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Sirtuin-1(Sirt1)은 NAD+ dependent deacetylase로써 유전자 침묵, 포도당과 지질대사, 세포자살 등 다양한 cellular process에 연관되어 있다. 최근 이뤄진 여러 연구에서 Sirt1 Knockout mouse가 정자형성 장애와 불임증상을 가진다는 것이 보고되었다. Egr1(Early Growth Response 1)은 Egr family에 속하는 전사인자로서 mitogenesis와 differentiation에 필요한 유전자들의 전사를 활성화시킨다. 또한 이는 Sirt1의 전사를 조절하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 생쥐 정소 내에서 Egr1의 유무에 의한 Sirt1의 발현 수준 차이를 밝히고자 Egr1 knockout mouse와 wild type mouse를 이용하여 Sirt1의 발현패턴을 분석하였다.
Sirt1의 발현을 분석하기 위하여 Quantitative RT-PCR과 conventional RT-PCR을 이용하여 각각 ICR strain adult male mice와 Egr1 Knockout adult male mice의 testicular cDNA에서 mRNA 수준에서 Sirt1의 발현수준을 분석하였다. 또한 Immunohistochemistry를 이용하여 Sirt1단백질의 localization을 분석하였다.
분석한 결과, Wild type과 Egr1 Knockout mouse의 정소 내에서 Sirt1 mRNA의 발현 수준은 큰 차이를 보이지 않았으나, Egr1 Knockout mouse의 정소 내에서 Sirt1 단백질의 발현수준은 wild type과 비교하여 현저히 떨어졌으며, 이 변화는 특히 pachytene spermatocyte에서 큰 차이를 보였다. 반면, Sertoli cell에서는 Pachytene spermatocyte에서만큼 뚜렷한 차이를 관찰할 수 없었다.
본 연구에서 얻은 결과를 바탕으로 Egr1이 pachytene spermatocyte에서 Sirt1 단백질의 발현에 중요한 역할을 할 것이라는 결론을 얻을 수 있었다. Sirt1 Knockout mouse가 불임 증상을 보이며, 정자형성에 장애가 있는 반면, Egr1 KO mouse는 정상적인 생식능력을 가짐으로 보아 premeiotic 또는 meiotic stage에서의 Sirt1 결핍이 이러한 infertility의 원인이 될 것으로 추측된다.
