Comparison of Conventional PCR and Multiplex Real-Time PCR Assay for Detection of Staphylococcus aureus and Bacillus cereus in Ready-to-Eat Foods
Staphylococcus aureus와 Bacillus cereus는 식중독을 일으키는 주요한 원인균 중 하나로 각종 식품에서 검출되면서 많은 주의가 요구되고 있다. 식중독 발생의 원인균을 신속하고 정확하게 검출할 수 있는 여러 가지 방법 중 DNA 분석을 기반으로 하는 PCR 검출법이 보편적으로 사용되고 있다. 본 연구에서는 샌드위치와 같은 즉석 섭취 식품에서 식중독을 유발할 수 있는 S. aureus와 B. cereus 의 신속검출을 위해 conventional PCR과 real-time PCR의 특이도 및 민감도를 비교하였다. 그 결과, 검출한계 범위가 배양액에서는 cPCR의 경우 S. aureus (104-106 CFU/mL), B. cereus (103-105 CFU/mL) 이였고, real-time PCR의 경우 S. aureus (103-106 CFU/mL), B. cereus (102-105 CFU/mL) 이였다. 식품에서는 cPCR의 경우 S. aureus (104-106 CFU/mL), B. cereus (103-105 CFU/mL) 이고, real-time PCR의 경우 S. aureus (104-106 CFU/mL), B. cereus (103-105 CFU/mL) 으로 나타났다. Real-time PCR법이 cPCR법 보다 10배 이상 더 민감한 것으로 나타났다. 따라서 real-time PCR은 우수한 민감도를 지닌 검출기법으로 식중독 세균 검출에 있어 매우 효과적인 방법으로 사료된다.
In the present study, the performance of different PCR assays was compared for the rapid detection of S. aureus and B. cereus in ready-to-eat foods such as sandwiches. The limit of detection (LOD) and specificity of two assays (conventional PCR and real-time PCR) were compared. The LOD of real-time PCR ranged from 103 to 106 CFU/mL for S. aureus and from 102 to 105 CFU/mL for B. cereus. The LOD of conventional PCR ranged from 104 to 106 CFU/mL for S. aureus and from 103 to 105 CFU/mL for B. cereus. The LOD of real-time PCR assay for S. aureus and B. cereus in sandwiches ranged from 104 to 106 CFU/mL and from 103 to 105 CFU/mL, while the LOD of conventional PCR was from 104 to 106 CFU/mL and from 103 to 105 CFU/mL, respectively. The LOD of the real-time PCR was 10-fold higher than that of the conventional PCR. In conclusion, these results show that real-time PCR could be used as an effective screening test for the rapid detection of S. aureus and B. cereus in sandwiches compared to conventional PCR.