양서류는 육상과 수상생태계를 연결하는 먹이사슬의 연결자로 진화적 생태적 지이를 갖는다. 양서류의 배아와 유생은 모체와 독립되어 수환경 내에서 초기발생 및 성장하기 때문에 수환경에 존재하는 다양한 화학물질에 직접적으로 노출될 수 있다. Azole계열 항곰팡이제는 농업 및 의료용으로 널리 사용되는 화학물질로서 농지, 하수처리장 등으로 부터 수계로 유입된다. 최근, 양서류에서 이러한 azole계 물질에 의한 기형유발, 내분비계장애 효과가 증가하고 있다. 본 소고에서는 azole계 물질의 양서류 독성을 파악하고 azole계 물질의 안전한 이용을 위한 가이드라인을 제공하고자 azole계열에 속하는 imidazole, triazole, thiazole, oxazole, pyrazole 항곰팡이 물질이 양서류의 발생, 분화, 생식 등에 미치는 영향에 대해 최근까지의 연구결과를 정리하였다.

내분비계 교란물질은 환경으로 방출되어 다양한 경로를 통해 조직에 축적되며, 각종 형태의 교란을 일으킴으로써 생식 이상과 성장억제 등을 초래한다. 본 연구에서는 내분비계 교란물질로 분류되는 Phthalate 및 대체물질 안전성 평가를 위해 TG407 실험을 수행하였다. TG407에 따라 (8주령) 수컷 Mouse에 Sonde를 이용하여 Phthalate (DEHP, 양성대조군; 4, 400 mg/kg/day) 및 대체후보물질 2종 (ATEC; 4, 40, 400 mg/kg/day), (ATHC; 400 mg/kg/day)를 28일 동안 경구투여 하였으며, 경구투여 종료 후 Sampling, 혈당 측정, CBC 측정, 호르몬 측정을 수행하였다. CBC와 혈당, Insulin 측정 및 뇌, 뇌하수체, 심장, 부정소, 정낭의 무게 측정 결과, 대조군과의 차이를 보이지 않았으며, T4와 T3의 농도는 ATHC를 제외하고는 대조군과의 차이를 보이지 않았다. ATHC(400 mg/kg)를 처리한 경우, 대조군에 비해 T4가 높았으며, T3는 낮았다. 간의 경우 DEHP(400 mg/kg)을 처리했을 때 대조군에 비해 무게가 증가하였다. 신장의 경우, DEHP(400 mg/kg), ATHC(400 mg/kg)을 처리했을 때 대조군에 비해 무게가 증가하였으며, 부신의 경우, DEHP(400 mg/kg), ATEC(40, 400 mg/kg), ATHC(400 mg/kg)을 처리했을 때 대조군에 비해 무게가 증가하였다. 흉선의 경우 DEHP(400 mg/kg), ATHC(400 mg/kg)을 처리했을 때 대조군에 비해 무게가 증가하였으며, 비장의 경우, DEHP(400 mg/kg)을 처리했을 때 대조군에 비해 무게가 증가하였다. 정소의 경우, DEHP(400 mg/kg), ATEC(40, 400 mg/kg), ATHC(400 mg/kg)을 처리했을 때 대조군에 비해 무게가 증가하였으며, 전립선의 경우, DEHP(400 mg/kg), ATHC(400 mg/kg)을 처리했을 때 대조군에 비해 무게가 증가하였다. 간, 신장, 부신, 비장, 정소, 부정소, 전립선을 대상으로 조직학적 분석을 진행하였으며, 특이적인 소견을 보이지 않았다. 본 연구를 통해 ATEC가 가장 독성이 낮은 것으로 사료되며, 따라서 ATEC와 같은 대체소재가 향후 플라스틱 시장에서 Phthalate를 대체할 수 있을 것으로 생각된다.

Sirtuin-1(Sirt1)은 NAD+ dependent deacetylase로써 유전자 침묵, 포도당과 지질대사, 세포자살 등 다양한 cellular process에 연관되어 있다. 최근 이뤄진 여러 연구에서 Sirt1 Knockout mouse가 정자형성 장애와 불임증상을 가진다는 것이 보고되었다. Egr1(Early Growth Response 1)은 Egr family에 속하는 전사인자로서 mitogenesis와 differentiation에 필요한 유전자들의 전사를 활성화시킨다. 또한 이는 Sirt1의 전사를 조절하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 생쥐 정소 내에서 Egr1의 유무에 의한 Sirt1의 발현 수준 차이를 밝히고자 Egr1 knockout mouse와 wild type mouse를 이용하여 Sirt1의 발현패턴을 분석하였다. Sirt1의 발현을 분석하기 위하여 Quantitative RT-PCR과 conventional RT-PCR을 이용하여 각각 ICR strain adult male mice와 Egr1 Knockout adult male mice의 testicular cDNA에서 mRNA 수준에서 Sirt1의 발현수준을 분석하였다. 또한 Immunohistochemistry를 이용하여 Sirt1단백질의 localization을 분석하였다. 분석한 결과, Wild type과 Egr1 Knockout mouse의 정소 내에서 Sirt1 mRNA의 발현 수준은 큰 차이를 보이지 않았으나, Egr1 Knockout mouse의 정소 내에서 Sirt1 단백질의 발현수준은 wild type과 비교하여 현저히 떨어졌으며, 이 변화는 특히 pachytene spermatocyte에서 큰 차이를 보였다. 반면, Sertoli cell에서는 Pachytene spermatocyte에서만큼 뚜렷한 차이를 관찰할 수 없었다. 본 연구에서 얻은 결과를 바탕으로 Egr1이 pachytene spermatocyte에서 Sirt1 단백질의 발현에 중요한 역할을 할 것이라는 결론을 얻을 수 있었다. Sirt1 Knockout mouse가 불임 증상을 보이며, 정자형성에 장애가 있는 반면, Egr1 KO mouse는 정상적인 생식능력을 가짐으로 보아 premeiotic 또는 meiotic stage에서의 Sirt1 결핍이 이러한 infertility의 원인이 될 것으로 추측된다.