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한국응용곤충학회 학술대회논문집

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2014 한국응용곤충학회 정기총회 및 춘계학술발표회 (2014년 4월) 269

구두 발표

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The cotton aphid, Aphis gossypii (Glover), is one of the main pests in various vegetable crops due to insecticide resistance in Korea. Some insect pests noticed neonicotinoid insecticide resistance such as Nilaparvata lugens, Bemisia tabaci and Myzus persicae etc. and the major player which contributed for developing the resistance was over-expression of P450, particularly CPY6 family. However, A. gossypii was a unique case that they developed non-P450 dependent resistant mechanism. Previously we reported that two point mutations (RtoT in nicotinic acetylcholine receptor, nAChR, beta 1 subunit and RtoT with LtoS in a transcript variant) contribute to develop the imidacolprid resistance in A. gossypii. Moreover we surveyed the mutation(s) in various local field populations. Based on the 3D modeling, we hypothesize that RtoT mutation can reduce the imidacloprid sensitivity. A stretch of 33 amino acid was deleted in the N-terminal region of original transcript of nAChR beta 1 subunit that contained RtoT with LtoS mutations in resistant strain. Among the two transcripts, only original transcript differently expressed between imidacloprid susceptible and resistant strain (resistant ratio = 3,800). Six alpha subunit (1∼5, 7) transcript levels were not significantly different between two strains. Therefore mutation and down-regulation of nAChR beta 1 subunit is also associated with imidacloprid resistance in the A. gossypii.
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Tetranychus piercei McGregor, T. truncatus Ehara, and T. bambusae Wang and Ma are considered as major pests of many agricultural crops in Bangladesh. T. piercei and T. truncatus has a diverse host plants although T. bambusae infest only bamboo leaves. We compared the development, survivorship, and life table parameters of T. piercei and T. truncatus on bean leaves and T. bambusae on bamboo leaves at 25ºC, 60-70% RH, and a photoperiod of 16: 8 h (light: dark). The development time from egg to adult female of T. piercei and T. truncatus was 10.2 and 8.8 days when feeding on bean leaves, respectively, whereas it takes 9.5 days for female T. bambusae when feeding on Bambusa sp. leaves. Mated females of T. piercei, T. truncatus, and T. bambusae laid on average 186.9, 132.5, and 46.3 eggs for the oviposition period of 22.3, 13.5, and 20.2 days, respectively. The intrinsic rate of increase (rm) was 0.268 for T. piercei, 0.295 for T. truncatus, and 0.178 for T. bambusae. The finite rate of increase (λ) was 1.31, 1.34, and 1.20 individuals/female/day for T. piercei, T. truncatus, and T. bambusae, respectively. The doubling time (Dt) was lowest in T. truncatus (2.4 days) compare to T. piercei (2.6 days) and T. bambusae (3.9 days). The two polyphagous Tetranychus mites collected in Bangladesh are found to have similar life table parameters fall within the parametric range of other Tetranychus mites found in various regions irrespective of food sources. This is the first report of life table parameters of monophagous T. bambusae.
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화랑곡나방(Plodia interpunctella)은 전 세계적으로 분포하고 있는 저장, 가공 농산물의 해충으로서 심각한 피해를 끼치고 있으며, 기존의 열처리 방법은 50-60℃의 조건에서 48시간 이상 고온처리가 요구된다. 그러나 이 조건은 비용 및 시간이 많이 들므로 개선할 필요가 있다. 본 연구에서는 열처리의 효율을 높이기 위하여 규조토를 복합처리 함으로 기존의 열처리 조건보다 훨씬 더 효과적이고 경제적인 방법을 개발하고자 하였다. 화랑곡나방의 발육단계 중 열 저항성이 가장 큰 방황기 유충을 대상으로 상온(25℃)과 40℃의 조건으로 규조토를 혼용처리 하였다. 실험 결과 방황기 유충은 25℃에서 24시간 후 살충률이 0%, 40℃에서는 28.3%였다. 방황기 유충에 4 ㎎/L의 규조토를 처리하였을 경우, 25℃에서 0%와 40℃에서 100%의 살충률을 관찰하였다. 즉, 규조토와 함께 열처리를 할 경우 살충 효능이 증가했다. 이 효과는 스트레스 유전자 shsp, hsp70, hsp90 발현 패턴에서도 살충률 실험결과와 같은 패턴으로 관찰 된다. 본 연구를 통하여 열처리 시 규조토를 혼용함으로써 기존의 열처리 조건보다 낮은 온도에서 저장 곡물 해충의 방제효과를 증가시킬 수 있을 것으로 판단된다.
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Three insect pest, Myzus persicae, Tetranychus urticae, and Liriomyza trifolii were irradiated with electron beam (50-250 Gy) or X-ray (10-150 Gy). Longevity, egg hatching, emergence and fecundity of the test insects were measured. When irradiated to the M. persicae, emergence of nymphs did not show any differences, but fecundity was inhibited at 100 Gy (electron beam) or 30 Gy (X-ray). When irradiated to the T. urticae, egg hatching was completely inhibited at 150 Gy (electron beam) or 50 Gy (X-ray) and egg hatching of F1 generation was decreased at 150 Gy of electron beam or 50 Gy of X-ray. When irradiated to the L. trifolii, egg hatching was completely inhibited at 30 Gy of X-ray, however, electron beam irradiation was not inhibited even at 200 Gy. Egg hatching from irradiated adults was completely inhibited at 150 Gy of electron beam and X-ray. These results indicate that electron beam and X-ray irradiation induced abnormal development and reproduction, however, the dose of irradiation required to inhibit may vary according to the types of insect pests.
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RNA interference (RNAi)는 double stranded RNA (dsRNA)를 이용하여 유전자 발현을 억제함으로써 특정 유전자를 침묵시키는 유전자 조절 기법이다. RNAi에 의한 유전자 발현억제는 생명체 내에 침입한 바이러스와 점핑유전자들이 가지는 위험으로부터 유전자 발현을 조절하여 게놈을 보호한다. 이러한 RNAi에 의한 유전자 발현억제는 크게 세 단계로 구성되어 있으며, (1) dsRNA가 Dicer라는 단백질에 의해 인식되어 siRNA (small interfering RNA)로 만들어지는 단계, (2) 이 siRNA들이 단백질 복합체인 RISC (RNA induced silencing complex)와 결합하는 단계, (3)이렇게 만들어진 복합체가 자연적으로 생성되는 mRNA에 결합하여 그 가닥들을 잘라내고 분해하는 단계를 거침으로써 모 유전자의 발현을 억제시킨다. 따라서 RNAi를 이용한 해충방제 기술은 근본적으로 적용가능한 치사유전자의 선발과 곤충체내로 효과적인 dsRNA 전달체계의 개발이 필요하다. 본 연구에서는 세계적으로 널리 분포하며 방제가 어려운 해충인 파밤나방 (Spodoptera exigua)을 대상으로 곤충의 세포성면역반응과 세포와 세포간 대화에 중요한 단백질인 integrin의 발현에 관여하는 integrin subunit β1 (Seintβ1) 유전자를 침묵시킴으로써 살충 효과를 확인할 수 있었다. 이를 토대로 효과적인 dsRNA 전달을 위한 유전자도입 작물의 개발을 목표로 대장균 (Escherichia coli HT115)을 이용한 Seintβ1에 특이적인 dsRNA의 in vivo 생산과 파밤나방 3령 유충을 대상으로 한 dsRNA의 섭식실험에서 integrin 유전자의 발현억제가 확인되었다.
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곤충학 분야에서는 곤충 발생일 예측 등과 같은 phenology 연구에 기상자료를 필수적으로 사용하고 있다. 하지만 부정확한 발육영점온도와 같은 계산상의 문제와 기상관측자료지점과 곤충발생지점과의 차이, 기상관측센서의 설치, 관리, 측정값 오류 등과 같은 관측상의 문제가 예측결과의 정확도에 영향을 미친다. 본 자료에서는 기상관측센서와 관련된 문제점을 보완할 수 있는 방안을 소개하고자 한다. 국립농업과학원에서는 2009년 농업기상정보서비스(AMIS)를 구축하였으며, 현재까지 농업기상관측지점의 과거 및 현재 농업기상자료를 수요자에게 제공하고 있지만 대국민의 인식 부족으로 활용사례는 제한적이다. 국립농업과학원 농업기상정보서비스에 연결된 AWS는 논, 밭, 과수원과 같은 농경지에 2014년 3월 기준으로 147개 지점에 설치되어 있으며, 2014년 160개소, 2017년 200개소로 확대할 계획이다. 관측요소는 온도, 습도, 토양온도, 토양수분, 강수량, 풍향․풍속, 일사량, 이슬지속시간 등 9개의 필수농업기상요소가 측정되고 있으며, 각 기상요소는 매1분 단위로 측정되며, 매10분 단위로 자료 수집기에 저장되어 국립농업과학원 DB 서버에 CDMA방식을 통해서 전달되고 있다. 수집된 농업기상관측자료는 품질관리를 통해서 실시간으로 인터넷망(http://weather.rda.go.kr)을 통해 수요자에게 전달되고 있다. 농업기상정보서비스에서는 농업기상관측정보 뿐만 아니라 농업기후 지대별 기상․기후 비교자료, 응용기상정보(유효적산온도 등) 등을 생산하여 제공하고 있으며, 국지기후상세화, 작황예측 등의 기본 자료로도 활용되고 있다. 또한 고품질의 농업기상정보를 생산하기 위하여 농업기상관측센서를 정기적으로 점검하고 있다. 따라서 국립농업과학원 농업기상정보서비스에서 생산된 기상자료는 기상관측센서와 관련된 관측상의 문제점을 보완할 수 있는 방법으로 판단되며, 향후 곤충 phenology 연구 및 기후변화 영향평가 연구 등에 활용됨으로써 곤충학 연구의 질을 높일 수 있을 것으로 판단된다.
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Baculoviral anti-apoptotic genes, p35 and iap (inhibitor of apoptosis), play important roles in the initiation stage of viral infection. However, some iap genes are not involved in the anti-apoptotic activity. To investigate the anti-apoptotic activity of the iap genes of Lymantria xylina multiple nucleopolyhedrovirus (LyxyMNPV), two ly-iap genes (ly-iap2 and ly-iap3) were cloned from LyxyMNPV. From a 5′ RACE analysis, a late promoter motif (TAAG) was found in the upstream (-15 bp) of ly-iap2, but ly-iap3 only posited an enhancer-like element (CGTGC) in the upstream (-22 bp) of 5′ UTR. Gene expression were detected by RT-PCR; the ly-iap2 and ly-iap3 genes began to express in the host cells (IPLB-LD652Y cell line) infected with LyxyMNPV 6 hours post-infection (p.i.) and reached the peak 72 hours p.i., followed by decline 3 to 5 days p.i. Functional assay of the iap genes were performed by an over-expression method in Sf9 cells. Full-length domains of LY-IAP2, LY-IAP3 and LY-IAP2-BIR could differently inhibit the apoptosis which induced by Drosophila RPR protein (DRPR). Interestingly, LY-IAP2-RZF domain was important for LY-IAP2 to rescue apoptosis, but it might be also involved in the ubiquitin activity leading to the degradation of LY-IAP2 protein. LY-IAP3-RZF might be working as a “helper domain” to inhibit DRPR-induced apoptosis. These results can be used to figure out the roles of the ly-iap genes in the apoptosis of host cells.
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휴면을 하지 않는 배추좀나방(Pluotella xylostella)의 국내 월동가능성에 관한 의구심을 가졌다. 본 연구는 배추좀나방의 월동 환경조건을 결정하고, 국내 월동세대의 지역적 유전 차이를 분석하여 이 해충의 국내 월동 가능성에 대한 검정을 하였다. 배추좀나방의 체내 빙결점은 -24.8℃(알)∼-20.5℃(용)로 나타났다. 그러나 장기간(3주)동안 배추좀나방을 -5℃로 처리한 결과 뚜렷한 생존력 저하를 보인 것으로 보아 체내 빙결점보다 훨씬 높은 온도에서 저온피해를 받는 것으로 보인다. 실제로 겨울기간 다양한 발육태의 배추좀나방을 야외조건에서 노출시킨 결과 모든 발육태에서 생존력 저하를 나타냈다. 그러나 비가온 실내조건에서 먹이가 공급된 상태에서 배추좀나방의 생존력은 크게 향상되었다. 안동지역에서 2014년도 최초의 성충발생일은 2월 25일이었으며, 서울지역은 2월 26일로 나타났다. 지역간 월동집단의 유전적 거리는 RAPD(Random Amplification of Polymorphic DNA) 분자마커를 이용하여 분석되었다. 안동집단과 서울집단 및 제주지역의 집단은 서로 뚜렷이 구분되는 유전적 거리를 나타냈다. 본 연구는 국내 어느 지역에서든지 배추좀나방 집단은 영하의 온도를 피할 수 있는 시설재배지에서 먹이가 공급된 상태에서는 월동이 가능 하다는 것을 제시하고 있다.
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Liriomyza leafminer flies comprise a pest group that causes both considerable economic losses and serious quarantine problems. We reported for the first time of the infestation of field crops by this invasive leafminer L. huidobrensis in Korea in 2012. Distribution survey of leafminer flies and other insect pests on potato crops along with associated natural enemies was conducted from 378 farmers' field in most of the potato growing provinces during 2011, 2012 and 2013. Sweeping (10 sweeps/field) and visual inspection were employed within 5 minute-walking distance each field. For damage rate was also calculated for each field. Ten mined leaflets were investigated for parasitoid species identification. Leafminer flies were identified by morphologically and molecular. However, parasitoid species were only morphologically identified. All the leafminer flies collected were identified as L. huidobrensis. No leafminer flies infested fields were recorded in Boseong (Jeollanam-do) in 2011. L. huidobrensis infested fields with unique crop damage symptoms were found only in Miryang and Goryeong (Gyeongsangnam-do) in 2012. There was significant different in leafminer infested fields among the surveyed locations in 2012 (f=85.73, df=5, 127, P<0.0001). Higher damaged (100%) potato fields were recorded in Miryang. Similarly, the leafminer infested potato fields were significantly different among the surveyed locations in 2013 (f=36.77, df=19, 201, P<0.0001). Highest damaged rates (100%) were recorded in all the surveyed locations of Gyeongsangnam-do. Increasing distribution expansion pattern of L. huidobrensis was found. Distribution covers from southern parts to northern parts of the country. The study on rate of distribution and factors responsible in rapid distribution of L. huidobrensis in Korea are demanded.
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Polydnavirus are well known to interfere with the host endocrine system, causing immune suppression and other physiological disorders. The Cotesia rubculla polydnavirus gene products, CrV1, are known to be a potent immunosuppressive agent. CrV1 protein express within 12 h after viral infection at oviposition during deposition of parasitoid eggs and are mainly secreted in to host hemocyte, where it functions like phagocytosis and cell spreading. This study identified its homolog in CpBV and analyzed its molecular characteristics motif called “coiled-coil. A point mutation of Alanine to Proline of CpBV-CrV1 could lose the coiled-coil motif from in silico assay. The coiled type CpBV-CrV1 could inhibit host cellular immunity, however, interestingly the mutant CpBV-CrV1 lacking in coiled-coil motif completely lost the immunosuppressive activity. This study suggests that the coiled-coil motif is functional to inhibit host cellular immune responses. RNA interference against CrV1 significantly loses the inhibitory activity and thus further supporting the immunosuppressive activity of CrV1. In this study we also have analyzed the localization of CrV1 by transient transfection in HiFive Cell lines by in situ hybridization.
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의학해충 및 축산해충으로 일부 파리류는 친환경적으로 방제되어야 한다. 비티 농약은 살충 독소단백질을 생성하는 Bacillus thuringiensis (Bt)를 기반으로 제조된다. 본 연구는 Bt 균주 가운데 파리류에 대해 살충력이 높은 Bt israelensis (Bti)를 이용하여 새로운 비티플러스 농약을 개발하였다. 개발 원리는 Bti 균주에 대한 곤충의 면역 기능을 억제하는 물질을 첨가하여 살충력을 높이는 전략을 세웠다. 모델 곤충으로서 노랑초파리(Drosophila melanogaster)를 이용하였다. 사과 껍질을 이용한 침지법으로 노랑초파리 유충의 약제 반응을 분석했다. 노랑초파리 유충은 세균 감염에 따라 세포성 면역 반응인 소낭형성을 보였다. 4 x 104 대장균 주입에 대해서 8 시간 후 최대 32개의 소낭이 형성되었다. 그러나 또 다른 곤충병원세균인 Photorhabdus temperata temperata (Ptt)의 배양액 추출물을 주입한 결과 소낭형성 능력이 현저히 감소했다. Bti와 Ptt 배양액 추출물을 혼합한 결과 Bti의 살충력을 뚜렷이 증가되었다. 본 연구는 파리 방제제로서 두 곤충병원세균을 조합하여 제조한 효과적 비티플러스를 개발하였다.
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인슐린은 혈당을 낮추는 호르몬으로 영양분이 풍부할 때 신경물질이 뇌를 자극하게 된다. 신호전달물질이 활성화되어 두뇌로부터 인슐린유사펩타이드(Insulinlike peptide: ILP)가 분비되고 혈당을 낮추게 된다. 곤충의 주요한 혈당은 트레할로오스이다. 포도당이 척추동물에서 작용하는 것처럼 트레할로오스는 곤충의 에너지원으로 작용된다. 본 연구는 ILP가 파밤나방(Spodoptera exigua)의 혈당에 미치는 영향을 분석하였다. 이를 위해 파밤나방 섭식활동과 혈당의 관계를 분석하였고, 절식에 따른 혈당변화를 척추동물 인슐린으로 분석했다. Spodoptera 전사체 database에서 ILP 서열을 추적하여 유전자 발현 및 기능 연구를 실시했다. Spodoptera 전사체 database는 두 개의 ILP 유전자를 보유했다. 이를 각각 SeILP1과 SeILP2라 명명했다. SeILP1과 SeILP2는 알을 제외한 파밤나방의 모든 시기에서 발현되었다. 정상 섭식을 할 때 약 2mM의 농도를 유지하였고, 절식을 할 때 시간이 지남에 따라 혈당이 증가하는 것을 확인했다. 반면, 척추동물의 인슐린을 주입한 결과 파밤나방의 트레할로오스 농도가 낮아졌다. 본 연구는 파밤나방에서 두 개의 ILP 유전자를 동정했고, 인슐린 유전자가 파밤나방 혈당을 조절한다고 제시한다.
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Prostaglandins (PGs) mediate insect immune responses. However, their biosynthesis in insects is little understood due to lack of cyclooxygenase (COX) ortholog. This study aimed to identify PG-biosynthetic factor(s) in Spodoptera exigua, which has been a well-known insect in possessing immune responses mediated via PGs. Peroxidases (POXs) are a sister group of COX genes. Ten putative POXs (POX-A ∼POX-J) were expressed in S. exigua. Especially, expressions of POX-F and POX-H were inducible to bacterial challenge and expressed in hemocytes and fat body. Individual RNA interference (RNAi) of each of ten POXs was performed by hemocoelic injection of their specific double-strnaded RNAs (dsRNAs). Only RNAi of POX-F or POX-H specifically suppressed hemocyte-spreading behavior and nodule formation. Addition of PGE2 significantly nescued the immunosuppression in either dsRNA treatment of POX-F or POX-H. Structural analysis indicated that both POX-F and POX-H have conserved domain and residues corresponding to peroxinectin of Drosophila melanogaster, which mimics COX-like activity. These results suggest that POX-E and POX-H are involved in PG biosynthesis in S. exigua.
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In this study, we investigated the effects of X-ray irradiation to control six important insect pests of floriculture crops: Liriomyza trifolii, Spodoptera litura, Myzus persicae, Tetranychus urticae, Bemisia tabaci, and Frankliniella intonsa. We irradiated on six insect pests that were placed in different positions (top, middle, and bottom) of export flower boxes after filling the boxes with roses and chrysanthemums, respectively. When irradiated with X-ray of 150 Gy, the eggs of T. urticae, B. tabaci, F. intonsa, L. trifolii, and S. litura were prevented from hatching at every position in the boxes. The pupation and emergence of L. trifolii larvae and S. litura larvae and B. tabaci nymphs and F. intonsa nymphs were inhibited at every position in the boxes. However, the emergence of T. urticae and M. persicae nymphs was not inhibited, even at the top position in the boxes. When pupae were irradiated, the emergence of L. trifolii was inhibited at every position in the boxes, while S. litura was not inhibited completely, even at the top position in the boxes. When adult T. urticae, S. litura, and L. trifolii were irradiated, the hatching rate of the F1 generation was not completely inhibited at every position. The insect pests that were not inhibited completely at the dose of 150 Gy showed much higher inhibitory effects at the dose of 250 Gy. Therefore, the dose of X-ray irradiation required to inhibit may vary according to the types of flowers and insect pests and according to their positions within the boxes.
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왕담배나방은 파프리카 및 고추에 문제시 되는 해충이다. 농산물 수출입 검역 시 주로 메틸브로마이드(MB)를 훈증제로 사용하고 있으나, MB의 사용이 규제됨에 따라 대체요법이 시급한 실정이다. 국외에서는 방사선조사를 포함한 감마선 조사가 의료, 반도체 산업, 식품 제조업 뿐 만 아니라 농산물 검역에 널리 사용되고 있다. 따라서 본 연구는 감마선 선량(0, 50, 100, 200, 300, 400Gy)에 따른 왕담배나방의 발육과 산란에 미치는 영향을 조사하여, 추후 감마선 사용에 대한 가이드 라인을 제시하고자 하였다. 왕담배나방의 알에 감마선 조사를 했을 경우, 산란 후 시간 경과에 따라 방사선 감수성이 달라지며, 감마선 선량이 높아질수록 부화 및 성장이 억제되었다. 산란 후 24시간 이하의 알의 경우, 200Gy이상에서 부화가 완전히 억제되었다. 산란 후 28-48시간인 알의 경우, 400Gy에서 부화가 완전히 억제되었다. 100Gy에서는 부화한 유충의 일부가 번데기로 발육하였지만 전부 기형우화 했다. 유충에 감마선 조사를 했을 경우, 모든 선량에서 번데기로 발육은 진행되지만, 200Gy이상에서 우화가 억제되고 100Gy에서 성충은 전부 기형으로 우화 했다. 번데기에 감마선 조사를 했을 경우, 모든 선량에서 성충으로 우화가 진행되지만, 조사 선량이 증가함에 따라 기형율이 증가하여, 400Gy에서 전부 기형우화를 했으며, 100Gy 이상에서 산란된 알의 부화가 완전히 억제되었다. 성충에 감마선 조사를 했을 경우, 성충 수명과 산란수에는 통계상의 차이는 없었지만 산란된 알의 부화은 300Gy 이상에서 완전 억제되었다.
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The fumigant activity of phosphine (PH3) and ethyl formate (EF) was determined to all stage of Phthorimaea operculella (Zeller) under high oxygen concentration (50% and 80%). Oxygenated PH3 and EF were tested at two different temperatures (20°C and 4°C) during 7 days. Two oxygenated fumigants were treated with LC10, 30 and 50 values of single fumigant against each stage of P. operculella. At 10% inhibition of hatchability concentration value, inhibition of hatchability of P. operculella eggs was shown 20.3% and 9.2% with 50% and 80% oxygenated PH3 at 20°C at 1 day after treatment, respectively. The fumigant activity of oxygenated PH3 was increased at all stage of P. operculella except eggs both 20°C and 4°C. However, oxygenated EF was determined low fumigant efficacy to hatchability of eggs and emergence rate of pupae. The insecticidal activities of P. operculella larvae and adults were slightly increased mortality rather than single EF. In this result suggests that oxygenated phosphine is effective method for managing P. operculella. But, oxygenated EF is not effective.
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Riptortus pedestris is an important soybean pest in Korea and Japan. Aggregation pheromone traps were evaluated in 12 soybean fields in Andong using three treatments of trap installation, i.e., installation for whole cultivation period, installation up to September, and no installation. The number of R. pedestris (in all life stages) were not significantly different among the treatments until October, but its abundance significantly increased at mid October in the fields where traps were installed. Trap catch of R. pedestris was relatively higher in August while bug population was low in the fields. However, in fall, R. pedestris populations become abundant in the fields while trap catch was low. There was no significant difference in parasitism as well as seed and pod damage among the treatments. In conclusion, aggregation pheromone trap should’nt be used as control measure, but can be used as a monitoring tool of R. pedestris population up to August in soybean field.
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Rice stem borer, Chilo suppressalis Walker is a significant rice insect pest. A newly hatched larva bores a hole into the rice stem and feeding inside. The damage results in drying and white heads of rice. Climate change will affect pest and its host population dynamics variously. In this study, the degree of asynchrony between emergence of rice stem borer and rice transplanting was examined by their phenology models. Also, correlation was examined between winter mortalities of the rice stem borer and relative humidity categorized by daily minimum temperature in 12 sites throughout the country from 1992 to 2013. The degree of asynchrony appears to be increased in future climate condition. And we found a negative correlation between winter mortality and the relative humidity. Winter mortality will be decreased in the future because of increasing winter minimum temperature and snowfall. We hypothesize that the stem borer may increasingly harbor in alternative hosts such as reed in its first generation and move to rice in the second generation. Currently the simulation study is being conducted to verify this hypothesis.
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Antimicrobial peptides (AMPs) can be produced in mealworms. In this work, we integrated Bombyx mori (Bm) AMP, cecropin A to Beauveria bassiana ERL1170 by restriction enzyme-mediated integration method, which was confirmed by RT-PCR and an antibacterial activity assay. For the extracellular secretion of Bm cecropin A protein, the active domain of the cecropin A gene was tailed to the signal sequence of B. bassiana chitinase (Bbs). To exchange Bbs-cecropin A gene with egfp gene in pBARKS1-egfp, Bbs-cecropin A fragment was cut from pGEMBbs-cecropin A using XbaI/blunted and BamHI and ligated with cut pBARKS1-egfp using NcoI/blunted and BamHI, designated as pBARKS1-Bbs-cecropin A. After the transformation, transformants were grown on Czapek’s solution agar containing 600 μg ml-1PPT. Expression of Bm cecropin A was confirmed by RT-PCR. Strong clear zone was observed in the co-culture of the transformant D-6 and Bacillus subtilis on fourth strength Sabouraud dextrose agar 1 day after the culture at 25°C, whereas the wild type had no clear zone. This work suggests that Bm cecropin A can be efficiently produced in this mealworm-based fungal expression platform, thereby increasing the value of mealworms in the animal feed additive industry.
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국화 재배지에서 파밤나방의 발생과 피해를 조사한 결과 파밤나방은 5월 하순부터 발생하기 시작하여 9월 중순에 주 당 유충수가 5.9마리로 가장 높았다. 파밤나방 유충에 의한 국화의 잎과 꽃의 피해율은 각각 9월 중순에 14.6%, 11.3%로 가장 높았다. 포트 실험에서 파밤나방의 유충 령기별에 따른 S. carpocapsae GSN1 strain과 대조약제인 스피네토람 입상수화제의 처리 효과를 조사한 결과 파밤나방의 령기가 어릴수록 살충력은 높았으며, 령기가 노숙화 될수록 살충력은 낮아지는 경향을 나타내었다. 국화가 재배되고 있던 시설 하우스에서 S. carpocapsae GSN1 strain을 660m2당 20,000,000마리를 7일 간격으로 3회 살포하거나, 40,000,000마리 농도로 2회와 3회 살포할 경우 처리 후 7일째부터 85.4% 이상의 높은 방제효과를 나타내었다. 또한 S. carpocapsae GSN1 strain은 처리 후 28일째까지 방제효과가 지속되었으며 660m2 당 20,000,000마리 농도로 2회와 3회 살포할 경우 90.9% 이상의 높은 방제효과를 나타내었다. S. carpocapsae GSN1 strain은 우수한 방제효과와 함께 파밤나방에 의한 국화의 피해도 줄였는데 무처리(9.0∼16.0%)와 비교하여 S. carpocapsae GSN1 strain을 처리한 국화의 잎과 꽃 피해율은 5.0∼15%가 감소하였다.
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