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pp.102-113
본 연구에서는 방사선 육종 차조기와 백출의 복합추출물의 항관절염 효능을 평가하였다. 방사선 육종 차조기와 백출 복합추출물이 세포에 미치는 독성을 확인하기 위해 RAW 264.7 세포에서 MTT 기법으로 세포 생존율을 평가하였다. 방사선 육종 차조기와 백출 복합추출물의 항염증 효능을 확인하기 위해 LPS로 염증을 유도한 RAW 264.7 세포에 방사선 육종 차조기와 백출 복합추출물을 5, 10, 25 ㎍/㎖ 농도로 처리한 후 ROS와 NO level, 염증성 사이토카인의 분비, 염증성 인자인 NF-κB, COX-2, iNOS 등의 발현을 측정하였다. 또한 type II collagen으로 유도한 관절염 모델 동물실험에서 방사선 육종 차조기와 백출 복합추출물을 33.5, 66, 133 mg/kg/day로 처리한 후 항관절염 효능을 확인 하였다. 그 결과, 방사선 육종 차조기와 백출 복합추출물은 25 ㎍/㎖ 농도까지 세포독성이 없었으며, LPS로 유도된 RAW 264.7 세포에서 ROS 생성 및 NO의 생성을 5, 10, 25 ㎍/㎖ 농도에서 대조군 대비 유의성 있게 감소시켰으며, 사이토카인(IL-1β, IL-6, TNF-α)의 생성을 유의성 있게 억제시키고, NF-κB, COX-2, iNOS의 발현을 유의성 있게 감소시켜 세포 내에서 뛰어난 항염증 효과를 보였다. 관절염 모델 동물실험에서는 방사선 육종 차조기와 백출 복합추출물이 66.5, 133mg/kg 농도에서 관절 염을 유의성 있게 억제시키는 효능을 나타내었다. 본 연구는 방사선 육종 차조기와 백출 복합추출물이 뛰어난 항염증 효능을 나타내는 것을 제시하며, 관절염 질환을 개선하기 위한 건강기능식품 및 치료제의 원료로 개발될 수 있다는 것을 제시한다.
In this study, anti-arthritic effect of the mixed extract of radiation mutant Perilla frutescens var. crispa and Atractylodes macrophala koidz was investigated. Cell viability was determined by MTT assay in RAW 264.7 cells. The anti-inflammatory effect of mixed extracts was determined through measurement of the levels of reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO), release of inflammatory cytokines and expression of NF-κB, COX-2 and iNOS in LPS-induced RAW 264.7 cells after treatment of mixed extracts (5, 10, 25 ㎍/㎖). We showed that the mixed extracts was not toxic in the dose of 5, 10, 25 ug/ml, and significantly inhibited production of nitric oxide and ROS, cytokines including IL-1β, IL-6, TNF-α, and inflammatory proteins including NF-κB, COX-2 and iNOS in LPS-induced RAW 264.7 cells. Moreover, the mixed extract inhibited the type II collagen induced arthritis in DBA mice in the dose of 66.5 and 133mg/kg/day. Therefore, we suggest that mixed extract of radiation mutant Perilla frutescens var. crispa and Atractylodes macrophala koidz can be developed as a raw material for health functional food and therapeutics to treat the inflammatory arthritis.
Abstract
1. 서 론
2. 실 험
2.1. 시료의 추출 및 조제
2.2. 시약 및 실험기기
2.3. 세포 배양
2.4. 세포독성 측정
2.5. 활성산소 측정
2.6. Nitric oxide(NO) 생성량 측정
2.7 염증성 사이토카인(cytokine) 측정
2.8. 유전자 발현 측정
2.9. 관절염 효능 동물실험
3. 결과 및 고찰
3.1. 차조기 복합추출물이 세포생존율에 미치는영향
3.2. 차조기 복합추출물의 활성산소 (ROS) 및NO 생성 저해효과
3.3. 차조기 복합추출물에 의한 염증성 사이토카인 생성량의 저해효과
3.4. 차조기 복합추출물에 의한 염증 매개 단백질 생성량의 저해효과
3.5. Type II collagen-induced arthritis(CIA) 마우스 모델에서 차조기 복합추출물에 의한 관절염 억제효과
4. 결 론
References
