된장과 고추장에 대해 cdELISA에 AFB_(1)의한 의 분석방법을 확립하고 국내에서 생산되는 재래식 및 개량식 된장과 고추장을 수거하여 AFB_(1)의 오염도를 조사하였다. 표준곡선을 작성하였을 때, 이의 검출 한계는 0.2ng/㎖(ppb)이었다. 된장의 Spike test 후 회수율은 1~100 ng/g 범위에서 평균 71.5%로 나타나 이 범위에서 cdELISA에 의한 AFB_(1)의 측정이 가능함을 보여주었다. 이로부터 된장 및 고추장에서 cdELISA를 통한 AFB_(1)의 분석 방법을 확립하였다. 된장 및 고추장 시료의 AFB_(1)의 오염도는 총 30종의 고추장 시료에서 AFB_(1)이 검출되지 않았고 총 30종의 된장 시료 중 6종에서 1.0~6.0 ng/g 수준으로 검출되었다. 이는 우리 나라의 허용기준인 10 ng/g(ppb) 이하였다.
한국산 배로부터 polyphenol 화합물을 분리하여, 기능성 식품으로서의 근거를 제시하고자, 면역기능의 활성화에 관하여 동물실험을 하였다. 배의 polyphenol 화합물이 면역기능에 미치는 영향에 관한 실험에서는 배로부터 분리된 polyphenol 화합물 I, II 및 III에 대하여 Rosette 형성은 배의 polyphenol 화합물 II와 III을 투여한 군에서 분리된 비장과 복강 상재성 마크로파지에서 Rosette 형성능이 높은 것으로 나타났다. 항원 투여 후 혈중의 히스타민을 측정한 결과는 거의 정상군에 가깝게 혈중 histamine 함량을 낮추는 역할을 하였다.
본 연구는 생체 내 세포 및 조직배양기로서의 면역결핍동물을 개발할 목적으로 proximal Ick promoter와 DT-A유전자를 이용하여 형질전환생쥐를 생산하였고 형질전환생쥐의 면역기관에서 Di-phteria toxin이 발현되어 T-cell이 결핍되는지를 분석하였다. 총 암수 2마리의 형질전환생쥐를 PCR과 South-ern blotting으로 분석하여 얻었으며 이식유전자의 copy수는 약 2∼3 copy가 정착된 것으로 확인되었다. 형질전환생쥐의 thymus, spleen, liver 조직을 분리한 후 total RNA를 추출하여 poly(dT) primer 와 DT 특이적 primer를 이용하여 RT-PCR수행 결과 형질전환생쥐의 thymus, spleen, liver에서 DT gene이 발현되고 있는 것을 확인할 수 있었다. 형질전환생쥐의 이들 조직간에 DT 발현량에는 큰차이는 없는 것으로 확인되었다. 형질전환생쥐의 혈액에서 적혈구, 백혈구 ,혈소판, 헤모글로빈 등이 정상생쥐보다 감소되었고 특히 백혈구수와 혈소판의 수가 크게 감소되어 있는 것으로 나타났다. 또한 형질전환생쥐의 혈액을 CD3 antibody를 이용하여 FACS 분석을 실시하여 형질전환생쥐의 혈액 중 T-cell이 수가 비정상적으로 줄어든 것을 확인할 수 있었다. 본 연구에서는 Ick-DT 형질전환생쥐에서 DT유전자의 발현에 의한 T-cell 결핍을 유도할 수 있는 것으로 나타나 이를 바탕으로 돼지를 이용한 사람의 이종장기 배양용 형질전환동물을 생산하여 응용될 수 있을 것으로 사료된다.
Generally, non-aflatoxigenic fungi, such as Aspergillus oryzae, and Aspergillus niger are main microflora in Korean traditional fermented foods including Meju and soybean paste, but sometimes, Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus can be contaminated and accumulated aflatoxins during fermentation and storage. So the screening of aflatoxigenic strains in fermented traditional food is very important to improve the sanitary quality of those foods. In this work, we screened aflatoxin producing fungi from commercial Meju and soybean paste in Western Gyeongnam by immunoassay. Samples were randomly purchased from market of the commercial Meju(10 EA) and soybean paste(20 EA) in nine areas of Western Gyeongnam. Of the samples collected, 24 strains and 22 strains of Aspergillus sp. were isolated from Meju and soybean paste, respectively. The isolated strains were cultured on SLS media at 25℃ for 15 days. The cultured broth were extracted with ethyl acetate and were analysed to determine aflatoxin B₁(AFB₁) by direct competitive ELISA(DC-ELISA). Six strains(25%) isolated from Meju, and 2 strains(9%) isolated from saybean paste, were confirmed as aflatoxin producing strains. The average range of aflatoxin productivity of isolates from Meju was 54.6 ± 38.7 ng/ml and that from soybean paste was 11.1 ± 8.6 ng/ml, respectively. Among them, isolated strain No. M-5-4 produced a high level of AFB₁ and showed 98.26 ng/ml of AFB₁. Every isolates were also re-confirmed their AFB₁ productivity by thin layer chromatography(TLC). The TLC results also showed same trend as DC-ELISA results. As the above results, the screening of hazard mycotoxigenic fungi from traditional fermented foods should be necessary for the safety and the application of HACCP system in the food manufactory in Korea.
Immunoglobulin G was purified by 40% (NH4)2SO4 precipitation, DEAE-Sephadex, Sephadex G-150 column chromatographies from rabbit antiserum against V. vulnificus ATCC 27562 O antigen and used for immunological test for V. vulnificus isolates. The profi
Immunoregulative action of 70% ethyl alcohol fraction of Cervus nippon was investigated in vitro. The fraction enhanced the proliferation of thymocytes and the population of CD4^+CD8^- single-positive. cells in thymocytes. CN-E enhanced [Ca^2+]_i, the production of TNF-α and IL-1β, and phagocytosis in peritoneal macrophages. The fraction did not induce the proliferation of splenocytes and DNA fragmentation in thymocytes. These results indicate that 70% ethyl alcohol fraction of Cervus nippon regulates immunological action by stimulating murine thymocytes and macrophages.