Recent studies showed that tight junctions (TJs) integrity and assembly are required for blastocyst development in mouse and pig models. However, the biological functions of TJs associated with embryo implantation and maintenance of pregnancy were not investigated yet. To examine whether disrupted TJs affect further embryo development, we employed RNAi approach and inhibitor treatment. The embryos were injected with Cxadr (Coxsackievirus and adenovirus receptor) siRNA for knock down (KD) and treated with Adam10 (A Disintegrin and Metalloproteinase specific inhibitor 10; GI254023X; SI). We compared blastocyst development and paracellular sealing assay using FITC dextran uptake between control and KD or SI embryos. Finally, we transferred control and Cxadr KD or Adam 10 SI treated blastocyst to uteri of recipients. Cxadr KD and Adam 10 SI showed lower blastocyst development and more permeable to FITC-dextran. Moreover, we observed that half of KD and inhibited embryos failed to maintain pregnancies after the second trimester. Our findings suggested that TJs integrity is required for the maintenance of pregnancy and can be used as a selective marker for the successful application of assisted reproduction technologies.

배아발생초기에 분화되는 영양외배엽(TE:trophectoderm)은 태반형성에 기여하는 첫 번째 세포 종류 (type)으로 생식과정에 중요한 역할을 한다. 내부세포괴(ICM)과 더불어 TE로 분화되기 위한 세포운명(cell fate)을 조절하는 전사인자(transcription factor)에 대한 연구는 생쥐, 가축, 인간 등에 대해서 많이 연구 되어 왔다. 하지만 구조형태학적 측면에서 살펴보면 TE의 상피세포화와 포배강 형성에 관한 연구는 주로 tight junction 단백질, 이온 경사 및 물 이동 통로 단백질 등 직접 관련된 개별 유전자/단백질에 대한 연구만 진행되었지만 이들 유전자의 발현을 조절하는 전사인자에 대한 연구는 보고되지 않았다. 본 연구는 RNA 간섭 방법을 이용하여 tight junction과 포배강 형성에 필요한 유전자의 전사인자인 Tcfap2c을 규명하였다. 또한 Tcfap2c는 Cdkn1a(p21)의 발현을 억제하여 상실배에서 배반포로 발달하기 위한 세포증식에 관여한다.