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pp.146-151
t-BHP는 대표적인 산화스트레스에 의한 간 손상 모델이며, 본 연구자는 랫드에 기능성이 강화된 기능성 들깻잎 추출물(P. frutescens leaf extract, PLE)을 250, 500 또는 1000 mg/kg body weight (b.w.)으로 6일간 경구 투여하고 t-BHP의 복강 주사로 간 손상을 일으킨 후 기능성 들깻잎 추출물이 간에서 산화스트레스를 얼마나 억제하여 주는지를 혈액의 간 손상 지표인 lactate dehydrogenase (LDH), aspartate aminotransferase (AST) 그리고 alanine aminotransferase (ALT)를 측정하였으며, 간 조직에서 항산화 바이오 마커인 reduced glutathione (GSH), 지질과산화물의 척도인 malondialdehyde (MDA)를 통해서 측정하였다.
산화스트레스에 의한 간 손상시 GSH는 아무것도 처리하지 않은 정상 대조군(146.0 ± 5.4 mM GSH/g protein)에 비해 t-BHP로 산화스트레스를 유발한 그룹에서 128.6 ± 6.8 mM GSH/g protein로 감소하였다. 반면 기능성 들깻잎 추출물을 250, 500 그리고 1000 mg/kg b.w. 을 투여한 그룹에서는 129.3 ± 2.6 mM GSH/g protein, 151.9 ± 6.8 mM GSH/ g protein, 171.9 ± 5.2 mM GSH/g protein로 농도 의존적으 로 GSH 함량이 회복되는 경향을 나타내며, 500 mg/kg b.w. 투여군부터 정상 대조군의 GSH 함량과 비슷한 수준을 나타내었다.
또한, 간 조직에서 산화스트레스에 의하여 발생된 지질 과산화물을 측정하였을 때 t-BHP에 의하여 산화스트레스만 유발한 그룹은 834.0 ± 154.7 μM/g protein 로 정상 대 조군의 385.6 ± 39.7 μM/g protein 보다 2.17배 높은 MDA 를 생성한 것으로 지질과산화가 많이 일어난 것을 확인하였으나, 기능성 들깻잎 추출물을 투여한 그룹의 MDA의 생성량은 669.2 ± 145.0, 595.1 ± 142.6, 415.9 ± 133.8 μM/g protein 로 농도에 따라 감소하는 경향을 확인하였다. 랫드의 간 조직에서, 독성을 유발하는 t-BHP를 복강 투여 후 기능성 들깻잎 추출물을 경구 투여하였을 때 지질과산화의 지표인 MDA의 감소와 항산화의 지표인 GSH 함량이 증 가하였다.
조직병리학적 확인을 위하여 간 조직을 H&E 염색 후 광학현미경으로 관찰하였을 때, t-BHP만 처리한 음성 대조군의 경우 간 세포의 괴사와 조직의 변형을 확인할 수 있었지만 기능성 들깻잎 추출물을 처리하였을 경우 모두 정상 상태의 조직을 관찰할 수 있었다.
위의 결과들을 종합하였을 때, t-BHP가 간에서 산화스 트레스를 유발하여 간 손상을 야기시키고, 간 조직의 인지질 막 손상을 줄 수 있으며, 기능성 들깻잎 추출물은 간 손상에 대한 보호 효과가 있음을 확인하였다.
Perilla frutescens usually dieted in East Asian country such as Korea and Japan. Antioxidant, antiinflammatory and anticancer activities of perilla leaves have been founded. In previous study, we confirmed that caffeic acid, major compound of perilla, was accumulation by sucrose aqueous solution and thus antioxidant effect of perilla was enhanced. In this study, we investigated the protective effect of functional perilla leaves extract (PLE) against tert-butyl hydroperoxide(t-BHP) induced-oxidative hepatotoxicity. The pretreatment with PLE (250, 500 and 1000 mg/kg b.w.) for 5 days before a single dose of t-BHP (i.p.; 0.5 mmol/kg) significantly lowered the serum levels of aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase and lactate dehydrogenase dose-dependently. And we confirmed that the indicators of oxidative stress were remarkably reduced in the liver, such as the glutathione contents and malondialdehyde, marker of lipid peroxidation. Pathological histology of the rat livers tissues showed that PLE reduced the hepatocyte degeneration and neutrophilic infiltration of liver induced by t-BHP. These results suggest that functional perilla frutescens has the protective effect of liver against t-BHP-induced oxidative hepatic stress in rats.
서 론
재료 및 방법
시험물질 및 열수 추출물 조제
시험 동물 및 사육환경
실험그룹과 투여물질
혈액 및 간 조직 적출
Reduced glutathion (GSH) 측정
지질과산화물(Thiobarbituric acid reactive substance,TBARS) 측정
혈액생화학적 수치 검사
조직병리학적 검사
통계처리
결과 및 고찰
혈액생화학적 간 보호 활성
간 조직의 GSH 함량 측정
간 조직의 지질과산화 측정
조직병리학적 간 손상 측정
요 약
참고문헌
