수정란의 성 판별은 유전적으로 우수한 유전형질을 보유하고 있는 소의 수정란을 성 판별하므로서 희망하는 성의 송아지를 생산할 수 있으며, 부가가치가 높은 수정란을 확보할 수 있는 기술이다. 수정란의 손상을 최소화하면서 할구를 biopsy하는 기술을 개발하고, 간단하고 빠른 시간에 성 판별이 가능한 Loop-mediated isothermal amplification방법으로 수정란을 성 판별을 실시한 결과는 다음과 같다. 1. 한우 체내 수정란의 성비는 암

This study was carried out to determine the factors on achieving good viability of embryos biopsied fur sexing, to investigate pregnancy rate following embryo transfer(ET) with sexed embryos, and to confirm the accuracy for the calves bort following ET with sexed embryos by polymerase chain reaction(PCR). To investigate viability of Hanwoo embryos after biopsy for sexing, fresh and frozen/thawed embryos were biopsied according to different developmental day of blastocysts, different stage of blastocysts, and different biopsy grade and the embryos themselves were incubated for 2 hours in TCM199 after microsection to be evaluated morphologically for recovery as blastocyst. The results obtained were as follows : 1. The rate of oocytes cleaved in vitro and the rate of blastocyst of the cleaved oocytes were 52.5% and 21.6%, respectively. The rate of blastocyst on day 8 was 11.2%, denoting the highest rate during whole culture period posterior to in vitro fertilization(IVF) 2. After biopsy for sexing, the viability rate of blastocyst on day 7, 8 and 9 was 75.0%, 88.4%, and 100.0%, respectively and the viability of early, mid, and expanded blastocyst after biopsy was 75.0%, 88.9%, and 91.1%, respectively The viability rate of fresh and frozen/thawed embryos was 89.9%, 71.4%, respectively. And the viability of expanded, hatching, and hatched blastocyst of frozen/thawed embryos was : 75.0%, 75.0%, and 50.0%, respectively. The viability of embryos according to biopsy grade of 10∼20%, 21∼30%, and 31∼40% was 85.7%, 91.5%, and 71.4%, respectively. 3. Pregnancy rate after transfer with biopsied embryo between flesh and frozen/thawed embryos was 22.6% and 20.0%, respectively. 4. In comparison between sex by PCR method and sex of calves born after embryo transfer, the accuracy of sex deterimination was 92.3% (12/13).

본(本) 연구는 생쥐의 4세포기배(細胞期胚)에서 하나의 할구(割球)를 뽑아내는 새로운 할구분유기술(割球分維技術)인 biopsy에 대한 효율성과 분리(分離)된 수정란(受精卵)과 분리(分離)한 할구(割球)의 생존성 및 새끼생산율을 검토한 결과(結果)이다. 그 결과(結果)를 요약(要約)하면 다음과 같다. 1. 4세포기배(細胞期胚)에서 분리(分離)한 단일해구(單一害球)와 4세포기배(細胞期胚)를 M2 배양액에 배양한 결과(結果), 단일해구(單一害球)는 82.6%가 영양배엽을 형성한 할구(割球)로 발생(發生)하였고 4세포기배(細胞期胚)로 89.5%가 배반포기배(胚盤胞期胚)로 발생(發生)하였다. 2. 4세포기배(細胞期胚)를 biopsy하여 하나의 할구(割球)가 분리(分離)된 수정란(受精卵)과 대조구인 4세포기배(細胞期胚)를 M2배양액에서 배양한 결과 각각 83.3%와 90.4%가 배반포기배(胚盤胞期胚)로 발생(發生)하였다. 3. Biopsy하여 4세포기배(細胞期胚)에서 분리(分離)한 단일해구(單一害球)와 대조구인 4세포기배(細胞期胚)에서 4개의 할구(割球)로 분리한 단일해구(單一害球)를 M2 배양액에서 배양한 결과 각각 80.8% 와 83.3%가 영양배엽을 형성한 할구(割球)로 발생(發生)하였다. 5. 4세포기배(細胞期胚)에서 하나의 할구(割球)를 뽑아낸 수정란(受精卵)과 대조구인 4세포기배(細胞期胚)를 수란생쥐에 이식한 결과 각각 36.0%와 48.6%의 새끼쥐 생산율(率)을 얻었다.