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참돔과 홍민어 판별을 위한 Multiplex PCR 검사법의 개발과 검증 KCI 등재

Development and Validation of Multiplex PCR Method for the Identification of Pagrus major and Sciaenops ocellatus

  • 언어KOR
  • URLhttps://db.koreascholar.com/Article/Detail/404137
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한국식품위생안전성학회지 (Journal of Food Hygiene and Safety)
한국식품위생안전성학회 (Korean Society of Food Hygiene and Safety)
초록

참돔은 등쪽에 푸른 반점이 흩어져 있고, 홍민어는 꼬리 쪽에 검은 점이 있어 원물 형태는 쉽게 구분할 수 있다. 그러나 횟감이나 필렛으로 이용 시 참돔과 홍민어를 구분하기 어려워, 참돔의 종 특이 primer를 개발 및 검증하고 모니터링을 통해 참돔의 위변조 사례를 조사하고자 하였다. 시료에서 gDNA를 추출하여 PCR을 진행하였으며 참돔 primer의 product size는 468 bp, 홍민어 primer의 product size는 181 bp으로 설계하였다. Multiplex PCR 결과 참돔과 홍민어에 대한 종 특이적 증폭이 확인되었다. 또한, 참돔과 홍민어 PCR 민감도 실험 결과 참돔 primer는 1 ng, 홍민어 primer는 0.1 ng 까지 밴드가 확인되었다. 모니터링 결과 참돔으로 구매한 시료 19건 모두 참돔으로 판정되었다. 따라서 본 연구에서 제작된 참돔과 홍민어 종에 대한 종 특이적 primer는 횟감 등 수산물에도 적용할 수 있어 현재 유통 및 판매되고 있는 참돔 및 홍민어 판 별에 적합성을 확인하였다.

Nowadays, with increase of seafood consumption, there have been increasing reports of defective seafood products. There have been incidents of red drum (Sciaenops ocellatus) being sold as red seabream (Pagrus major). In this study, we sought to develop and validate species-specific PCRs to differentiate between P. major and S. ocellatus to prevent the sale of S. ocellatus as P. major. Primers for P. major were designed to bind 12s rRNA and those for S. ocellatus were designed to bind 16s rRNA. Multiplex PCR showed a 468 bp amplicon for P. major and a 181 bp amplicon for S. ocellatus. The limit of detection of P. major and S. ocellatus was present at 1 ng each. The developed primers were validated with 19 P. major samples of food items purchased through the internet. Using this monitoring method, the experimental results and tested species were in agreement. Hence, the developed multiplex PCR method is considered reliable to authenticate P. major and S. ocellatus.

목차
ABSTRACT
Materials and Methods
    재료
    Genomic DNA 추출
    종 특이 primer 제작
    Polymerase chain reacion (PCR) 반응
    종 특이 primer의 검출 한계
    모니터링
Results and Discussion
    참돔과 홍민어의 형태학적 분류
    종 특이 프라이머 설계
    Single PCR 및 multiplex PCR 특이도
    Multiplex PCR 민감도
    모니터링
국문요약
References
저자
  • 최이슬(부경대학교 식품공학과) | Iseul Choi (Department of Food Science and Technology, Pukyoung National University)
  • 신지영(부경대학교 식품공학과) | Jiyoung Shin (Department of Food Science and Technology, Pukyoung National University)
  • 양지영(부경대학교 식품공학과) | Ji-young Yang (Department of Food Science and Technology, Pukyoung National University) Correspondence to