This study was designed to evaluate effects of BSA, PVA, gonadotropins and follicle shell during IVM of porcine oocytes and subsequent development to the blastocyst stage after IVF. Cumulus oocyte complexes (COCs) were cultured in TCM-199 media containing 4 mg/ml BSA and 1 mg/ml PVA during IVM for 44 hr. To compare the effect of gonadotropins on oocyte maturation, COCs were cultured with FSH+LH, FSH, LH and FSH-LH-free media during IVM, respectively. Also, different number of follicle shells (0, 2, 4 and 6) was used to examine whether the presence of follicle shell in culture medium affects oocyte maturation. The percentages of fertilization and blastocyst formation, respectively, were higher in the medium containing the PVA (49.0 and 17.9%) than those containing the BSA (40.0 and 12.2%). Significantly higher rates of MII oocytes were in the presence of FSH+LH and FSH (88.6 and 85.1%) compared to other treatments (64.0 and 53.4% at LH and FSH-LH-free media). Co-culture with inverted follicle shells in 2 ml maturation medium enhanced the developmental competence of porcine oocytes. In conclusion, PVA could be used as a macromolecules instead of BSA, and FSH and follicle shell played important roles in maturation of porcine oocytes.

본 연구는 체외 성숙된 난자와 동결 융해 정자를 이용한 돼지의 체외 수정 과정에서 난구 세포의 존재가 정자 침투율, 웅성전핵 형성률 그리고 후기배로의 체외 발육에 미치는 영향을 알아보기 위하여 수행되었다. 돼지 난소로부터 난자-난구세포 복합체를 채취하여 eCG/hCG, 10% 돼지 난포액, epidermal growth factor 등이 첨가된 TCM 199 배양액에서 44시간 배양하여 체외 성숙을 유도하였다. 성숙 배양 후 난구 세포를 제거한 난자와

고령지농업연구소에서 육성된 '자심' 감자(Solanum tuberosum L.) 괴경의 자주색 육색은 안토시아닌 색소의 축적에 기인한다. 본 연구는 이러한 '자심' 감자의 괴경 조직에 안토시아닌이 축적될 때 결정적으로 관여하는 기상 환경요인을 분석하고 색소 함량 증대를 위한 질소시비 기준을 설정하기 위하여 수행되었다. 기상 환경요인이 뚜렷하게 다른 3개 지역에서 파종시기 또는 재배 작형을 달리하여 '자심' 감자를 재배하고 수확된 괴경의 안토시아닌 함량을 분석한 결과, 수확일을 기준으로 수확전 30일 동안의 야간온도가 낮을수록 괴경내 안토시아닌 축적이 왕성한 것으로 나타났다. 안토시아닌 축적에 영향을 미치는 질소시비 수준의 효과를 분석한 결과 고랭지인 대관령에서는 권장시비량 처리구에 비해 감량시비 혹은 증량시비 처리구에서 안토시아닌 함량이 낮은 결과를 보였다. 그러나 평난지인 강릉에서는 시비수준간 뚜렷한 차이를 보이지 않았다. 이러한 결과로 볼 때 안토시아닌이 고농도로 축적된 자주색 육색의 '자심' 감자를 생산하기 위해서는 적절한 재배지대 및 작형의 선택과 시비관리가 매우 중요할 것으로 생각된다.

본 연구는 돼지 체외 수정란의 생산에 있어서 체외성숙 시간이 핵성숙, 다정자 침입율 및 배 발생과 배반포의 부화율 배반포의 부화에 미치는 효과를 검토하였다. 돼지 난포란의 핵성숙율이 체외성숙 36, 38, 40, 42 및 44 시간째에 각각 68.0, 78.0, 79.5, 73.8 및 81.8%로서 각 군간에 유사한 경향이었으며, 체외 수정 후 다정자 침입율도 각각 48.7, 36.0, 44.4, 38.9 및 31.8%로서 차이가 없었다. 체외 성숙 시

본 연구는 돼지 수정란의 체외 성숙 및 체외 배양액의 retinol 첨가 효과를 규명하기 위하여 체외 성숙 및 체외 배양액에 retinol을 첨가하여 수정란의 체외 발달에 미치는 영향을 구명하고자 수행되었다. 체외 성숙 배양액에 retinol을 첨가한 결과 성숙율은 으로 각 처리구 간의 유의적인 차이가 없었다(p>0.05). 체외 수정 후 배반포로의 발달율은 첨가구에서 의 발달율을 나타내어 타 처리구에 비하여 유의적으로(p<0.05) 높게 나타났으며,

In the present study, we investigated the effects of genotypes on in vitro maturation and fertilization in porcine fresh/frozen-thawed oocytes. The porcine cumulus-oocyte complexes (COCs) were divided into four groups according to whether they were: (1) in vitro matured; (2) cryopreserved and in vitro matured; (3) in vitro fertilized and (4) cryopreserved, and in vitro fertilized. Maturation of porcine COCs was accomplished by incubation in NCSU23 medium. Immature oocytes were cryopreserved by Open Pulled Straws (OPS) method according to Vajta et al., (1998). Oocytes stained by Acetic-Orcein method were observed under the microscope. DNA extracted from the ovaries was analyzed by RAPD (random amplified polymorphic DNA) and SSCP (single strand conformational polymorphisrrt) method. The rates of oocytes maturation and fertilization were significantly high in AA genotype. The results indicated that in vitro maturation and fertilization in porcine fresh/frozen-thawed oocytes may be affected by genotypes in pigs.

This experiment was to investigate whether the mitochondria function assessment can be used for the prediction of sperm fertility through examining the correlation between mitochondria fluoromicroscopic frequency of frozen-thawed eight Hanwoo bull semen using rhodamine123 (R123) and in vitro embryo development following fertilization. Individual sperm were stained in 5ug/mL R123-added calcium-free Sp-TALP for 30 min at 0 h, 6 h, 12 h and 24 h after thawing and examined their mid-piece under an epifluorescence microscope using 495 nm excitation filter (x1,000). Three replications were taken, and at least 300 sperm per individual were examined. When semen samples were separated into two groups (good and poor) by sperm motility and fluorescent frequencies at just after thawing, average fluorescent frequencies were remarkably reduced as time going (0 h; 53.29~72.94%, 6 h; 21.40~58.90%, 12 h; 8.26~25.93%, 24 h; 1.00~13.78%, irrespective of selected group, and there were no differences at 6 h or 12 h after thawing between selected groups but indicated significant difference at 24 h after thawing (p<0.05). In vitro fertilization rates in good and poor groups ranging 70.8~77.8% and 52.1~84.5%, respectively, were not significantly different. However, in vitro development rates of the same groups ranging 25.7~40.0% and 12.9~1.8%, respectively, were significant different (p<0.05). These results demonstrate that mitochondria fluoromicroscopic assessment of frozen-thawed bovine sperm may be used as a criterion to select more fertile sperm.

인간의 불임을 극복하기 위한 번식공학 기술의 효율성을 증가시키기 위해 성세포의 동결이 널리 수행되고 있으나 동결 기술의 효율성에 있어서 논란의 여지가 있다. 본 연구에서는 체외수정란을 생산하기 위한 난자세포질내 정자미세주입(ICSI) 시술에 사용되는 정자와 이들 기술을 이용 생산한 체외수정란의 동결이 배 발생 및 임신에 미치는 효과를 조사하였다. ICSI방법으로 체외수정란을 생산하는 경우 정자의 동결이 체외수정, 발생 및 임신에 영향을 미치지 않았으며, 특히 동결융해한 사출 및 정소정자에 의한 체외수정율과 발생율 및 임신율도 차이가 없었다. 한편 체외수정란을 동결하는 경우 완만동결과 초자화동결에 의한 체외수정란의 생존율과 임신율은 차이가 없었으나, 동결수정란은 신선수정란에 비하여 임신율이 유의하게 낮았다(p<0.05). 결론적으로 ICSI에 사용되는 정자와 달리 ICSI에 의해 생산된 수정란을 동결하는 경우 임신율을 저하시킬 수 있다.