본 연구는 티모시 건초와 농후 사료 위주의 사료를 급여한 한우 씨수소 정소상체 정자 체외수정 효율 조사를 통해 정자의 활용 가능성을 조사하였다. 농후 사료는 체중의 1.8%를 급여하고 양질의 티모시 건초를 자유채식 시킨 14개월령 거세우의 정소에서 분리된 정소상체 미부의 정자를 회수하고 동결 흉해 후 체외수정을 실시한 결과는 다음과 같다. 웅성전핵과 자성전핵이 형성(2PN)된 난자는 정상수정으로, 1개의 전핵(1PN), Expanded Sperm Head (ESH), Polyspermy 형태는 비정상적인 수정의 형태로 평가하였다. 정상적으로 수정된 난자의 비율은 정소상체 정자의 경우 전체 침투율은 49.7% 그리고 정상적인 2PN을 가진 난자는 18.5%를 보였으며, 대조구 정자의 전체 침투율은 54.4%로서 정소상체 정자 보다 높은 결과를 보였으나 유의적인 차이를 보이지는 않았다. 정상적으로 2PN을 형성한 비율은 36.7%로서 정소상체 정자를 이용한 정자 보다 높았으나 유의적인 차이는 없었다. 체외수정 후 발달률 조사에서 정소 상체 정자의 분할률은 81.2%, 대조구 정자는 82.7%로 유사한 결과를 보였으나, 배반포 발달률은 정소상체 정자 24.4%와 대조구 정자 12.2%로 정소상체 정자를 사용한 난자의 발달에서는 유의적으로 높았다(p<0.05).

In this study, we examined effect of sperm penetration of oocytes after in vitro fertilization (IVF) with cauda epididymal spermatozoa in Hanwoo bull after feeding of timothy hay. One testicle with epididymides was castrated from one Hanwoo bull (14 months of age) and spermatozoa recovered from cauda epididymis and cryopreserved. As control, frozen Hanwoo semen was used. Matured cumulus oocyte complexes were co-incubated with frozen-thawed cauda epididymal spermatozoa for 12 or 18 hours. After IVF, presumptive zygotes were cultured in modified synthetic oviductal fluid. In experiment 1, we examined sperm penetration rate at 12 hours of IVF with epididymal sperm. Total penetration rate among cauda epididymis and control was similar(mean±standard error, cauda epididymis and control vs. 49.7±11.3 and 54.4±12.8%). In experiment 2, cleavage and blastocyst developmental rate were evaluated at day 2 and day 8 after IVF for 18 hours. Cleavage rate among cauda epididymis and control was similar(cauda epididymis and control vs. 81.2±3.4 and 82.7±2.5%). However, blastocyst developmental rate of cauda epididymis group was significantly higher than that of control group(cauda epididymis and control vs. 24.4±1.6 and 12.2±2.8%, p<0.05). In conclusion, cauda epididymal spermatozoa in Hanwoo bull has high embryo developmental competence and can be used as an alternative to ejaculated frozen sperm in vitro.

ABSTRACT
 Ⅰ. 서 론
 Ⅱ. 재료 및 방법
  1. 사양관리 및 정소상체 정자 회수 및 동결
  2. 미성숙 난자의 체외성숙
  3. 체외수정과 핵형 분석
  4. 수정란 체외배양
  5. 통계처리
 Ⅲ. 결과 및 고찰
  1. 정소상체 정자를 사용한 체외수정 12시간 후의 난자침투율 분석
  2. 정소상체 정자와 대조구 정자를 이용한 체외 발달률 비교
 Ⅳ. 요약
 Ⅵ. REFERENCES

• 강성식(농촌진흥청 국립축산과학원 한우연구소) | Sung-Sik Kang (Hanwoo Research Institute, NIAS, RDA)
• 김의형(농촌진흥청 국립축산과학원 한우연구소) | Ui-Hyung Kim (Hanwoo Research Institute, NIAS, RDA)
• 이석동(농촌진흥청 국립축산과학원 한우연구소) | Seok-Dong Lee (Hanwoo Research Institute, NIAS, RDA)
• 이명숙(농촌진흥청 국립축산과학원 한우연구소) | Myeong-Suk Lee (Hanwoo Research Institute, NIAS, RDA)
• 조상래(농촌진흥청 국립축산과학원 한우연구소) | Sang-Rae Cho (Hanwoo Research Institute, NIAS, RDA) Correspondingauthor