본 연구는 제주에서 자생하는 산박하(Isodon inflexus (Thunb.) Kudo, I. inflexus (Thunb.) Kudo )의 80% 메탄올 추출물과 분획물, 그리고 분리 물질인 henryin의 항산화능 및 항염증에 관하여 조사한 것이다. 항산화 효과는 DPPH 라디칼 소거, xanthine oxidase 억제 및 superoxide radical 소거 활성 측정을 통하여 수행할 수 있는데, 산박하 추출물의 효능을 측정한 결과 superoxide radical 소거 활성에서 에틸아세테이트 분 획물과 부탄올 분획물의 IC50값이 각각 0.9 μ g/mL, 0.2 μ g/mL로 대조군인 allopurinol (2.2 μ g/mL)에 비해 우수한 억제 효능을 나타내었다. RAW 264.7 세포주를 사용한 항염 효능 평가에서, 에틸아세테이트 분획물이 강한 NO 억제 효과를 나타내었고, 이 분획으로부터 순수 분리하여 구조 동정된 물질인 henryin 역시 농도 의존 적으로 NO 억제시킴을 확인하였다. 특히, 에틸아세테이트 분획물과 henryin은 iNOS, COX-2와 염증관련 cytokine인 TNF-α, IL-6, IL-1β의 mRNA 발현을 농도 의존적으로 억제하였다. 이상의 결과들로부터 산박하 에틸아세테이트 추출물이 항산화 및 항염증 효능을 갖는 화장품 원료로서 개발 가능성이 있고 henryin은 기능성 지표물질로 활용될 수 있음이 시사되었다.

The functions of anti-oxidation and anti-inflammation were investigated with the crude 80% methanol extract, subfractions and henryin isolated from Isodon inflexus (Thunb.) Kudo (I. inflexus (Thunb.) Kudo). Antioxidative ability was evaluated by bioassays using 2, 2-diphenyl-1-1-picrydrazyl (DPPH) free radical scavenging activity, xanthine oxidase inhibition, and superoxide radical scavenging effects. Ethyl acetate and butanol fractions exhibited free radical scavenging activity on superoxide with IC50 values of 0.9 μg/mL, 0.2 μg/mL, respectively, which were stronger activity than that of allopurinol (2.2 μg/mL) as reference. For the inhibition of anti-inflammatory activity in RAW 264.7 cell, the ethyl acetate fraction showed strong inhibition activity NO production, and henryin isolated from its subfraction reduced the activity in a dose-dependent manner. Ethyl acetate fraction and henryin suppressed not only mRNA expression of iNOS and COX-2, but also the mRNA expression of pre-inflammatory cytokines such as, TNF-α, 1L-1β, IL-6, in a dose-dependent manner. These results suggested that ethyl acetate fraction of I. inflexus (Thunb.) Kudo has considerable potential as a cosmetics ingredient with an antioxidant and anti-inflammatory effects and henryin can be applied as an functional reference.

1. 서 론
 2. 재료 및 실험
  2.1. 기기 및 시약
  2.2. 산박하 추출 및 분리
  2.3. DPPH에 의한 라디칼 소거 측정
  2.4. Xanthine Oxidase 억제 및 Superoxide 라디칼 소거활성
  2.5. RAW 264.7 세포에서 NO 저해 활성 측정
  2.6. Lactate Dehydrogenase (LDH) Release를 이용한세포 독성 측정
  2.7. 항염증 관련 효소와 Cytokines의 발현 양 측정을 위한RT-PCR
  2.8. 통계처리
 3. 결과 및 고
  3.1. 산박하 추출물의 DPPH 라디칼 소거 효과
  3.2. 산박하 추출물의 Xanthine Oxidase 억제 및 Superoxide라디칼 소거 효과
  3.3. RAW 264.7 세포에서 NO 저해 효과 및 세포 독성
  3.4. 산박하 추출물에서 분리한 Compound의 NO 생성억제 활성
  3.5. 산박하 추출물 및 분리 화합물이 iNOS와 COX-2발현에 미치는 영향
  3.6. 산박하 추출물이 Pro-inflammation의 mRNA 발현에미치는 영향
  3.7. 활성물질 분리 및 동정
 4. 결 론
 Reference

• 부희정(제주대학교 생명과학기술혁신센터) | Hee-Jung Bu
• 이선주(제주대학교 화장품과학연구센터, 제주대학교 자연과학대학 화학-코스메틱스 학과) | Sunjoo Lee