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        1.
        2023.10 구독 인증기관·개인회원 무료
        표면발현(surface-display system)은 세포 또는 바이러스 표면에 목적 단백질을 고정하여 발현시킴으로써 목적 단백질에 대하여 독립적인 공간 구조 및 생물학적 활성을 부여하는 단백질 공학 기술이다. 또한 이를 이용하여 높은 중화항체 유도 및 대량생산이 가능한 삼량체의 형태로 항원 단백질의 발현 또한 가능하다. BES(baculovirus expression system)에서의 표면발현 기술은 번역 후 수정과정 및 복잡한 구조의 다양한 단백질의 발현이 가능하기 에 다른 숙주 기반 시스템보다 효율적이라고 보고되고 있다. 그러나 목적 단백질 외의 다른 표면 단백질과 발현 공간에서의 경쟁으로 목적 단백질의 낮은 생산량이 큰 문제점으로 지적되고 있다. 따라서, 이러한 BES에서 표면 발현의 생산 효율을 증대시키기 위하여, 동일한 표면 공간에 대한 단백질 간의 발현 경쟁에 대해 실험적으로 확인 후, 그를 해결하기 위하여 표면발현에 최적인 목적 단백질 발현을 위한 프로모터 선발 실험을 수행하였다. 이를 통해 BES에서 표면발현에 의한 목적 단백질의 생산 효율을 증대시킬 수 있음을 확인하였다.
        6.
        2014.10 구독 인증기관·개인회원 무료
        배큘로바이러스를 이용한 유용단백질 생산량 증대를 위하여 여러 가지 방법이 개발되어지고 있다. 그 중 기존 AcNPV의 다각체 단백질 부분을 이용하여 목적단 백질의 N-말단 부위에 융합 발현함에 따라 목적 단백질의 발현량을 증대시킬수 있 는 다각체 단백질 부분 융합 시스템이 개발되었다. 본 연구에서는 이 시스템의 누에 를 이용한 목적 단백질의 생산 적용성을 확인하기 위하여 기존 보고와 동일한 다각 체 단백질 서열 7가지를 이용하고자 하였다. BmNPV 전이벡터를 이용하여 7가지 다각체 단백질 각 서열과 형광단백질을 가진 각각의 재조합 바이러스를 제작하였 다. 각 융합단백질은 누에를 이용하여 발현을 유도하였으며, 누에의 혈림프와 지방 체를 수거하여 각각 SDS-PAGE 및 Anti-EGFP monoclonal 항체를 이용한 Western blot 분석으로 그 발현을 확인하였다. 그 결과, 각 융합단백질은 형광단백 질 크기인 27 kDa과 다각체 단백질 각 부분을 융합한 크기에서 확인되었다. 융합단 백질은 비융합단백질과의 발현량을 비교하였을 때 발현량이 증대되는 양상을 나 타내었다. 이와 같이, 다각체 단백질 부분 융합을 통한 유용단백질을 생산하는데 누에를 이용함으로써 효율적인 단백질 대량생산에 이용 가능성 및 생산비용 절감 의 이점이 있을 것이라 생각된다.