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pp.381-387
Streptomyces albus KSM-35의 amylase의 유전자를 Bacillus subtilis LKS88에서 발현시킨 균주를 사용하여 amylase의 생산에 미치는 몇가지 요인들을 조사하였다. 본 실험에 사용한 탄소원들중에서 sodium citrate와 왕겨의 효소 생산량이 가장 높았고, 이들을 1:1의 비율로 혼합하여 첨가하였을 때 효소의 생산량은 대조군으로 사용한 가용성 전분에 비하여 20배 이상 증가하였다. 질소원으로 대두박을 사용하였을 경우 yeast extract의 첨가량을 줄이면서 효소의 생산량을 증가시켰다. 배양을 위한 초기 pH를 60으로 조절하고 SDS를 0.01%첨가하였을 때 대조구조보다 높은 효소 생산량을 나타내었다. Bacillus subtilis LKS88 (pASA240)을 sodium citrate와 왕겨 각각 1.5%, K_2HPO_4 0.66%, yeast extract 0.3%, 대두박 0.7%, SDS 0.01% 및 초기 pH를 6.0으로 조절한 배지에서 37℃에서 배양시 최대 효소 활성은 배양 후 36시간에서 나타났으며 이때 효소 활성은 56.6 U/ml이었다.
The effects of culture conditions on the production of amylase expressed by Bacillus subtilis LKS88 with a cloned gene from Streptomyces albus KSM-35 were investigated The production of amylase was increased significantly by using sodium citrate and rice hull as a carbon source. In addition, the use of a mixture of sodium citrate and rice hull(1:1) resulted in increase of enzyme production by 20-fold when compared to that of soluble starch. The soybean meal as the nitrogen source could be partially replaced with yeast extract without changing the enzyme production yield. The amylase production was also increased by adjusting initial pH to 6.0 or by adding 0.01% SDS. Maximum amylase production was observed in the medium containing 1.5% sodium citrate, 1.5% rice hull, 0.7% soybean meal, 0.3% yeast extract, 0.66% K_2HPO_4, 0.05% MgSO_4·7H_2O, 0.08% CaCl_2·2H_2O, 0.01% SDS with initial pH of 6.0. The maximum yield of amylase reached 56.6 U/ml when B. subtilis LKS88(pASA 240) was cultured at 37℃ for 36 hr.
