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대장균 베타-갈락토시데이즈를 이용한 Phenylethanol Galactoside 합성 조건의 최적화 KCI 등재

Optimal Conditions for Phenylethanol Galactoside Synthesis using Escherichia coli β-Galactosidase

  • 언어KOR
  • URLhttps://db.koreascholar.com/Article/Detail/407128
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한국응용과학기술학회지 (The Korean Society of Applied Science and Technology)
한국응용과학기술학회(구 한국유화학회) (The Korean Society of Applied Science and Technology (KSAST))
초록

Phenylethanol (PhE)에서 야기되는 피부 부작용 문제를 극복하기 위한 대안으로 phenylethanol galactoside (PhE-gal)에 대하여 연구하였다. 그 중에서도 대장균 효소 β-galalactosidase (β-gal)을 이용하여 PhE로부터 PhE-gal를 합성하는 반응의 최적 조건에 대하여 조사하였다. 그리고, 용매 분획연구를 수행하여 PhE-gal의 특성도 조사하였다. 반응조건 중에서 반응액의 β-gal 농도, PhE 농도, 반응액의 pH, 그리고 온도에 대하여 조사한 결과, 최적 β-gal의 농도는 0.45 U/ml, 최적 반응물 PhE의 농도는 1.0%, 최적 반응액의 pH는 8.0, 최적 반응온도는 40℃ 였다. 그리고, 최적 반응조건에서 48 시간까지의 반응을 관찰하였는데, 약 81.9 mM의 PhE로부터 약 47.4 mM의 PhE-gal이 합성되었고, PhE로부터 PhE-gal로의 전환수율은 약 57.9% 정도였다. 또한, PhE와 PhE-gal이 포함된 반응물을 용매 EA와 MC로 분획한 결과, 물 층으로 대부분의 PhE-gal이 분획 되었고, 용매 층으로는 PhE가 분획 되었다. 그러나, 물 층으로의 PhE-gal의 분획이 용매 MC를 사용할 때, 더 분명하고 명확하게 나타났으며, 용매 EA를 이용한 분획에서는 명확히 물 층으로 PhE-gal이 분획 되지 않았다. 앞으로, PhE-gal을 화장품에 사용할 수 있는 첨가물(방부제)로 개발하기 위한 후속연구를 계속 진행할 예정이다.

To circumvent the skin problem from phenylethanol (PhE), we have studied on the enzymatic synthesis of phenylethanol galactoside (PhE-gal) as an alternative to PhE. Base on the previous study, we optimized the reaction conditions for PhE-gal synthesis from PhE using E. coli β-galactosidase (β-gal). The optimal amount of β-gal, PhE concentration, pH, and temperature for PhE-gal synthesis were 0.45 U/ml, 1%, 8.0, 40℃, respectively. Under these conditions, about 81.9 mM PhE was converted into about 47.4 mM PhE-gal, in which the conversion yield was about 57.9%. Meanwhile, when the reaction mixture containing PhE and PhE-gal was mixed and fractionated with water-immiscible solvent (EA or MC), it was observed that PhE-gal was distributed in water phase, and PhE was distributed in solvent phase. Additionally, PhE-gal was clearly distributed into water phase when MC was used, but PE-gal was not when EA was used. In the future, we are planning to carried out the continuing study on developing an alternative cosmetic preservative using PhE-gal.

목차
요 약
Abstract
1. 서 론
2. 실험방법
    2.1. 시약
    2.2. β-Gal을 생산하는 재조합 대장균
    2.3. PhE-gal 합성 최적화 연구
    2.4. TLC 분석
    2.5. 용매를 이용한 PhE-gal의 분획
3. 결과 및 고찰
    3.1. PhE-gal의 최적 합성 조건
    3.2. 최적 반응조건에서 PhE-gal의 합성
    3.3. 반응물에서 PhE와 PhE-gal의 분획
4. 결 론
References
저자
  • 정경환(한국교통대학교 생명공학전공) | Kyung-Hwan Jung (Major in Biotechnology, Korea National University of Transportation) Corresponding author