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pp.375-382
진세노사이드(인삼 사포닌)는 인삼의 대표적 약리성분 중의 하나로 생물학적 활성을 가진 배당체 화합물 이다. 이들 사포닌은 가수분해 되어 저분자화 되었을 때, 항주름 및 항산화, 항암 등에 높은 약리효능효과를 나타 낸다. 본 연구에서는 인삼 esculin 배지를 활용하여 β-glucosidase 활성을 가진 균주를 분리하였고 인삼 사포 닌 전환을 미생물을 이용하여 수행하였다. 본 균주들을 16S rRNA sequencing을 통하여 동정하여 본 결과 Stenotrophomonas rhizopilae strain GFC09로 확인되였다. 균주의 최적 활성 조건을 결정하기 위해 조효소 1 mM와 인삼사포닌 Rb1과 함께 배양한 후 생물학적 전환을 TLC, HPLC를 사용하여 확인하였다. 조효소에 의 한 인삼 사포닌 Rb1의 전환 경로는 다음과 같다. LB: RbNeobio R&D center, Gyeonggi-do 16954, Korea →Rd→FNeobio R&D center, Gyeonggi-do 16954, Korea→compound K, TSB: Rb1→Rd→ F2. 가수 분해된 생성된 물질은 NMR로 구조 동정하였다. 전환 산물의 효능 분석결과, 콜라겐 생성을 농도 의존적으로 증가시키는 것이 관찰되었다. 이에 본 연구에서는 ginsenoside F2와 compound K 함유 인삼 전환 산물의 주름 개선 소재로서 활용가능성을 확인하였다.
Ginsenosides (ginseng saponin) as the one of important pharmaceutical compounds of ginseng and is responsible for the pharmacological and biological activities. These ginsenoside produces diverse small molecules ginsenoside which have more pharmacological activities including anti-wrinkle, anti-cancer and anti-oxidant effects. In the present study, we isolated bacteria using esculin agar, to produce β-glucosidase, and we focused on the bio-transformation of ginsenoside. Phylogenetic tree analysis was performed by comparing the 16S rRNA sequences; we identified the strain as Stenotrophomonas rhizopilae strain GFC09. In order to determine the optimal conditions for enzyme activity, the crude enzyme was incubated with 1 mM ginsenoside Rb1. Bioconversion of ginsenoside Rb1 were analyzed using TLC and HPLC. The crude enzyme hydrolyzed the ginsenoside Rb1 along the following pathway: LB: Rb1→Rd→F2 into compound K, TSB: Rb1→Rd→F2. The structure of the hydrolyzed metabolites were identified by NMR. The activity screening tests showed that the conversion product induced the production of type I procollagen in a dose-dependent manner. These results suggested that hydrolyzed ginseng product containing the ginsenoside F2 and compound K could be useful as an active ingredient for wrinkle-care cosmetics.
2. 재료 및 방법
2.1. 재료
2.2. 사포닌 전환 활성 균주의 분리
2.3. 균주의 동정
2.4. 균주 조효소액의 생산
2.5. Ginsenoside의 전환
2.6. HPLC 분석
2.7. 변환 사포닌의 분리 및 NMR을 통한 구조 동정
2.8. 세포배양
2.9. 세포 생존율 측정
2.10. MMP-1 저해 및 콜라겐 생합성능 시험
2.11. 통계처리
3. 결과 및 고찰
3.1. Phylogenetic Analysis
3.2. TLC 분석에 의한 Ginsenoside 전환 조사
3.3. HPLC에 의한 Ginsenoside 전환 수율 확인
3.4.분리된 화합물의 NMR 분석 결과
3.5. MMP-1 저해 활성
3.6. 콜라겐 생합성 측정
4. 결 론
Reference
