논토양 중에 벼의 근권에 서식하여 벼에 협력적인 관계로 질소를 공급해 주는 질소고정 미생물인 Klebsiella oxytoca를 미생물 비료로 활용하기 위한 새로운 질소고정 균주의 육종을 시도하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Klebsiella oxytoca NG13, Klebsiella oxytoca SH31, Klebsiella oxytoca SH161에 pMC71A를 형질전환 한 경우, 무질소 배지에서 원래의 균주의 질소고정력에 비해 질소고정력이 각각 6.4배, 17.2배, 13.5배 증진되었다. 2. 15mM의 NH_4^+ 존재하에서, Klebsiella oxytoca NG13, Klebsiella oxytoca SH31, Klebsiella oxytoca SH161의 경우는 모두 질소고정능의 완전한 저해를 받은 반면 pMC71A가 도입된 Klebsiella oxytoca NG13 /pMC71A, Klebsiella oxytoca SH31 /pMC71A, Klebsiella oxytoca SH161/pMC71A, 의 경우는 무질소 배지에서의 질소고정력에 비해 각각 13.7%, 7.7%, 6.2%의 질소고정 활성을 보였다.
As a research for developing biofertilizers, Klebsiella oxytoca, an associative nitrogen fixer in the rhizosphere of rice plant in the soil of paddy field, was subjected to molecular breeding. The results obtained were as followings ; 1). By transforming pMC71A, Nif A overproducing plasmid, into Klebsiella oxytoca NG13, Klebsiella oxytoca SH31, and Klebsiella oxytoca SH161, nitrogenase activities in the absence of nitrogen source in the medium were increased 6.4, 17.2, and 13.5 times, respectively, in comparison with the parent strains. 2). Nitrogenase activity of Klebsiella oxytoca NG13, Klebsiella oxytoca SH31, and Klebsiella oxytoca SH161 was completely repressed in the presence of 15mM NH_4^+. But, nitrogenase activities of Klebsiella oxytoca NG13 /pMC71A, Klebsiella oxytoca SH31 /pMC71A, and Klebsiella oxytoca SH161/pMC71A, harboring pMC71A, were 13.7%, 7.7%, and 6.2% of the nitrogenase activities in the absence of nitrogen source in the medium, respectively.