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pp.403-413
건조필름배지(PetricoreTM)는 호기성 및 통성 혐기성 미 생물의 배양을 위해 개발된 배지이다. 제작된 건조필름배지 의 품질 평가는 ISO 11133 가이드라인에 따라 Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Bacillus subtilis ATCC 6633 등 5종의 표준 균주를 선정 하여 표준 평판배지와의 비교 시험을 통해 정량 실험을 실시하였다. 5가지 표준 균주를 대상으로 한 생산성 비율 (productivity ratio, Pr)이 0.70보다 높았으며 상대 표준 편 차 값은 3.0%보다 낮았다. 또한 13가지 식품(간 돼지고기, 베이컨, 생연어, 참치, 생새우, 시금치, 양상추, 버섯, 샌드 위치, 아이스크림, 냉동피자, 멸균우유, 어육소세지)을 대 상으로 제작된 PetricoreTM의 배지 성능을 미국식품의약품 안전처의 ‘Bacteriological Analytical Manual (BAM) 제3장: 표준한천배지법’에 사용된 plate count agar (PCA)배양법 과 비교 검증하였다. 또한 시험된 식품시료에 대해서는 세 가지 다른 오염 수준(높음, 중간, 낮음)에서 비교 연구가 수행되었다. 평균차, 반복표준편차(Sr), 선형회귀분석(R2), 상대표준편차(RSD)과 생산성 비율(Pr)을 측정하였다. 통계 처리는 쌍체 t-검정을 통해 얻어진 P값(P<0.05)을 기준으 로 평가하였다. 표준균주를 사용한 성능시험 결과, 5종 균 주 모두에서 Pr0.7의 결과값을 나타내어 제작된 PetricoreTM 의 정량 성능이 확인되었다. 또한 쌍체 t-검정시 두 방법 간의 유의적 차이가 없어(P>0.05) PetricoreTM 배양법과 PCA 배양법 간의 동등성을 확인하였다. 실제 식품을 대 상으로 하는 비교 검증 실험에서는 모든 식품실험군에서 두 방법 간의 직선성이 R2<0.9이었으며, 냉동피자를 제외 한 모든 식품군의 평균차는 |0.50| 내에 있었다. PetricoreTM 배양법의 재현성은 0.01-0.14로 PCA 배양법(0.02-0.12)과 유사하였다. 상대표준편차는 RSD≤15%로 정밀도가 높음 을 나타내었다. 본 실험 결과를 통해 제작된 PetricoreTM는 여러 식품군에서 호기성 및 통성 혐기성 미생물 검사 시 표준배지 시험법을 대체하는 신뢰할 수 있는 대안 방법으 로 사용할 수 있음을 확인하였다.
PetricoreTM is a pre-sterilized dry, rehydratable film medium used for the enumeration of aerobic and facultatively anaerobic bacteria. According to the ISO 11133 guidelines, five reference strains (i.e., E. coli ATCC 25922, E. coli ATCC 8739, S. aureus ATCC 25922, S. aureus ATCC 6538, and B. subtilis ATCC 6633) were selected, and the media performance test for these strains was conducted and compared with the standard plate agar method. A paired validation study was conducted to compare PetricoreTM culturing method with plate count agar (PCA) culturing method used in the U.S. reference method (FDA BAM Chapter 3: Aerobic count plate), across 13 different food matrices (2 meats, 3 fishes, 3 vegetables, 5 processed foods). Five replicates at three contamination levels were used for each matrix. The mean difference, standard deviation of the repeatability (Sr), linear correlation coefficient (R2), relative standard deviation (RSD), and productivity ratio (Pr) were calculated. Statistical analysis was performed using a paired t-test (P>0.05). In the media performance test using reference strains, PetricoreTM obtained a productivity ratio of 0.70 for all reference bacterial strains. No significant differences (P>0.05) were observed in the aerobic bacterial numbers. For the comparative study using food matrices, two methods exhibited high correlations of >0.90 and yielded a mean difference within the acceptable range of ±0.50 in all 13 food samples. The standard deviation of Petricore TM repeatability was 0.01-0.14, being comparable to the PCA values of 0.02-0.12. For all food matrices, Petricore TM demonstrated precision with a RSD of 3%. In the nested one-way ANOVA test, significant differences (P<0.05) were observed for certain samples. This study demonstrated that PetricoreTM could serve as a reliable alternative to the conventional plate method for the microbiological analysis of various food matrices.
Materials and Methods
배지 및 시약
사용 균주
식품 시료의 전처리
건조필름배지(PetricoreTM) 배양법
Plate count agar (PCA) 배양법
통계분석
Results
표준 균주 5종에 대한 정량적 성능 평가
식품 시료에 대한 건조필름배지(PetricoreTM) 배양법의 정량적 성능 평가
Discussion
국문요약
Conflict of interests
ORCID
References
