Determination of Melatonin Contents in Nuts by Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry with QuEChERS Method
멜라토닌은 뇌의 송과선에서 분비되는 내분비 호르몬으로 수면 조절 및 생체 리듬 조절 등 중요한 역할을 한다. 견과류는 건강과 균형 잡힌 식단의 중요한 구성요소로, 멜라토닌 부족을 보완할 수 있는 천연 공급원이다. 일반적으로, 견과류에서 멜라토닌 추출은 액체-액체 추출법(LLE) 또는 고체상 추출법(SPE)을 이용하였다. 하지만 LLE와 SPE는 전처리 시 시료 건조 및 진공 농축 또는 복잡한 전처리 과정으로 인해 비효율적이다. 본 연구는 간단하고 신속한 전처리가 가능한 QuEChERS(quick, easy, cheap, effective, rugged, and safe)법을 이용하여 견과류에서 멜라토닌을 추출하고 액체크로마토그래피 질량분석기를 이용하여 정량분석하였다. 유효성 검증은 특이성, 직선성, 회수율, 일내 및 일간 정확도와 정밀도 항목에 대해 수행하였다. 각 분석 농도에서 회수율 범위는 74.3~76.2% 그리고 일내 및 일간 정확도와 정밀도는 88.01~109.43%와 0.89~9.09%로 멜라토닌 분석에 적합한 일관성과 재현성을 확인하였다.
Nuts are recognized not only as a nutritious component of a balanced diet but also as a natural dietary source of melatonin. Melatonin, a neurohormone secreted by the pineal gland, plays a crucial role in regulating sleep–wake cycles and circadian rhythms. Conventional extraction methods for melatonin, such as liquid–liquid extraction (LLE) and solid-phase extraction (SPE), are often time-consuming and require complex sample preparation. In this study, a QuEChERS (quick, easy, cheap, effective, rugged, and safe) method was employed for the rapid and efficient extraction of melatonin from various nuts. Quantitative analysis was conducted using ultra-performance liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry (UPLC–MS/MS) in multiple reaction monitoring (MRM) mode. The method was validated in terms of specificity, linearity, recovery, and intra- and inter-day accuracy and precision. The recovery rates ranged from 74.3% to 76.2%, and the accuracy and precision values were between 88.01% and 109.43%, and from 0.89% to 9.09%, respectively. These results indicate that the QuEChERS-based extraction combined with UPLC–MS/MS is a reliable and reproducible method for the determination of melatonin in nut matrices.