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체외 성숙시킨 M II기 난자의 여러 화학물질간의 중복 및 병용처리를 실시하여 수핵란으로서 적합한 활성화 조건과 활성화 후 자체 탈핵을 유도함으로써 보다 효율적인 탈핵 여건을 확립하고자 본 연구를 실시하였다. 1. Ethanol을 사용하여 6-DMAP 또는 cycloheximide 간의 단독, 중복, 그리고 병용처리를 실시한 결과, 활성화율, 난할율 및 체외 발달율에서 단독처리와 병용처리간의 차이는 없었으나 중복처리시 유의적으로 저하되었다(P<0.05). 2. Ca/sup 2+/ ionophore를 가지고 활성화 조건별로 처리하였을 경우, 6-DMAP와 병용 처리가 활성화율, 난할율 및 체외 발달율에서 각각 80.8%, 78.3%, 40.6%로 단독처리시의 58.0%, 62.9%, 27.0%보다 유의적으로 높았고(P<0.05), 또한 cycloheximide와의 병용처리도 활성화 및 난할율에서 단독처리와의 유의적 차이를 보였다(P<0.05). 그러나 중복처리시에는 효과를 나타내지 못하였다. 3. 탈핵전 수핵란에 미리 활성화 처리를 한 후 핵이식란을 재구성 한 결과 탈핵율 및 세포 융합율에서 90.7%, 71.8%로 활성화 처리하지 않은 것 77.8%, 61.1% 보다 유의적으로 높았다(P<0.05). 그러나 난할율 및 체외 발달율에서는 유의적으로 저하되었다(38.7%, 19.3% vs 68.8%, 30.6%, P<0.05). 또한 변성율도 활성화 처리하지 않은 구에 비해 유의적으로 높게 나타났다(P<0.05). 이상의 결과로 미루어 탈핵전 활성화하여 수핵란으로 이용할 경우 Ca/sup 2+/ ionophore와 6-DMAP를 병용 처리가 가장 효과적이며, 주입되는 체세포와 수핵란 간의 적정한 세포주기의 조절이 효율적인 돼지 복제수정란 생산을 위해 필요할 것이다.
This study was carried out to improve of enucleation efficiency on porcine recipient oocytes preactivated. In ethanol or Ca/sup 2+/ ionophore, effect of repeating and combinational activation with 6-DMAP or cycloheximide compared with alone activated treatment. Recipient oocytes''''s activation by Ca/sup 2+/ ionophore combined with 6-DMAP or cycloheximide were significantly higher than alone treatment(P<0.05). Between repeating and alone treatments were not significantly different. In ethanol, repeating treatment was significantly lower than alone(P<0.05), and combination treatments were not significantly different. On the basis of these results, efficiency of enucleation, electrical fusion and in vitro development compared preactivated with non-preactivated recipient oocytes. Enucleation and fusion rates of preactivated oocytes were improved significantly compared with non-preactivated oocytes(90.7%, 71.8 vs 77.8%, 61.1%; P<0.05). Behind the back, cleavage and in vitro development rates were significantly lower than non-preactivated oocytes(38.7%, 19.3% vs 68.8%, 30.6%; P<0.05).
