호접란 조직배양시 발생하는 체세포변이의 발생을 줄 이기 위한 적절한 다신초 유기배양 조건과 계대배양 조 건에 관한 연구를 실시하였다. 다신초 유기 및 증식의 적 정 배지로서는 1/2 MS 배지가 VW 배지와 Hyponex 배 지보다 더 효율적이었다. 다신초 유기에 적절한 생장조 절제 농도는 BA 5mg · L-1와 TDZ 1mg · L-1가 적절하였 다. 계대 배양의 횟수가 증가할수록 기형 신초수의 발생 이 증가하였다. 그러나 2개월마다 3회 계대배양할 때까 지는 기형 신초가 거의 발생하지 않았다. 특히 핑크계 호 접란 품종에서 6회 이상 계대할 경우 기형 신초 발생율 이 30%에 육박하였고 배지내 페놀 물질의 집적이 더 많 이 관찰되었다. 식물체를 배지에 치상한 후 2개월이 지 나 처음으로 계대 배양하였을 때 모든 품종에서 기형 신 초 발생이 거의 없었지만, 이후 계대배양 기간이 증가함 에 따라 기형 신초 발생율과 고사율이 증가하였다. 그러 므로 적어도 2개월에 한 번씩 계대 배양하는 것이 바람 직한 것으로 판단되었다.

It is well kwon that HPV have been strongly linked to progression of or al squamous cell carcinoma‘ Effici ent im mortalization of nonnal human oral keratinocyte(NHOK) should provid further evidence for the role HPV in tumorogenes is ‘ Because IHOK(I mmortali zed human oral keratinocyte) has been considered as a moclel syst em for study ing I-!PV- linkecl oral ca rcinogenes is , it is important to pursue the differenti ati al change of IHOK cul t ure moclel during t he culture passage, The purposes of this study were to examine the cha ra r’ ct eristic clifferential changes of cul turecl immorta lizecl human ora l keratinocytes during long term passage, and to apply these results to or al carcinogenes is in the future, NI-!OK was primarily incubated at 370C and 5% C02 under KBM bullet kJt IHOK was co ntinuously cul t ured towarcl 100th passage(two times per week) , Growth curve of NI-!OK and II-!OK clepend on clùture passage was taken For examining the cha racte ri s t ic clifferential changes of II-!OK, transrnission electron microscope, 1ì'ansgluta miase activity‘ E6/E7 mRNA detect ion, a ncl tumorogenecity were done 10th II-!OK showecl sl ight polygonal flattencl cells and sometimes apoptotic cells ‘ while 100th IHOK showecl increased polygonal cell s ‘ Cultu recl 100th IHOK showed r ela tively resis tant growth to high calcium than 10th II-!OK Microvilli from 10th II-!OK was not connect ecl with each other, ancl scatte red cytokeratin fil aments of 10th II-IOK. while decreased cytokeratin filaments in cytoplasm & prominent clesmosome of 100th IHOK. During the terminal differ entiation in cultured IHOK, induction of TGase 1 activity of 10th II-!OK was higher than that of100th IHOK mRNA E6E7 expresson was cletected and unchangable in both cul tured cells There was no tumorogenecity inclucecl by both culturecl cel ls. Although late passage IHOK showecl less r esemblance to NHOK, and lower TGase 1 acti vi ty than ea rly passage IHOK, it suggested that these cells should be 110t yet fully differ entiatecl to oral squ a mous ce ll carcinoma cells

벼 완숙현미(完熟玄米)의 배(胚)로부터 유기(誘起)된 callus의 계대배양(繼代培養)에 영향(影響)을 미치는 계대배양(繼代培養) 회수(回數), 기간(期間) 및 배지내(培地內)에 첨가(添加)되는 생장조정제(生長調整劑)의 조성(組成) 등(等)과 같은 몇가지 요인(要因)에 대한 실험(實驗)을 수행(遂行)하여 얻어진 결과(結果)는 다음과 같다. 벼 callus의 계대배양(繼代培養)은 4주간격(週間隔)보다는 2주간격(週間隔)으로 배양(培養)하는 것이 효과적(效果的)이었고 식물체(植物體) 재분화율(再分化率)은 품종(品種)과 계대배양(繼代培養) 기간(期間)에 따라 크게 상이(相異)한 것으로 나타났다. "영덕(盈德)벼"의 경우는 2주간격(週間隔)으로 4회(回) 계대배양(繼代培養)된 callus에서 72.5%의 가장 높은 재분화율(再分化率)을 보였으며, 4주간격(週間隔) 2회(回) 계대배양(繼代培養)된 callus에서도 58.3%의 재분화율(再分化率)을 보였다. Callus유기(誘起) 배지(培地)에 CH(2g/1), MI(200mg/1), TH(2mg/1)등(等)을 첨가(添加)하면 callus생장량(生長量)도 많았고 식물체(植物體) 재분화율(再分化率)도 향상(向上)되었으며, 식물체(植物體) 재분화(再分化)에는 kinetin단용(單用)보다는 kinetin과 NAA를 혼용(混用)하는 것이 효과적(效果的)인 것으로 나타났다. Callus 계대배양(繼代培養)에 CH, MI, TH 등(等)을 첨가(添加)한 배지(培地)를 이용(利用)하면 embryogenic callus의 발생량(發生量) 증가(增加)하는 경향이었고 품종(品種)에 따라서는 식물체(植物體) 재분화율(再分化率)도 높게 유지(維持)되는 것으로 나타났다.