In vitro culture of murine embryos is an important step for in vitro production systems including in vitro fertilization and generations of genetically engineered mice. M16 is widely used commercialized culture media for the murine embryos. Compared to other media such as potassium simplex optimization medium, commercial M16 (Sigma) media lacks of amino acid, glutamine and antibiotics. In the present study, we optimized M16 based embryo culture system using commercialized antibiotics-glutamine or amino acids supplements. In vivo derived murine zygote were M16 media were supplemented with commercial Penicillin-Streptomycin-Glutamine solution (PSG; Gibco) or MEM Non- Essential Amino Acids solution (NEAA; Gibco) as experimental design. Addition of PSG did not improved cleavage and blastocyst rates. On the other hand, cleavage rate is not different between control and NEAA treated group, however, blastocyst formation is significantly (P<0.05) improved in NEAA treated group. Developmental competence between PSG and NEAA treated groups were also compared. Between two groups, cleavage rate was similar. However, blastocyst formation rate is significantly improved in NEAA treated group. Taken together, beneficial effect of NEAA on murine embryos development was confirmed. Effect of antibiotics and glutamine addition to M16 media is still not clear in the study.
본 연구에서는 M16 A계통 '부지화'를 강세대목인 대목 '스윙글 시트루멜로' 또는 보통대목인 '탱자'에 접목하여 무가온 하우스에서 재배한 잎과 과실 사양의 수분상태 변화 및 과실 성숙기의 과실 가용성 고형물과 산 함량변화를 조사했다. 강세대목인 '스윙글 시트 루멜로'와 보통대목인 '탱자'에 접목한 M16 A계통 '부지화'의 대목에 따라 과실의 품질은 영향을 받는 것으로 나타났는데, '스윙글 시트루멜로' 대목은 '탱자' 대목보다 과실 가용성 고형물과 산함량이 낮았다. 동트기 직전에 측정된 과실사양의 수분포텐셜 및 팽압은 '스윙글 시트루멜로' 대목이 '탱자' 대목보다 조금 높은 경향을 보였으나, 삼투 포텐셜의 값은 '탱자' 대목이 '스윙글 시트루멜로' 대목보다 낮았다. 과실사양과 같은 시간대에 측정된 엽수분포텐셜 값의 변화도 과실 사양의 삼투포텐셜 변화와 유사한 경향을 보여주었다. 이상의 결과로 보아, M16 A계통 '부지화'에 있어 두개의 대목에 따라 잎의 수분 상태와 과실사양의 삼투포텐셜 차이가 있었으며, 이러한 차이로 인하여 과실 가용성 고형물과 산 함량에 차이가 나타나는 것으로 판단되며, 대목에 따른 수분 상태와 과실 품질의 차이는 대목의 뿌리분포가 영향을 미쳤기 때문인 것으로 사료된다.