Baculoviral anti-apoptotic genes, p35 and iap (inhibitor of apoptosis), play important roles in the initiation stage of viral infection. However, some iap genes are not involved in the anti-apoptotic activity. To investigate the anti-apoptotic activity of the iap genes of Lymantria xylina multiple nucleopolyhedrovirus (LyxyMNPV), two ly-iap genes (ly-iap2 and ly-iap3) were cloned from LyxyMNPV. From a 5′ RACE analysis, a late promoter motif (TAAG) was found in the upstream (-15 bp) of ly-iap2, but ly-iap3 only posited an enhancer-like element (CGTGC) in the upstream (-22 bp) of 5′ UTR. Gene expression were detected by RT-PCR; the ly-iap2 and ly-iap3 genes began to express in the host cells (IPLB-LD652Y cell line) infected with LyxyMNPV 6 hours post-infection (p.i.) and reached the peak 72 hours p.i., followed by decline 3 to 5 days p.i. Functional assay of the iap genes were performed by an over-expression method in Sf9 cells. Full-length domains of LY-IAP2, LY-IAP3 and LY-IAP2-BIR could differently inhibit the apoptosis which induced by Drosophila RPR protein (DRPR). Interestingly, LY-IAP2-RZF domain was important for LY-IAP2 to rescue apoptosis, but it might be also involved in the ubiquitin activity leading to the degradation of LY-IAP2 protein. LY-IAP3-RZF might be working as a “helper domain” to inhibit DRPR-induced apoptosis. These results can be used to figure out the roles of the ly-iap genes in the apoptosis of host cells.
리스테리아의 p60 단백질은 Listeria속 고유의 단백질로써, 주요 세포의 단백질이기에, 식품에서 이 세균의 존재를 밝혀주는 중요한 지시단백질로 사용된다. 본 연구는 재조합 DNA 방법으로 재조합-p60 단백질을 대장균에서 생산하였으며, 아밀로오스 컬럼 크로마토그라피의 방법으로 정제하여, Listeria spp의 p60에 특이적 항체를 생산하는 단일클론을 선별하였다. 생산된 항p60항체 1H4는 병원성 Listeria 균주인 L. monocytogenes, L. ivanovii, L. welshi meri Ⅱ에 특이적으로 강한 항체반응을 보였으며, Listeria속의 비병원성균인 L.innocua 등과는 상대적으로 매우 약한 항체반응을 보였으며, 타 세균의 단백질과는 거의 반응하지 않았다. 1H4항체는 복수생산법에 의해 대량생산되었으며, 이 항체의 특이성은 면역학적 방법에 의한 리스테리아 검출키트의 개발에 유용하게 사용될 수 있을 것이다.