대한화장품학회지 제44권 4호 (p.407-417)

하수오 추출물, 분획물 및 주성분의 항산화, 세포 보호 및 항균 활성에 관한 평가

Evaluation of Antioxidant, Cytoprotective and Antimicrobial Properties of Polygoni multiflori Radix Extract, Fractions and Its Major Constituent
키워드 :
antioxidant,antimicrobial,cytoprotective,Polygoni multiflori Radix,2,3,5,4'-tetrahydroxystilbene

목차

요 약
Abstract
1. 서 론
2. 재료 및 실험
  2.1. 시약
  2.2. 하수오 추출물 및 분획물 제조
  2.3. 총 페놀류 함량 측정
  2.4. HPLC-DAD와 LC-ESI-MS를 이용한 분석
  2.5. DPPH Assay를 이용한 자유라디칼 소거 활성 측정
  2.6. Luminol 화학발광법을 이용한 Fe3+-EDTA/H2O2 시스템에서 생성된 활성산소 소거 활성 측정
  2.7. Singlet Oxygen으로 유도된 적혈구 광용혈을 이용한 세포 보호 효과 측정
  2.8. 항균활성 평가
  2.9. 통계처리
3. 결과 및 고찰
  3.1. 하수오 추출물, 분획물의 제조 및 분석
  3.2. 항산화 활성 측정
  3.3. Singlet Oxygen으로 유도된 적혈구 광용혈을 이용한 세포 보호 효과 측정
  3.4. 항균 활성 평가
4. 결 론
Reference

초록

본 연구에서는 하수오를 이용하여 50% 에탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획물을 제조하고, 추출물 및 분획물의 항산화, 세포 보호 및 항균 효능을 평가하여 기능성 소재로서의 가능성을 확인하였다. 또한, 하수오에 주요하게 존재하는 성분의 활성도 검증하였다. HPLC-DAD, LC-EIS-MS를 통해 분석한 결과, 하수오의 주성분은 2, 3, 5, 4'-tetrahydroxystilbene 2-O-β-D-glucoside (THSG)이었다. 페놀류 및 THSG 함량은 에틸아세테이트 분획물이 에탄올 추출물 보다 각각 11.1 및 3.0배 높게 나타났다. DPPH 자유 라디칼 및 Fe3+-EDTA/H2O2 시스템에서 생성된 ROS에 대한 소거 활성 평가에서, 에틸 아세테이트 분획물은 에탄올 추출물 보다 뛰어난 소거 활성을 나타냈다. 특히 ROS 소거 활성 평가에서 에틸 아세테이트 분획물과 THSG은 L-ascorbic acid와 동등한 소거 활성을 나타냈다. 이러한 결과를 바탕으로 수행된 광증감 반응으로 유도된 적혈구의 산화적 손상에 대한 세포 보호 활성은 에틸아세테이트 분획물, 에탄올 추출물, THSG 순서로 나타났으며, 모든 실험군이 양성 대조군으로 사용한 (+)-α-tocopherol보다 우수한 활성을 나타냄을 확인하였다. 항균 활성 평가는 S. aureus, E. coli, P. aeruginosa, C. albicans 균주를 대상으로, disc diffusion assay와 broth microdilution assay를 이용하여 수행하였다. 그 결과 추출물, 분획물 및 THSG 모두 모든 균주에 대해 항균 활성을 나타냈으며, 특히 그람 양성균인 S. aureus에 대해 methyl paraben보다 우수한 항균력을 나타냄을 확인하였다. 본 연구의 결과는 하수오가 항산화, 세포 보호 및 항균력에 관한 천연 소재로의 활용될 수 있는 가능성을 시사한다.
In this study, the antioxidant, cytoprotective and antimicrobial activities of 50% ethanol extract of Polygoni multiflori Radix (PMR) and its ethyl acetate fraction were evaluated to confirm the applicability as a functional ingredient. The activities of the major constituent of PMR were verified and 2, 3, 5, 4′-tetrahydroxystilbene 2-O-β -D-glucoside (THSG) was confirmed to be the main component of extract and fraction using HPLC-DAD, LC-EIS-MS analysis. The phenolic and THSG contents of the ethyl acetate fraction were 11.1- and 3.0-folds higher than those of the ethanol extract, respectively. As a result of the DPPH assay and that of luminol dependent chemiluminescence assay in Fe3+-EDTA/H2O2 system. the ethylacetate fraction was superior to the ethanol extract in free radical and ROS scavenging activities. Especially, the ethyl acetate fraction and THSG exhibited the similar scavenging activity like L-ascorbic acid in ROS scavenging activity. The ethyl acetate fraction perceived the most potent cytoprotective effect against oxidative damage of erythrocytes induced by photosensitization reaction, followed by the ethanol fraction, THSG and that of (+)-α-tocopherol, which was used as a positive control. Antimicrobial activities were evaluated by disc diffusion and broth microdilution assay against S. aureus, E. coli, P. aeruginosa and C. albicans. In particular, the antibacterial activity of the extract and fraction against S. aureus was superior to that of methyl paraben. Taken together, our results suggest that PMR could be used as a natural ingredient for antioxidant, cytoprotective and antimicrobial activities.