPPH 라디칼 소거능과 SOD 유사 활성을 측정하여 항산화효과를 확인하였다. UVB로 유도된 ROS의 저해 효과는 제브라피쉬 배아와 HaCaT 세포를 이용하여 확인하였다. ICAE와 OCAE 0, 0.01, 0.05, 0.1, 0.5, 1 ㎎/㎖을 제브라피쉬 배아와 HaCaT 세포에 처리하고 UVB로 ROS를 유도하였고 DCFH-DA로 염색하여 세포내 ROS의 양을 검출하였다. 항산화효과를 측정한 결과 양성대조군인 ascorbic acid의 DPPH 라디칼 소거능은 73%, SOD 유사 활성은 86%로 나타났다. ICAE와 OCAE 1 ㎎/㎖의 농도에서 각각 43, 57%의 DPPH 라디칼 소거능을 나타내었고, 20, 19%의 SOD 유사 활성을 나타내어 양성대조군인 ascorbic acid보다 낮았지만 유의적인 항산화효과가 있었다. UVB로 유도된 제브라피쉬 배아와 HaCaT 세포의 ROS가 음성대조군보다 증가하였고, ICAE와 OCAE 처리된 군은 농도 의존적으로 UVB만 조사된 양성대조군 보다 ROS가 감소하였다. 본 연구의 결과는 스피룰리나 에탄올추출물이 피부보호용 화장품 소재로 사용가치가 있음을 시사한다.
Arthrospira platensis is one of the oldest algae in the world and has been reported to have anti-aging properties, including phycocyanin, tocopherol and beta-carotene. In this study, we tried to search protective activities against UVB-induced reactive oxygen species(ROS) of Arthrospira platensis under indoor cultivation ethanol extracts(ICAE) and outdoor cultivation ethanol extracts(OCAE). The anti-oxidative capacities were evaluated by DPPH radical scavenging activity and SOD-like activities at various concentrations(0.1, 0.5, 1 ㎎/㎖) of ICAE and OCAE. Zebrafish embryos and HaCaT cells were exposed to UVB radiation and treated with various concentrations(0, 0.01, 0.05, 0.1, 0.5, 1 ㎎/ ㎖) of ICAE and OCAE. ROS levels of zebrafish and HaCaT cells were generated by UVB radiation. ROS levels were detected using a fluorescent microscope after DCFH-DA staining. The DPPH radical scavenging activity of ascorbic acid was 73% and SOD-like activity was 86% in the positive control group. ICAE and OCAE at 1㎎/㎖ concentration showed 43, 57% DPPH radical scavenging activity and 20, 19% SOD-like activity. Anti-oxidative of ICAE and OCAE had lower effects than the positive control ascorbic acid but significant results. ROS of UVB-induced zebrafish embryos and HaCaT cells were higher than negative control. ICAE and OCAE treated group decreased ROS concentration dependently than UVB-induced positive control group. These results suggest that Arthrospira platensis ethanol extract may have usability value as a cosmetic material for skin protection.