The research work was undertaken to determine an effective fertilization medium, sperm separation method and sperm capacitating agent for optimum in vitro fertilization (IVF) rates of indigenous zebu cow oocytes. In experiment 1, tissue culture medium (TCM 199), Tyrode’s albumin lactate pyruvate (TALP) and Brackett and Oliphant (BO) medium were used as basic medium for IVF of oocytes of indigenous zebu cows. In experiment 2, three sperm separation methods namely centrifugation, swim up and percoll gradient methods were used for separation of motile and viable spermatozoa for IVF. In experiment 3, for capacitation of spermatozoa, IVF medium supplemented with the heparin, mixture of penicillamine, hypotaurine and epinephrine (PHE) or the combination of heparin with PHE were used for fertilization. In vitro culture (IVC) of presumptive zygotes was done in modified synthetic oviduct fluid (mSOF) medium using standard procedure 24 h after sperm-oocytes co-culture. The cleavage rate was determined to evaluate the efficacy of fertilization medium, sperm separation method and sperm capacitating agent 24 h after IVC. The cleavage rate was higher in oocytes fertilized in TALP (63.3%) than in TCM 199 (47.5%) (p < 0.05). The cleavage rate was higher in oocytes fertilized by spermatozoa separated by percoll gradient method (62.3%) than by centrifugation (51.6%) (p < 0.05). The cleavage rate of oocytes was higher when insemination was done with spermatozoa capacitated in TALP supplemented with heparin and PHE (61.3%) compared to control (40.9%) (p < 0.05). In conclusions, TALP based medium and percoll gradient sperm separation followed by capacitation with combination of heparin and PHE are suitable for IVF of indigenous zebu cow oocytes in Bangladesh.

Toxic assessment of antifouling agents (diuron and irgarol) was conducted using the fertilization and the normal embryogenesis rates of the sea urchin, Mesocentrotus nudus. Bioassessment began with male and female reproductive cell induction. White or cream-colored male gametes (sperm) and yellow or orange-colored female gametes (eggs) were acquired and fully washed, separately. Then, the fertilization and normal embryogenesis rates were measured after 10 min and 48 h of exposure to the toxicants, respectively. The fertilization and embryo development rates were greater than 90% in the control, validating the suitability of both endpoints. The normal embryogenesis rates were significantly decreased with increasing concentrations of diuron and irgarol, but no changes in the fertilization rates were observed in concentrations ranging from 0 to 40 mg L-1. The EC50 values of diuron and irgarol for the normal embryogenesis rates were 20.07 mg L-1 and 22.45 mg L-1, respectively. The no observed effect concentrations (NOEC) were <1.25 mg L-1 and the lowest observed effect concentrations (LOEC) were 1.25 mg L-1 and 2.5 mg L-1, respectively. From these results, concentrations of diuron and irgarol over 1.25 mg L-1 and 2.5 mg L-1, respectively, can be considered to have toxic effects on invertebrates, including M. nudus. The ecotoxicological bioassay in this study using the noted fertilization and normal embryogenesis rates of M. nudus can be used as baseline data for the continued establishment of environmental quality standards for the effects of antifouling agents (especially diuron and irgarol) in a marine environment.

본 연구는 우리나라의 대표적인 난대 상록활엽수종 중의 하나인 가시나무의 고품질 용기묘 생산을 위한 적정 시비수준을 구명하고자 실시하였다. 용기는 임업시설양묘용 플라스틱 용기(350 ㎖/구)를 사용하였고, 시비처리는 무시비구와 함께 수용성 복합비료인 Multifeed 19 (N:P:K =19:19:19, v/v)를 1000 ㎎․L-1, 2000 ㎎․L-1, 3000 ㎎․L-1로 조절하여 시비하였다. 실험결과, 수고와 근원경 생장은 시비수준이 높아짐에 따라 높은 생장값으로 나타났다. 건물생산량도 전체적으로 수고 및 근원경 생장 결과와 유사한 경향으로 나타났다. 뿌리발달은 2000 ㎎․L-1 시비구에서 가장 왕성하였다. 묘목의 품질을 나타내는 지수인 QI (Quality Index)도 2000 ㎎․L-1 시비구에서 가장 높았다. 연구결과를 종합하면, 가시나무 용기묘의 우량한 묘목생산을 위한 적정 시비수준은 2000 ㎎․L-1 시비구로 판단된다.

본 연구는 소나무 2-0 용기묘를 대상으로 시비처리에 따른 생장변화와 시비처리 후 단수처리에 따른 생리활성 측정을 통해 내건성 증진을 위한 적정시비 방안을 수립하여 건강한 묘목 생산을 위한 기초자료를 제공하고자 수행되었다. 시비처리에 따른 소나무 묘목은 중도(2.0g/ℓ)의 시비구에서 가장 높은 묘고 생장량(12.34±0.73㎝)을 나타냈으며 근원경 생장은 약도(1.0g/ℓ)의 시비구에서 가장 높은 생장량(5.77±0.20㎜)을 나타냈다. 묘목의 품질을 평가하는 종합적 지수인 묘목품질지수(SQI)는 약도(1.0g/ℓ)의 시비구에서 2.05±0.07로 가장 높게 나타났으며, 중도(2.0g/ ℓ)의 시비처리구에서는 1.90±0.09의 값을 보였다. 전체 엽록소 함량은 시비 농도가 높아짐에 따라 증가하는 경향을 보였고 강도(3.0g/ℓ)의 시비구에 서 22.50±0.28㎎/g으로 가장 높게 나타났다. 단수처리에 따른 시비구별 소나무 묘목의 아브시스산 함량은 엽 피해가 발생한 강도(3.0g/ℓ)의 시비구를 제외하면 중도(2.0g/ℓ)의 시비구에서 2,190.85ng/g로 가장 낮게 나타났고, 전체 엽록소 함량은 중도(2.0g/ℓ)의 시비구에서 건조스트레스에 따른 엽록소의 파괴가 거의 없이, 단수처리 기간 동안 꾸준히 가장 높은 엽록소 함량 값(21.20±0.20㎎/g)을 나타냈다. 공시 수종인 소나무는 중도(2.0g/ℓ) 의 시비구에서 건조스트레스에 따른 아브시스산의 함량이 가장 적고, 엽록소의 함량은 가장 높게 나타나 소나무의 내건성 증진을 위한 적정 시비수준 은 중도(2.0g/ℓ)라고 판단된다.

This study was conducted to evaluate the effects of different nitrogen levels on the yield and nutrient quality of a newly developed domestic hybrid of Teosinte, Geukdong 6〔Zea mays L. subsp. mexicana (Schrad.) H. H. Iltis〕. The field experiment was conducted in a randomized block design with three replicates and consisted of four nitrogen (N) application rates, T1 (200 kg/ha), T2 (300 kg/ha), T3 (400 kg/ha), and T4 (500 kg/ha). No differences were found in plant length, leaf length, leaf width, leaf number, dead leaves, stem hardness, tiller number, and fresh yield (p>0.05). The T3 showed significantly greater dry matter yield at harvest (heading stage) compared to the other treatments (p<0.05). The crude protein content of T4 (10.49%) was higher than those of T1 and T2 (p<0.05). However, there was no significant difference between T4 (10.49%) and T3 (9.63%). The effects on crude fat, crude ash, neutral detergent fiber (NDF), acid detergent fiber (ADF), and crude fiber were not significant (p>0.05). The sugar content was higher in the T2 treatment than the other treatments (p<0.05). For Ca, T3 showed significantly greater content (p<0.05). However, no significant effects were found in the contents of Cu, Fe, K, Mg, Mn, Mo, and Zn (p>0.05). Na content was higher in order of T2 > T4 > T3 > T1 (p<0.05). Total mineral contents were not significantly different among the treatments (p>0.05). Given these results, we recommend the amount of nitrogen fertilization necessary for “Geukdong 6” to be around 400 kg per ha (T3), when considering, high fresh yield, dry matter yield, number of leaves and content of crude protein.

본 연구는 대체에너지, 생태복원 및 밀원식물용 등으로 이용되어 묘목 수요가 증가되고 있는 쉬나무의 우량한 용기묘 생산을 위한 적정 시비수준을 구명하고자 실시하였다. 공시용기는 임업시설양묘용 플라스틱 용기(350 ㎖/구)를 사용하였다. 시비처리는 무시비구와 함께 수용성 복합비료인 Multifeed 19 (N:P:K=19:19:19, v/v)를 500 ㎎·L-1, 1000 ㎎·L-1, 1500 ㎎·L-1, 2000 ㎎·L-1로 조절하여 시비하였다. 실험결과, 간장과 근원경 생장은 시비수준이 높아짐에 따라 높은 생장값을 나타내다가 1000 ㎎·L-1 이상의 시비에서는 낮아지는 경향을 보였다. 뿌리발달은 1000 ㎎·L-1에서 가장 왕성하였다. 건물생산량도 1000 ㎎·L-1에서 가장 높았고 전체적으로 간장 및 근원경 생장 결과와 유사한 경향으로 나타났다. 묘목의 품질을 나타내는 지수인 QI (Quality Index)도 1000 ㎎·L-1에서 0.97로 다른 처리구 보다 높게 조사 되었다. 연구결과를 종합하면, 쉬나무 용기묘의 우량한 묘목생산을 위한 적정 시비수준은 1000 ㎎·L-1로 판단되며, 쉬나무 용기묘의 대량생산을 위한 기초자료로 활용될 것으로 기대된다.

본 연구는 편백나무 2-0 용기묘를 대상으로 시비처리에 따른 생장변화와 시비처리 후 단수처리에 따른 내건성 측정을 통해 내건성 증진을 위한 적정시비 방안을 수립하여 건강한 묘목 생산을 위한 기초자료를 제공하고자 수행되었다. 시비처리에 따른 편백나무 묘목은 약도(1.0 g/L) 시비구에서 묘고 생장량(26.96±0.87 cm)을 나타냈으며, 근원경 생장은 중도(2.0 g/L)의 시비구에서 가장 높은 생장량(4.76±0.18 mm)을 나타내어 다른 처리구보다 유의적으로 높게 나타났다(p<0.0001). 묘목품질지수(SQI)는 중도(2.0 g/L)의 시비구에서 0.83으로 가장 높게 나타났다. 전체 엽록소 함량은 약도(1.0 g/L) 의 시비구에서 16.19 mg/g으로 가장 높게 나타났다. 단수처리에 따른 시비구별 편백나무 묘목의 ABA 함량은 과시비로 인해 엽 피해가 발생하여 생육이 건전하지 못한 강도(3.0 g/L)의 시비구를 제외하면 중도(2.0 g/L)의 시비구에서 가장 낮은 ABA 함량 값(3671.70 ng/g)을 나타냈고, 전체 엽록소 함량은 중도(2.0 g/L)의 시비구에서 건조스트레스에 따른 엽록소의 파괴가 적어 가장 높은 엽록소 함량 값(15.12 mg/g)을 나타냈다. 따라서 편백나무는 중도(2.0 g/L)의 시비구에서 건조스트레스에 따른 ABA의 함량이 가장 적고, 엽록소의 함량은 가장 높게 나타나 편백나무의 내건성 증진을 위한 적정 시비수준은 중도(2.0 g/L)라고 판단된다.

The present study investigated pine trees, which forms a major plantation species in Korea, with the objective of improving the survival rate of pine trees after planting. Growth responses and characteristics were assessed by controlling the level of fertilizer application, which is a basic controlling the growth of pine seedlings, to identify the optimal fertilization treatment. Pine tree seedlings were grown in 104 containers and were examined 8 weeks after planting. Stem height and were measured at 4-week intervals. In terms of fertilization treatment for 1-0 pine seedlings, the treatment group with gradually-increasing fertilizer concentration (500→1000→1000 →1000mg·L-1) had the biggest increase in stem height and diameter at the root. The survey results indicated that the increased concentration treatment group and the gradually-increasing concentration treatment group had more growth compared with that in the fixed concentration treatment group. The gradually-increasing concentration treatment group (500→1000→1000→1000mg·L-1) had the highest total dry matter production. Nine weeks after fertilization, the tips of the pine leaves turned yellow in the fixed concentration treatment group (3000mg·L-1). The same phenomenon was observed in the treatment group in which the concentration was increased to 2000mg·L-1, and in the gradually- increasing concentration treatment group, when the concentration was raised up to 2000mg·L-1. We concluded that the optimal fertilization conditions for producing healthy pine 1-0 seedlings involve fertilizing once a week with Multifeed 19 at 500mg·L-1 during the seedling period, Multifeed 19 at 1000mg·L-1 during the rapid growth period, and Multifeed 32 at 1000mg·L-1 during the maturation period.

The purpose of this study was to analyze whether FSH and LH hormone treatment directly or indirectly affect embryo development in embryonic development. To determine this, we compared the development of embryonic cells through the expression pattern of MMPs. As a result, 33.8% of blastocysts were formed in FSH added group, 20.8% in LH added group and 10% in FSH + LH added group. In addition, the activity of MMP-9 was highly detected in the FSH-added group, and the expression of Casp-3 was much lower than that of the other groups. These results suggest that the addition of FSH seems to increase the activity of MMP-9 in embryonic cells, and that LH, on the contrary, may activate MMP-2 activity. In addition, the expression level of MMP-2 in the FSH-added group was high in the Trophoblast cell group and in the LH-added group, the hormone ideal secretion might affect the development of the embryonic cell.

본 연구는 티모시 건초와 농후 사료 위주의 사료를 급여한 한우 씨수소 정소상체 정자 체외수정 효율 조사를 통해 정자의 활용 가능성을 조사하였다. 농후 사료는 체중의 1.8%를 급여하고 양질의 티모시 건초를 자유채식 시킨 14개월령 거세우의 정소에서 분리된 정소상체 미부의 정자를 회수하고 동결 흉해 후 체외수정을 실시한 결과는 다음과 같다. 웅성전핵과 자성전핵이 형성(2PN)된 난자는 정상수정으로, 1개의 전핵(1PN), Expanded Sperm Head (ESH), Polyspermy 형태는 비정상적인 수정의 형태로 평가하였다. 정상적으로 수정된 난자의 비율은 정소상체 정자의 경우 전체 침투율은 49.7% 그리고 정상적인 2PN을 가진 난자는 18.5%를 보였으며, 대조구 정자의 전체 침투율은 54.4%로서 정소상체 정자 보다 높은 결과를 보였으나 유의적인 차이를 보이지는 않았다. 정상적으로 2PN을 형성한 비율은 36.7%로서 정소상체 정자를 이용한 정자 보다 높았으나 유의적인 차이는 없었다. 체외수정 후 발달률 조사에서 정소 상체 정자의 분할률은 81.2%, 대조구 정자는 82.7%로 유사한 결과를 보였으나, 배반포 발달률은 정소상체 정자 24.4%와 대조구 정자 12.2%로 정소상체 정자를 사용한 난자의 발달에서는 유의적으로 높았다(p<0.05).

In this study, we examined sperm penetration and blastocyst developmental rate of oocytes to determine fertilizability of cauda epididymal spermatozoa in Hanwoo bull. One testicle with epididymides were castrated from one Hanwoo bull (14 months of age) and transported to laboratory. Spermatozoa recovered from cauda epididymis by mincing with semen extender (Optixcell, IMV, France) and cryporeserved in liquid nitrogen tank until use. As control, frozen Hanwoo semen was used. Cumulus oocyte complexes (COCs) were collected from follicles (2-8 mm) of slaughtered ovaries and 10 to15 COCs were matured in 50μl droplet with M-199 media supplemented with 10% fetal bovine serum, 10μg/ml FSH, 10μg/ml LH, 10μg/ml EGF for 22 to 24 hours in a humidified atmosphere of 5% CO2 in air. After maturation of COCs, matured COCs were co-incubated with cauda epididymal spermatozoa in 100μl droplet in modified Brackett and Oliphant media supplemented with 2.5 mM theophylline for 12 or 18 hours under 5% CO2 in air. Sperm concentration was adjusted to 5 × 106cells/ml. After IVF for 18 hours, presumptive zygotes were cultured in modified synthetic oviductal fluid with 1mM glutamine, 12 essential amino acids, 10 μg/ml insulin under 5% CO2, 5% O2 in air. In experiment 1, we examined sperm penetration rate at 12 hours of IVF of frozen-thawed epididymal sperm. Total penetration rate among cauda epididymis and control were not significantly different (mean±standard error, cauda epididymis and control vs. 49.7±11.3 and 54.4±12.8%) In experiment 2, cleavage and blastocyst development rate were evaluated at day 2 and day 8 after IVF for 18 hours. Cleavage rate among cauda epididymis and control was similar different (cauda epididymis and control vs. 81.2±3.4 and 82.7±2.5%). However, blastocyst developmental rate of cauda epididymis group was significantly higher than that of control group (cauda epididymis and control vs. 24.4±1.6 and 12.2±2.8%, p<0.05). In conclusion, cauda epididymal spermatozoa in Hanwoo bull has high fertilizability and embryo development. Cauda epididymal sperm can be used as an alternative to ejaculated frozen sperm in vitro.

Alpha-linolenic acid (ALA; n-3 18:3), a one of omega-3 fatty acid, is mainly contained in chloroplast of plant and ALA is an essential fatty acid, not synthesized in mammalian body, it must be supplied from foods. Polyspermy is especially high on in vitro fertilization (IVF) in pigs, which is a major obstacle to in vitro embryo production systems. In our previous study, when ALA was supplemented during in vitro maturation (IVM), the methaphase-II rate and gluthathione level was increased. The objective of this study was to evaluate the effects of alpha-linolenic acid (ALA) supplementation during IVM and subsequent of IVF in pigs. The cumulus-oocyte complexes (COCs) were submitted to IVM medium containing 0, 25, 50, and 100 μM ALA for 44 h. After 44 h of IVM, denuded oocytes were co-cultured with spermatozoa during 18 h. After 18 h of in vitro fertilization, oocyte were using aceto-orcein method, to evaluated penetration rate, monospermy (number of monospermy oocytes/total oocytes), and the IVF efficiency (number of monospermy/total penetrated oocytes). In results, 25 and 50 μM ALA groups were significantly increased on penetration rate compared with 100 μM ALA group (p<0.05). Similarly, monospermy rate were significantly increased 25 and 50 μM ALA groups than control group (p<0.05). IVF efficiency was no significant difference between control and ALA treatment groups. Our findings suggested that treatment of ALA supplementation during in vitro maturation (IVM) and subsequent of in vitro fertilization in pigs, ALA can increase IVF efficiency by effectively blocking polyspermy and increasing monospermy some mechanism in porcine oocytes. However, the study of mechanism by which ALA blocks polyspermy are needed, and this study suggests that ALA has a positive effect on in vitro production of porcine oocytes by decreasing polyspermy. This work was supported by the National Research Foundation of Korea (NRF) grant funded by the Korea government (Ministry of Education) (2016R1D1A1B03931746).

Mitochondrial and mitochondrial DNA (mtDNA) is maternally inherited in humans and most animals. The degradation of sperm-borne mitochondria after fertilization assures normal preimplantation embryo development and may prevent mitochondrial diseases derived from heteroplasmy. Although it has been known that ubiquitin-proteasome system (UPS) is the major degradation pathway of post-fertilization sperm mitochondria in mammals, it is unclear how the UPS, which is able to get rid of single protein molecule at a time, can eliminate whole sperm mitochondrial organelle. We considered that the autophagy receptors [sequestosome 1(SQSTM1), microtubule-associated protein 1 light chain 3 (LC3), and gamma-aminobutyric acid receptor-associated protein (GABARAP)] and the non-traditional mitophagy pathways involving UPS and the ubiquitin-binding protein dislocase, valosin-containing protein (VCP) may act independently or in concert during post-fertilization sperm mitophagy. We found that the association of SQSTM1 with sperm mitochondria was displayed in both pig and rhesus monkey zygotes after fertilization. Sperm mitochondrial proteins [mitochondrial trifunctional enzyme subunit alpha (HADHA), mitochondrial aconitase 2 (ACO2), and mitochondrial ATP synthase H+ transporting F1 complex β-subunit (ATP5B)] co-purified with the synthetic, SQSTM1-derived, ubiquitin-binding UBA domain were identified. Also, the accumulation of GABARAP-positive protein aggregates was observed around sperm mitochondrial sheaths in fertilized oocytes, which reflects autophagosome formation. Furthermore, the inhibition of VCP delayed the process of sperm mitophagy and completely blocked it when embryos were co-injected with autophagy-targeting antibodies, such as anti-SQSTM1 and/or anti-GABARAP. Thus, both SQSTM1-dependent autophagy pathway and VCP-mediated proteasomal proteolysis facilitate post-fertilization sperm mitophagy in mammals. This explains how the proteolytic pathway can coordinate autophagy pathway to degrade the sperm mitochondrial sheath inside the fertilized oocyte.

농업생산물의 질적인 생산을 위해 비료와 농약과 같은 화학물질의 사용이 증가하고 있다. 이러한 화학물질은 토양 내의 지하수를 통해 넓은 범위로 확산되어 토양오염을 악화 시킨다. 이를 해결하기 위해 토양오염의 직접적인 영향을 받는 농업생태계에서는 화학비료의 사용을 줄이기 위하여 가축분뇨나 SCB액비 등의 농축산 부산물을 비료자원으로 활용하는 유기질비료 연구가 진행되고 있다. 이에 본 연구에서는 농축산 부산물과 같이 재활용되지 않았던 폐모발을 비료자원으로 활용하고자 하였다. 17승리협동조합에서 개발한 모발비료는 폐모발의 단백질을 가수분해하여 식물용 아미노산 액비로 제조한 것으로 비료 생산에 필요한 제반 준비 및 성적분석과 미생물 시험을 마쳐 상용화 준비 과정에 있는 비료이다. 이에 본 연구에서는 모발액비가 식물생육에 미치는 영향을 분석하여 모발액비의 성능 평가를 실시하였다. 본 연구는 충청북도 음성군 대소면 미곡리에 위치한 수현농원에서 2018년 7월부터 9월까지 진행되었다. 공시식물은 생육환경에 따라 엽색 변화가 나타나고 단기간 뚜렷히 생육을 관찰할 수 있는 식물인 크로톤(Codiaeum variegatum), 몬스테라(Monstera deliciosa), 파파야(Carica papaya), 고무나무(Ficus elastica) 4종을 선정하였다. 실험구의 토양은 원예용 상토, 원예용 무비상토 그리고 피트모스를 혼합하여 조성하였다. 실험구는 비료의 시비방법에 따라 무처리구(control), 화학비료 처리구, 모발비료1.0 처리구, 모발비료2.0 처리구로 구분하여 5반복으로 총 80개를 조성하였다. 시비방법은 처리구 모두 200ml씩 주 1회 시비하였으며, 화학비료와 모발비료1.0의 경우 액비의 EC 농도를 1.0dS/m에 맞춰 시비하였고 모발비료2.0의 경우 EC 농도를 2.0dS/m에 맞춰 시비하였다. 생육측정은 엽장, 엽폭, 엽수, 초장, 근경을 디지털 캘리퍼스와 자를 이용하여 2주 간격으로 처리구당 3반복 측정하였으며, 엽색과 엽 두께 등의 시각적인 요소도 고려하였다. 연구 결과, 크로톤, 몬스테라, 파파야, 고무나무 모두 첫 한 달간은 뚜렷한 경향을 보이지 않았으나 한 달이 지난 후부터는 각 처리구별로 차이를 보였다. 두 달간의 평균 생육차이를 봤을 때, 크로톤의 경우 엽장, 엽폭, 초장은 모발비료2.0, 모발비료1.0, 화학비료 순으로 큰 차이를 보였다. 엽수의 경우 화학비료, control, 모발비료1.0, 모발비료2.0 순으로 차이를 보였으나 모발비료2.0의 경우 엽수가 적은 반면 엽색이 더 선명하고 다양하였으며 다른 처리구와 다르게 꽃대가 올라와 꽃을 피웠다. 몬스테라는 전반적으로 모발비료보다 화학비료에서 좋은 생장을 보였으며 엽수는 모발비료가 화학비료보다 더 큰 차이를 보였다. 파파야의 경우 공시식물 중 가장 뚜렷한 성장을 보였다. 엽장, 엽폭, 경경의 평균 생장차이는 화학비료와 모발비료1.0의 생장은 비슷하였으나 모발비료 2.0의 생장이 큰 차이를 보였다. 초장의 경우는 모발비료2.0, 모발비료1.0, 화학비료, control 순으로 생장 차이를 명확히 보였다. 엽수는 큰 경향을 보이지 않았는데 이는 생장하면서 기존의 잎을 떨어트리는 파파야의 생장특성 때문인 것으로 사료된다. 고무나무는 엽장, 엽폭, 경경의 경우 화학비료와 모발비료2.0이 비슷한 차이를 보였으며 다음으로 모발비료1.0, control 순으로 차이를 보 였다. 초장과 엽수에서는 모발비료1.0, 화학비료, 모발비료2.0, control 순으로 차이를 보였다. 고무나무는 크로톤과 비슷하게 생육의 차이는 명확하지 않았지만 모발비료2.0에서 시각적으로 엽육이 두껍고 색이 더 선명하였다. 결과적으로 모발액비 처리구를 무처리구와 비교하였을 때 모발액비는 비료로서 식물에게 영양분을 충분히 공급하는 것으로 판단된다. 다만 화학비료와는 뚜렷한 차이는 보이지 않았기 때문에 식물체와 토양을 분석하여 화학비료와 모발액비가 각각 식물과 토양에 어떤 영향을 미치는지 세부적인 추가 연구가 필요할 것으로 사료된다.

하늘매발톱꽃(Aguilegia flabellata var. pumila K.) 육묘시 적정 용토종류 및 시비 수준을 구명코자, 용토종류는 원예용 상토, 피트모스, 밭흙, 원예용상토 + 피트모스(1:1, v/v), 원예용상토 + 밭흙(1:1, v/v), 밭흙 + 피트모스(1:1, v/v), 밭흙 + 퇴비(1:1, v/v), 원예용상토 + 피트모스 + 밭흙(1:1:1, v/v/v) 혼합용토를 사용하였으며, 시비 시험은 기준시비량을 질소 – 인산 – 칼리 = 12 – 9 – 12kg/10a(초화류 표준시비량)을 기준으로 하여 기준시비량 대비 0%, 50%, 75%, 100%, 125% 및 150%를 처리하여 시험한 결과, 용토종류는 용토별 화학적 특성은 피트모스가 pH 및 양분함량이 가장 낮았고, 원예용 상토 및 퇴비가 혼합된 용토에서 EC를 비롯한 양분함량이 높은 경향이었다. 발아율은 피트모스 단용 처리에서 파종 30일 및 45일에 각각 48% 및 54%로 가장 낮았고, 밭흙 + 퇴비 혼합용토에서는 86%였고, 그 외 용토에서는 92~98%였다. 파종 후 120일과 150일의 묘생육은 원예용상토에서 가장 좋았다. 시비량별 생육은 무처리에 비하여 시비 처리구에서 생육이 좋았으며, 식재 100일 후 생육에서는 기준 시비량 75%, 100% 및 125%에서 양호한 경향을 보였다. 기준 시비량 150% 처리에서는 오히려 생육이 감소하는 경향이었다. 결과적으로 하늘매발톱꽃 육묘시 육묘용토에서는 원예상토를 이용하고 시비기준은 기준시비량 대비 75%로 관리하는 것이 전반적인 생육이 양호하였다.

The present study was aimed to determine the effects of green tea extract (GTE) and beta-mercaptoethanol (β-ME) supplementation in boar sperm freezing extender on in vitro fertilization (IVF) and reactive oxygen species (ROS) and glutathione (GSH) levels of presumptive zygotes (PZs). Experimental groups were allocated into lactose egg yolk (LEY) without antioxidant (control), GTE (1,000 mg/l in LEY) and β-ME (50 μM in LEY). In freezing, spermatozoa extended with LEY were cooled to 5°C for 3 h and then kept at 5°C for 30 min following dilution with LEY containing 9% glycerol and 1.5% Equex STM. The final sperm concentration was 1 × 108/ml. Spermatozoa were loaded into straws and frozen in nitrogen vapor for 20 min. For IVF, oocytes were matured in NCSU-23 medium and co-cultured with spermatozoa following thawing at 37°C for 25 sec. At 12 h following IVF, IVF parameters (sperm penetration and monospermy) were evaluated. In addition, GSH and ROS levels of PZs were determined by Cell Tracker Blue CMF2HC and DCHFDA, respectively. IVF parameters did not show any significant difference among the experimental groups. GSH and ROS levels of PZs were not significantly different between groups. In conclusion, antioxidant supplementation in boar sperm freezing could not influence IVF parameters, ROS and GSH levels of PZs.

‘매향’ 딸기의 재배 시 1,000ppm 농도의 탄산시비가 품질과 저장성에 미치는 영향을 알아보고자 본 연 구를 수행하였다. 딸기 수확 후 품질을 비교 하였는데, 경도, 당도, 그리고 산도가 무처리구에 비해 탄산 가스 처리구에서 높은 수치를 나타내었다. 기존 유통 조건인 관행저장 처리구는 10일간, 20,000cc OTR 필름으로 MA저장 처리구는 20일간 8oC에서 저장하였다. 저장 중 생체중 감소율은 탄산시비 처리에 관계 없이 MA저장 처리구가 저장종료일까지 1%의 낮은 감소를 보였다. 저장 중 MA저장 처리구의 포장내 산소, 이산화탄소, 그리고 에틸렌가스 농도는 탄산시비 처리에 따른 유의성있는 차이를 보이지 않았다. 저장 종료일의 경도는 저장방법에 관계없이 탄산시비 처리구가 무처리구보다 높은 수치를 나타내었으나, 당도와 산도 그리고 과색은 처리에 따른 차이가 나타나지 않았다. 패널테스트를 통한 외관은 탄산시비 처리하여 MA저장한 처리구가 가장 우수하였으며, 이취는 탄산 시비 처리하여 관행저장한 처리구가 가장 낮았다. 곰팡이 발생률은 두 저장방법 모두 무처리구에 비해 탄산시비 처리구가 낮은 수치를 보였다. 이상의 결과를 볼 때, 재배 중 탄산시비는 ‘매향’ 딸기의 경도를 높여 8oC 저장 중 외관상 품질과 저장 후 경도를 높게 유지시켜 저장성을 향상시킬 수 있으며, 저장방법으로는 MA저장이 저장기간을 연장시킬 것으로 판단된다.

Embryo development is very important in reproductive physiology of domestic animal experiments. Therefore, in the above experiment, we want to provide a lot of important information with regard to fertilization breeding by looking at the expression of transcription factor by early embryo development. It is known that mice affect early embryonic development of many transcription factors, many experiments are underway. Different types of mammals showed different expression patterns, thus, we used pigs, which are known to be the most similar to humans, to observe the expression of transcription factors in early embryonic development. Transcription factors were observed using CDX2, OCT4 and E-CADHERIN. CDX2 was expressed in 2 cells, OCT4 and E-CADHERIN were expressed in blastocyst. OCT4 was expressed specifically in ICM (inner cell mass) in blastocyst, and E-CADHERIN was expressed in cell wall and junction of blastocyst. These results show that CDX2, OCT4 and E-CADHERIN play an important role in early embryonic development in pigs.

This study aimed to evaluate the growth of Ilex cornuta Lindl. & Paxton, Cotoneaster dammeri, Ardisia pusilla ‘Variegata’, and Ilex aquifolium ‘Silver Queen’ when sphagnum moss was used for purpose of export and the pottery plants were submitted to different watering and quick versus slow release fertilizer. The growth of I. aquifolium 'Silver Queen' watered 50 mL every 3 days was the highest with 16.0 cm in plant height, 79.3 in leaf number, 178.2 cm2 in leaf area, and 18.5 g in fresh weight. C. dammeri also grew best when watered every 3 days. However, the survival rate was 100% for I. aquifolium 'Silver Queen' watered at 12-day intervals and C. dammeri watered at 6-day intervals or more. With quick release fertilizer of 1,000 – 2,000 mg·L-1 applied at 1- to 4-week intervals, I. aquifolium 'Silver Queen' and C. dammeri, plant height, number of leaf, leaf area, and fresh weight increased as fertilizing intervals were shorter. During the short quick release fertilizing at 4-week intervals, the survival rate remained 100%. With slow release fertilizer of 0.5 mg, 1 mg, or 2 mg applied at intervals of 6, 12, and 18 weeks, I. cornuta Lindl. & Paxton and A. pusilla ‘Variegata’ plant height, number of leaf, leaf area, and fresh weight increased with increase of fertilizer amounts and shorter intervals of fertilizing. However, concentration of fertilizer had no effect on plant growth. During the short slow release fertilizing at 18-week intervals, the survival rate remained 100%. Therefore, to improve the quality of small woody plants in the pottery aimed for export, it is preferable to water at intervals of 3 days after acclimation, and use either quick release fertilizer at 3-week intervals or slow release fertilizer at 12-week intervals.

The present study was conducted to investigate the effect of caffeine and theophilline on sperm motility during in vitro fertilization (IVF). Briefly, commercial boar semen was centrifuged and resuspended (5x107 sperms/ml) with fertilization medium (mTBM) supplemented with 2 mM caffeine (Caf), 5 mM theophylline (The), 2 mM caffeine + 5mM theophylline (Caf + The), and not supplemented control. The semen parameters of the four groups were analyzed by computer-assisted semen analysis (CASA, Medical Supply Co. Ltd) system at 6 h as time for IVF at 38.5 C under 5 % CO2 in air. The groups were examined 11 semen parameters such as total motility (TM), curvilinier velocity (VCL), straight-line velocity (VSL), average-path velocity (VAP), and hyperactivated (HYP), etc. A total motility of control group (41.3 %) at 6 h showed significantly (P<0.05) higher than those of other groups (Caf, 37.2; The, 35.2; Caf + The, 30.1 %). Results from many other sperm parameters indicated that the theophylline and caffeine negatively affected on sperm motility during IVF. These results suggested that the supplementation of caffeine and/or theophylline was not essential for IVF in pigs. To prove this suggestion, further studies are needed to analyze fertility and embryonic development after IVF with or without the supplementation of caffeine and/or theophylline.