꽃송이버섯 추출물의 항염활성 효과 Anti-inflammatory effects of Sparassis crispa extracts
pp.46-51
꽃송이버섯 추출물은 염증반응 시 유도되는 NO 생성을 저해하는 활성이 있는 것으로 나타났으며, 200 μg/ml의 꽃송이버섯 추출물을 처리하였을 때 NO 저해능이 최대 효과를 보였고 RAW264.7 cell에서는 대조군과 유사한 수준으로 NO 생성을 억제하였다. 이러한 NO 생성의 저해는 iNOS의 발현이 감소한 것에 의한 결과임을 단백질과 mRNA의 발현량 변화를 통하여 확인하였으며, mRNA 발현 변화는 iNOS 유전자의 전사를 담당하는 전사인자인 NF-ĸB와 STAT-1의 활성감소에 의한 결과임을 western blot을 통하여 확인하였다. 특히, NF-ĸB의 활성감소는 IĸBα의 활성증가에 의한 NF-ĸB의 억제능 향상에 의한 것임을 확인하였고, 활성억제된 NF-ĸB가 핵 내부로의 이동이 저해되면서 iNOS 유전자 발현에 영향을 미친 것임을 확인하였다. 그러므로, 꽃송이버섯 추출물은 NO 저해능을 이용한 항염증소재로서 염증성질환의 완하에 도움이 될 것으로 사료된다.
Sparassis crispa is a medicinal mushroom, which has been reported to have anti-cancer effect. In this study, we designed to investigate the effects of Sparassis crispa extracts on the production of nitric oxide (NO) in LPS-stimulated RAW264.7 cells. The pre-treatment of the extracts prior to add LPS in RAW264.7 cells suppressed NO production and iNOS expression at protein and mRNA levels. The phosphorylation of IĸBα was inhibited by the extracts, which was induced through suppressing the activation of NF-ĸB. Sparassis crispa extracts showed the effect on the down-regulation of STAT-1 activation in a dose-dependent manner. In LPS-stimulated RAW264.7 cells, NF-ĸB was translocated into the nucleus, while the treatment of Sparassis crispa extracts induced to sequestered NF-ĸB in the cytosol. These experimental results determined that Sparassis crispa extracts play a inhibitory role in inflammatory reactions via regulating NO production, which suggests potential as a component of inflammatory drugs.
서론
재료 및 방법
실험재료 및 추출물 조제
세포 배양
꽃송이버섯 추출물의 세포독성 측정
꽃송이버섯 추출물의 NO 생성 저해 효과 측정
Reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RTPCR)을 이용한 iNOS의 mRNA 발현 분석
Western blot을 이용한 iNOS의 단백질 발현 분석
Immunofluorescent microscopy
통계학적 분석
결과 및 고찰
꽃송이버섯 추출물의 세포생존율에 미치는 영향
꽃송이버섯 추출물의 NO 저해능
꽃송이버섯 추출물의 iNOS 단백질과 mRNA 발현 조절 효과
꽃송이버섯 추출물의 iNOS 전사인자 활성조절 효과
꽃송이버섯 추출물에 의한 NF-ĸB의 세포내 위치전환 억제 효과
적요
참고문헌