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pp.95-101
환경오염원이면서 알레르기성 접촉피부염 유발제인 NiSO₄의 세포독성과 멜라닌합성에 대한 감잎 추출물의 영향을 배양 B16/F10 흑색종세포를 재료로 하여 조사하였다. 또한, 감잎 추출물의 항산화능을 lactate dehydrogenase(LDH) 활성에 의하여 조사하였다. 본 연구에서 NiSO₄는 배양 B16/F10 흑색종세포에 처리한 농도에 비례하여 세포생존율을 유의하게 감소시켰으며(P<0.001), 이 때 XTT50값은 106.7μM로 중간독성인 것으로 나타났다. 또한, 항산화제인 비타민 E는 NiSO₄에 의하여 감소된 세포생존율을 유의하게 증가시킴으로서 NiSO₄의 세포독성을 방어하였다(P<0.001). 한편, NiSO₄의 세포독성에 대한 감잎 추출물의 영향에 있어서, 감잎 추출물은 NiSO4만의 처리에 비하여 유의한 세포생존율의 증가 및 LDH 활성 감소를 보임으로서 항산화능을 나타냈다. 멜라닌화에 있어서, 감잎 추출물은 NiSO₄에 의하여 증가된 티로시나제(tyrosinase) 활성과 총멜라닌양을 모두 유의하게 감소시켰다(P<0.001). 이상의 결과로부터 NiSO4의 세포독성에 산화적 손상이 관여하고 있으며, 감잎 추출물은 항산화능에 의하여 NiSO₄의 세포독성을 효과적으로 방어하였다. 또한 감잎 추출물은 티로시나제 활성과 총멜라닌양을 유의하게 감소시킴으로서 NiSO₄에 의한 멜라닌화를 효과적으로 방어하였다. 따라서, 감잎과 같은 천연추출성분은 NiSO₄처럼 산화적 손상과 관련이 있는 중금속의 독성으로부터의 미백 및 항독을 위한 천연소재로서의 개발적 가치가 크다고 생각된다.
To evaluate the effect of persimmon(Diospyros kaki Thunb.) leaves(PL) extract on the cytotoxicity and melanogenesis of nickel sulfate(NiSO₄), an environmental pollutant or an allergic contact dermatitis inducer, the colorimetric assay was performed to measure the cell viability and lactate dehydrogenase(LDH) activity as well as the tyrosinase activity and total amount of melanin in cultured B16/F10 melanoma cells. In this study, NiSO₄ significantly decreased cell viability in dose-dependent manner, and XTT50 value was calculated at 106.7μM of NiSO₄. The cytotoxicity of NiSO₄ was revealed to be mid-toxic in these cultures by Borenfreund and Puerner’s toxic criteria. And also, vitamin E effectively prevented NiSO₄-induced cytotoxicity by the significant increase of cell viability. PL extract showed the antioxidative activity by the significant increase of cell viability and the decrease of LDH activity compared to positive control(NiSO₄). In the melanogenesis, PL extract significantly decreased both tyrosinase activity and total amount of melanin which were increased by NiSO₄-induced cytotoxicity. From these findings, it is suggested that the cytotoxicity of NiSO₄ is involved in oxidative stress, and PL extract effectively prevented the cytotoxicity and the melanogenesis induced by NiSO₄. Conclusively, natural component such as PL extract may be a putative resources for beauty or detoxification by the prevention of the toxicity and the melanogenesis of heavy metals related with oxidative stress such as NiSO₄.
