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pp.9-13
생물 반응기를 이용한 현삼 종묘의 생산에 있어 적정 탄소원과 질소원의 종류 및 농도와 , 생물 반응기 형태에 대한실험의 결과는 다음과 같다. 탄소원으로서 과당을 사용하였을 때 자당 사용의 경우보다 다신초의 형성은 좋았으나, 비정상적인 개체가 많아 종묘 생산용으로는 부적합하였다. 질소원으로 질산태 질소의 효과적 이었으며, 암모니아태 질소 413 mg/L 에 절산태 질소 1,900 mg/L 로 조합하는 것이 신초형성에 가장 적합하였는데, 500 ml 플라스크 배양에서 전 질소 함량은 3 주째 까지는 83% 에서 75% 로 완만하게 감소하다 이후 46% 로 급격히 감소하였다. 이러한 현상은 신초가 급속히 증가하는 시기와 일치하였고 생물 반응기에서는 일정한 속도로 감소되었으며, 배양 종료시인 6주 째에는 500ml 플라스크에서나 생물 반응기 배양액 내의 질소함량은 거의 남아 있지 않았다. 생물반응기의 배지내 자당은 2주째에 완전히 고갈되었으며 500ml 플라스크 배양에서 자당은 3주째에 완전히 고갈되었고, 자당에서 전환된 과당과 포도당은 절편체의 생체중이 급격히 증가되는 4주와 5 주 사이에 감소되었다. 현삼의 배양에 적합한 생물 반응기 형태는 inner loop 가없는 air lift형 sphere type이었다.
To determine the proper carbon and nitrogen sources and their proper levels for mass micro propagation of Scrophularia buergeriana Miquel, tonic and curing cough experiment were applied and a method for mass cultivation by using bioreactors (2.5 L) was expinined. Proper ratio of NH4NO3 : KNO3 was 413 mg/L : 1900 mg/L for multiple shoot production. Sucrose was more effective than glucose or fractose as carbon source and 3% concentration was good for shoot formation. Total nitrogen was not detected after six weeks both in 500 ml flask and bioreactor culture. Sucrose was decreased sharply after two weeks and there was no sucrose left after three weeks both in 500 ml flask and bioreactor culture. The stirrer in bioreactor caused shear stress to shoots severely. The sphere type bioreactor was better than the cylinder type and removal of inner loop in sphere type was more effective to avoid shear stress.
