외래단백질의 생산을 위하여 백합화분을 이용한 일시발현체계를 개발하였다. 충분히 성숙단계에 도달한 백합의 수술로부터 백합화분을 수집한 후 이들은 40-100 μm 크기의 aluminum oxide 입자와 함께 강하게 교반시켰다. 결과적으로 표면에 상해를 지닌 화분립에 대하여 erythropoietin(EPO) 유전자 DNA를 포함한 식물발현벡터(pBI-EPO)를 지니는 Agrobacterium tumefaciens LBA4404 세포들을 섞어 진공침윤을 수행하였다. Southern blot 및 cDNA blot hybridization의 분석 결과 EPO DNA의 화분 genomic DNA 삽입과 EPO mRNA의 생성이 각각 성공적으로 확인되었으며 이러한 결과는 Agrobacterium을 이용한 형질전환화분이 신속하고 편리한 단백질공장으로서 이용될 수 있음을 시사하고 있다.

Transient expression system using lily pollen has been developed for the production of foreign protein. From fully dehisced lily anthers, pollen grains were manually collected, which were vigorously vortexed in the presence of 40-100 μm aluminum oxide particles. The pollen grains with surface wounds were subjected to infiltration with Agrobacterium tumefaciens LBA4404 cells harboring an expression vector containing the erythropoietin(EPO) gene construct, pBI-EPO. The analysis of Southern and cDNA blot hybridization demonstrated that EPO DNA gene was successfully integrated and mRNA synthesis were clearly detected from the transformed pollens. The results suggested that Agrobacterium-mediated pollen transformation system could be used as a convenient biofactory with rapidity.

• Hee-Sung Park(Department of Biotechnology Catholic University of Daegu) | 박희성 교신저자