국내 시설 농업의 99.2%를 차지하는 플라스틱온실의 내부 환경인자는 외부 환경의 변화에 민감하게 반응하고 온실 공간 내부에서 편차가 발생한다. 온도, 습도, CO2, 광도의 환경인자를 계측하기 위한 지점을 3 × 3 × 5로 구성하여 데이터를 취득하고 내부 공간을 수직, 수평적인 측면으로 분할하여 환경 인자의 분포를 확인하였다. 계측지점의 최적점을 선정하고자 계측 공간을 수직, 수평적인 방향으로 분할하고, 측정 데이터와 이를 활용한 예측지점의 선형회귀분석 결과로 성능평가를 실시하였다. 일반적인 상황에서는 온도와 습도 인자의 경우 1개의 센서로 플라스틱온실 내부 환경의 계측이 가능할 수 있으나, 특정 구간의 경우 다수의 센서를 활용하여 내부공간의 정밀성을 확보하는 것이 필요하다. CO2의 경우 실험기간 내의 계측 매트릭스의 증가에도 불구하고 변이를 정의하는데 한계가 있음을 발견하였다. 조도 분포의 경우 일출 이후 지속적으로 회귀분석 결과가 작아짐을 발견하였다. 구조물의 간섭 등을 고려해 동일한 수평적인 방향에서 미계측 지점의 결정계수가 감소하였고, 센서 매트릭스 배치를 작물 높이 위로 위치하여 다수의 센서 노드 설치로 개선 가능하다고 예상된다. 외부 환경의 변화에 따라 온실 내부 환경이 불규칙하게 변화되며, 이 구간은 시설의 규격을 고려하여 계측 매트릭스를 구성해야 한다. 반대로 안정적인 구간에서는 최소한의 센서 노드로 내부 환경의 예측이 가능한 것을 확인할 수 있었다. 결과적으로 측정하고자 하는 환경인자와 시설의 구조 등 연구 및 재배자의 목적에 맞는 계측 매트릭스 위치 선정의 유동성이 요구되며, 덕트의 개폐위치를 조절하여 필요한 곳에 에너지를 투입하는 국소냉난방 및 생육제어 모델링 설계에 적용 가능하다고 판단된다.

Even though klotho deficiency in mice exhibits multiple aging-like phenotypes, studies using large animal models such as pigs, which have many similarities to humans, have been limited due to the absence of cell lines or animal models. The objective of this study was to generate homozygous klotho knockout porcine cell lines and cloned embryos. A CRISPR sgRNA specific for the klotho gene was designed and sgRNA (targeting exon 3 of klotho) and Cas9 RNPs were transfected into porcine fibroblasts. The transfected fibroblasts were then used for single cell colony formation and 9 single cell–derived colonies were established. In a T7 endonuclease I mutation assay, 5 colonies (#3, #4, #5, #7 and #9) were confirmed as mutated. These 5 colonies were subsequently analyzed by deep sequencing for determination of homozygous mutated colonies and 4 (#3, #4, #5 and #9) from 5 colonies contained homozygous modifications. Somatic cell nuclear transfer was performed to generate homozygous klotho knockout cloned embryos by using one homozygous mutation colony (#9); the cleavage and blastocyst formation rates were 72.0% and 8.3%, respectively. Two cloned embryos derived from a homozygous klotho knockout cell line (#9) were subjected to deep sequencing and they showed the same mutation pattern as the donor cell line. In conclusion, we produced homozygous klotho knockout porcine embryos cloned from genome-edited porcine fibroblasts.