This study aimed at investigating whether a porcine follicular fluid (pFF) supplementation positively affects the characteristics of donor cells and the developmental competence of porcine cloned embryos. Ear fibroblast cells (donor cell) from an Massachusetts General Hospital miniature pig were cultured in different culture methods: (1) Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM)+10% FBS (Control); (2) DMEM+0.5% FBS (SS); and (3) DMEM+10% FBS+10% pFF (pFF) for 72 h. In each conditioned medium, the concentrations of 4 amino acids (Thr, Glu, Pro, and Val) in the pFF group were significantly different from those in the control group (p<0.05 or p<0.01). The proliferation of the cells cultured in the SS group was significantly lower than that of the other treatment groups (p<0.01). The population of apoptotic and necrotic cells in the SS group was significantly higher than that of either the control or the pFF group (p<0.01). The number of embryos that cleaved (p<0.05) and developed into blastocysts (p<0.01) in the SS group was significantly lower than that of either the control or the pFF group. Compared to other groups, the blastocysts produced from the donor cells in the pFF group had higher total cells and lower apoptotic cells (p<0.05). It can be concluded that pFF supplementation in the donor cell culture medium positively affects cell death, cell cycle and quality of the cloned blastocyst.

본 연구에서는 기 확보한 균주에 대하여 활성이 좋은 균주를 1차 선발하였고, 활성이 우수한 균주는 변이체 유도법을 통한 육종으로 17종의 균주를 새로 확보한 뒤 반복적인 현장 재배를 통해 복토와 수피 사용이 필요 없는 재배실험을 진행하였다. 1차 재배실험에서는 복토와 수피의 사용 없이도 재배가 가능한 품종 선정에서 주배지로서 후숙 미송톱밥의 사용이 좋은 결과를 보였으며, 2차로 이어서 후숙 미송톱밥과 영양제 실험으로 미강, 밀기울, 면실피등을 배합하여 재배 실험을 반복적으로 진행함으로서 실험결과 발효 미송톱밥 71.0%와 영양제로 밀기울을 29.0%를 사용한 실험군에서 가장 균사 성장이 빠르고 복토와 수피 사용 없이 잿빛 만가닥버섯 재배할 수 있음을 확인하였다. 또한 육성된 품종에 따라 동일한 조건에서 갓의 색깔과 모양에서 차이가 있음을 확인하였으며, 이상의 실험결과 복토와 수피사용 없이 잿빛 만가닥버섯을 재배할 수 있는 있음이 가능함을 반복적인 재배실험을 통해 확인하였으며, 향후 첨가제 등 보충 실험을 통해 수확량 증가와 시장에 적합한 모양의 규격을 설정하는 등 현실적으로 경제성을 갖춘 잿빛 만가닥버섯을 재배할 수 있을 것으로 기대한다.

In this study, first, we show that the furnace process which requires maintaining high temperature is effected grievously by the temperature of surrounding air. Second, an alternative which maintains the relatively constant temperature dispersion surrounding the furnace and at the same time has economical advantages will be proposed.