Development of a Standard Operating Procedure (SOP) for Assessing Microplastic Toxicity Using the Mediterranean Mussel (Mytilus galloprovincialis )
해양환경 퇴적물에 축적되는 미세플라스틱이 고착성 이매패류에 미치는 독성 영향을 일관된 과정으로 평가하기 위한 표준작업절차(Standard Operating Procedure; SOP)를 개발하였다. 시험 생물로는 국내 연안에 널리 분포하며 여과섭식을 통해 오염물질을 체내에 축적하는 특징을 가진 고착성 이매패류 지중해담치(Mytilus galloprovincialis)를 사용한다. 본 SOP는 시험용액 조제부터 96시간 반수치사농도(LC50), 무영향농도(NOEC) 및 최소영향농도(LOEC), 21일 만성 노출에 따른 생존율뿐 아니라 iDye Poly Pink를 이용한 미세플라스틱의 형광 염색 과정까지 시험 전반을 다루고 있다. 특히 형광 염색된 입자의 체내 거동을 형광현미경으로 관찰하고, 아가미, 소화샘을 적출하여 조직학적, 분자생물학적 수준 분석에 활용할 수 있는 과정이 포함되어, 급·만성 독성을 평가하는 체계를 구축하였다. 본 연구에서 제시된 SOP는 해양 미세플라스틱 위해성 평가를 위한 기반자료로 활용되어, 조간대 및 연안 해양환경 내 미세플라스틱 노출규제를 위한 정책 및 관리에 활용될 것이다.
This study developed a Standard Operating Procedure (SOP) to systematically evaluate the toxic effects of microplastics (MPs) accumulated in marine environmental sediments on sessile bivalves. The Mediterranean mussel Mytilus galloprovincialis, a sessile filter-feeding bivalve widely distributed in coastal environments and known to accumulate environmental contaminants, was selected as the test organism. This SOP covers the overall testing process, including fluorescent staining of MPs using iDye Poly Pink, preparation of test solutions, calculation of the 96-hour median lethal concentration (LC50) for acute exposure, assessment of survival, no-observed-effect concentration (NOEC) and lowest-observed-effect concentration (LOEC) on 21-day chronic exposure. In particular, the SOP includes procedures for observing the in vivo behavior of fluorescently stained particles using fluorescence microscopy and for extracting gills and digestive glands for tissue and molecular-level analysis, thereby establishing a multi-layered evaluation system alongside survival rates. The SOP presented in this study will serve as foundational data for the risk assessment of marine microplastics and will be utilized in policies and management for regulating microplastic exposure in intertidal and coastal marine environments.