조간대 갯벌 퇴적환경에 축적되는 미세플라스틱이 저서성 무척추동물에 미치는 독성 영향을 체계적으로 평가하기 위한 표준작업절차(Standard Operating Procedure; SOP)를 개발하였다. 시험 생물로는 국내 갯벌에 널리 분포하며 조간대 환경 변화를 민감하게 반영하는 저서성 갑각류인 칠게(Macrophthalmus japonicus)를 사용한다. 본 SOP는 시험용액 조제부터 96시간 반수치사농도(LC50), 무영향농도(NOEC) 및 최소영향 농도(LOEC), 10일 만성 노출에 따른 생존율 뿐 아니라 iDye Poly Pink를 이용한 미세플라스틱의 형광 염색 과정까지 시험 전반을 다루고 있다. 특히 형광 염색된 입자의 체내 거동을 형광현미경으로 관찰하고, 아가미, 간췌장 및 위를 적출하여 조직학적, 분자생물학적 분석에 활용할 수 있는 과정을 포함하여, 다층적 평가 체계를 구축하였다. 본 연구에 제시된 SOP는 조간대 미세플라스틱 위해성 평가의 과학적 근거 자료로 활용될 수 있으며, 연안 갯벌 환경 관리 및 미세플라스틱 규제 정책 수립 과정에서 표준화된 가이드라인 정보로 활용할 수 있다.

This study developed a Standard Operating Procedure (SOP) to systematically evaluate the toxic effects of microplastics (MPs) accumulating in the intertidal mudflat sedimentary environment on benthic invertebrates. The intertidal mud crab Macrophthalmus japonicus, a benthic crustacean widely distributed in domestic mudflats that sensitively reflects changes in the intertidal environment, was selected as the test organism. The SOP describes the entire test process, from the preparation of the test solution to the 96-hour median lethal concentration (LC50), no-effect concentration (NOEC) & minimum effect concentration (LOEC), survival rate after 10-day chronic exposure, as well as the fluorescent staining process of microplastics using iDye Poly Pink. In particular, the SOP includes procedures for observing the in vivo behavior of fluorescently stained particles using a fluorescence microscope and for extracting gills, hepatopancreas, and stomach for tissue and molecular-level analysis, thereby establishing a multi-layered evaluation system alongside survival rates. The SOP presented in this study can be used as scientific evidence for the risk assessment of intertidal MPs and can be used as standardized guideline information in the process of managing coastal mudflat environments and establishing microplastic regulation policies.

서 론
재료 및 방법
    1. 시험생물
    2. 시험기구 및 장비
    3. MPs 전처리
    4. 시험수 및 모래 준비
    5. 급성 독성 시험
    6. 만성 독성 시험
    7. 체내 축적 및 조직병리학적 변화 분석
    8. 시험의 유효성 및 대조구 적합성 기준
    9. 자료 분석 및 통계 처리
    10. 결과 기록 및 데이터 관리
결 론
사 사
참고문헌

• 김지훈(전남대학교 해양융합과학과) | Ji-Hoon Kim (Department of Ocean Integrated Science, Chonnam National University, Yeosu 59626, Republic of Korea)
• 강주연(전남대학교 해양융합과학과) | Joo-Yeon Kang (Department of Ocean Integrated Science, Chonnam National University, Yeosu 59626, Republic of Korea)
• 곽인실(전남대학교 해양융합과학과, 전남대학교 수산과학연구소) | Ihn-Sil Kwak (Department of Ocean Integrated Science, Chonnam National University, Yeosu 59626, Republic of Korea, Fisheries Science Institute, Chonnam National University, Yeosu 59626, Republic of Korea) Corresponding author
• 박기연(전남대학교 수산과학연구소) | Kiyun Park (Fisheries Science Institute, Chonnam National University, Yeosu 59626, Republic of Korea)