식이 영양에 의한 충분한 영양분 섭취는 치매에 의한 뇌 인지 기능의 저하의 위험성을 줄일 수 있는 중요한 수단이다. 설포라판은 뇌 인지 기능 개선효과가 있는 것으로 알려져 있는 영양 성분으로, 설포라판이 다량으로 포함된 브로콜리 추출물은 인지 기능 개선 효과가 좋을 것으로 기대된다. 본 연구에서는 제주도 탈염 용암해수 재배로 제조한 브로콜리 추출물이 뇌 인지 기능 개선 효과를 가지고 있는지 시험하 였다. 제주도 용암해수는 유용 미네랄 (아연, 바나듐, 게르마늄)이 풍부해서, 용암 해수에서 재배한 작물은 유용미네랄 함량이 높은 것으로 알려져 있다. 제주도 탈염 용암 해수를 사용해서 재배한 브로콜리 추출물의 화학 조성 중 설포라판과 글루코라판 성분을 분석하기 위해 LC-Q-orbitrap 질량 분석기를 사용하였고, 설포라판의 정량 분석을 위해 HPLC 를 사용하였다. 브로콜리 추출물의 신경 세포 사멸 억제 효과와 항 염증 효과를 시험하기 위해 SH-SY5Y 세포를 사용한 실험을 수행하였고, 시냅스 가소성 촉진 효과를 시험하기 위해 SH-SY5Y 세포에서 시냅스 가소성 관련 단백질의 발현 변화와 아세틸콜린 분해 효소의 활성 변화를 측정하였다. 이러한 실험들을 수행한 결과 탈염 염지하수로 재배한 브로콜리 추출물은 신경 세포 사멸 억제 효과와 항염증 효과가 있음을 확인 하였고, 시냅스 가소성 관련 단백질 발현을 증가 시키고 아세틸콜린 분해 효소의 활성을 억제해서 시냅스 가소성을 증가 시키는 효과가 있는 것을 확인 하였다. 이 상의 결과들은 제주도 탈염 용암해수로 재배한 브로콜리 추출물이 치매에 의한 뇌 인지 기능 저하를 억제하는 좋은 식이 영양분으로 사용될 수 있는 가능성을 제시하였다.

Dietary nutrition is a critical lifestyle factor that can reduce the risk of future cognitive impairments caused by dementia. Accumulating evidence suggests that dietary supplementation with Sulforaphane may help the prevention of cognitive impairments and dementia. Thus, Sulforaphane-enriched broccoli extract would hold promise to improve cognitive impairments of dementia patients. Here, we have used broccoli extracts, prepared from broccoli cultivated in Magma Seawater, to test if the broccoli extracts can be dietary supplement to improve cognitive impairments. Magma Seawater originated from Jeju Island, Korea is unique in terms of containing high concentrations of usable minerals (Zinc, Vanadium and Germanium etc.). Broccoli, grown in Magma Seawater, would contain Sulforaphane and the extra amount of usable minerals. The chemical compositions of the broccoli extracts were analyzed using LC-Q-orbitrap to detect Sulforaphane and Glucoraphanin. Analysis method based on HPLC was developed for measurement of sulforaphane levels in the broccoli extracts. We have tested if the broccoli extracts have anti-apoptotic and anti-inflammatory effects on neuron-like SH-SY5Y cells. In addition, we examined if the broccoli extracts are able to upregulate expression of synaptic plasticity-associated proteins (BDNF and phospho-CREB) and to inhibit acetylcholine esterase (AchE) activity. We have shown that the broccoli extracts inhibited the apoptotic pathway and inflammatory responses. Finally, we present evidence showing that AchE activity was inhibited by the broccoli extracts, but expression of BDNF and phospho-CREB was upregulated. Taken together, these findings suggest that the broccoli extracts from Magma Seawater-grown broccoli would be a good source of dietary nutrition to improve cognitive impairments in the future.

요 약
Abstract
1. 서 론
2. 실 험
    2.1. 시료 및 추출
    2.2. 용암 해수 재배 브로콜리 추출물의 성분규명
    2.3. 용암 해수 재배 브로콜리 추출물 내설포라판 의 기준 및 시험방법
    2.4. 세포배양
    2.5. 레티노익산 (Retinoic acid, RA)를이용한 SH-SY5Y 세포의 신경 세포 분화
    2.6. 아밀로이드 올리고머 단백질 형성 및 처리
    2.7. 세포 생존률 측정
    2.8. 과산화수소 (H2O2) 처리
    2.9. 아세틸콜린 에스터라제 효소 시험
    2.10. 뇌유래 신경 영양인자 (BDNF) 효소면역 측정법 (ELISA)
    2.11. 웨스턴 블랏
    2.12. 통계분석
3. 결과 및 고찰
    3.1. 용암 해수 재배 브로콜리 추출물의 성분규명
    3.2. 용암 해수 재배 브로콜리 추출물의성분규명
    3.3. 용암 해수 재배 브로콜리 추출물에 의한세포 독성 시험
    3.4. 용암 해수 재배 브로콜리 추출물에 의한 신경세포 사멸 억제
    3.5. 용암 해수 재배 브로콜리 추출물에 의한신경 염증 반응 억제
    3.6. 용암 해수 재배 브로콜리 추출물에 의한신경전달물질 발현 증가와 시냅스 가소성회복 효과
4. 결 론
References

• 이진설((주)아리바이오) | Jin Seol Rhee (Central Research Institute, ARIBIO Co., Ltd.)
• 장윤비((주)아리바이오) | Youn Bi Jang (Central Research Institute, ARIBIO Co., Ltd.)
• 최지선((주)아리바이오) | Ge Sun Choi (Central Research Institute, ARIBIO Co., Ltd.)
• 정재준((주)아리바이오) | Jai Jun Choung (Central Research Institute, ARIBIO Co., Ltd.)
• 강승우((주)아리바이오) | Seung Woo Kang (Central Research Institute, ARIBIO Co., Ltd.) Corresponding author