제2차 말 산업 육성 5개년 계획의 시행 등 말 산업이 전국적으로 확대됨에 따라 승용마 인공수 정을 원하는 농가도 점차적으로 증가하고 있는 추세이다. 말의 경우 신선·냉장정액 사용 시 적기 수정의 어려움이 있어 동결정액의 중요성이 대두되고 있다. 하지만 국내의 말 동결정액 연구는 미 미한 수준이며, 인공수정을 위한 말 동결정액은 전량 수입하여 사용하고 있는 실정이며, 말 동결 정액의 경우 신선정액이나 액상정액에 비해 활력 및 수태율이 현저히 떨어지는 문제점이 있다. 본 연구에서는 제주산마의 동결정액의 성상 개선을 위하여 펜톡시필린 수준(4mM, 8mM, 16mM)을 설 정하여 정자의 운동성, 생존율, 정자막 온전성을 평가하였다. PDE 억제제인 펜톡시필린 첨가는 정 자의 조기 첨체반응을 방지하고 수정률을 높이며 활성산소를 억제하는 효과가 있다고 보고되었 다. 정액의 동결-융해 30분 후에는 펜톡시필린 4mM(T1)처리구와 펜톡시필린 8mM(T2)처리구에서 Progressive Fast Motility(PFM)가 유의적으로 높게 나타났다. 융해 후 1시간에는 T4와 T8에서 대조 구보다 immotil, Motiltiy, Local Motiltiy에서 유의적으로 높은 결과를 보였다. 또한 생존율에서 T8보 다 T4가 유의적으로 높았으며, 펜톡시필린 16mM(T3) 처리구는 생존율은 대조구와 T4보다 높았으 나 Motiltiy가 다른 처리구보다 유의적으로 낮았다. 이상의 결과를 종합해 볼 때 펜톡시필린 4mM 와 8mM를 처리했을 때 비처리보다 정자의 운동성을 유의적으로 증진시키는 효과가 있었으며 펜 톡시필린 16mM 이상의 처리는 정자에 좋지 않은 영향을 미치는 것으로 나타났다.

This study was conducted to investigate the survival rate of frozen-thawed spermatozoa in equine by glycerol concentration and freezing speed. Two stallions (1 Thoroughbred-13 year old and 1 Arab-7 year old) bred in Korea Racing authority was examined for 1 times in a couple of weeks. Semen was collected by condom method standing heated mare and were centrifuged 650 g for 15 min. and isolated the seminal plasma. Thick fraction of semen was diluted EDTA-Lactose-egg yolk diluents to 1:1 and contained in 0.5 ml straw as 6～14×107cells/ml. Final concentrations of glycerol were 3, 5 and 7% in cryopreseved diluents and added 4 times for 2 hours equilibration. For the freezing, equilibrated straws were located 3 or 5 cm above LN2 gas for 5 or 10 min. Survival rates of pre-frozen sperm were 65.0±13.2%, 68.3±10.4%, 66.7±11.5% and post-frozen were 53.3±23.1%, 45.0±15.0%, 50.0±18.0% in 3, 5, 7% glycerol concentration, respectively. There was no difference between glycerol concentrations. Survival rates of frozen-thawed sperm on freezing speed were 36.7±10.4%, 40.0±7.1%, 30.0±13.2% at 3 cm－5 min and 33.3±11.5%, 31.7± 2.9%, 21.7±10.4% at 3 cm－10 min in 3, 5, 7% glycerol concentration, respectively. Survival rates of frozen-thawed sperm on freezing speed were 43.3±15.3%, 32.0±17.9%, 22.3±15.7% at 5cm－5 min and were 47.5±15.0%, 43.3±12.6%, 48.3±15.3% at 5cm－10 min in 3, 5, 7% glycerol concentration, respectively. There were significantly different between groups (p<0.05). These results suggest that glycerol concentration did not affect cryopreservation of stallion semen within 3～7% but freezing speed affects. In our experiment, the best cryopreservation condition was at 5 cm above LN2 gas for 10 min for pre-freezing and 7% of glycerol concentration. These results lead to commercial AI with frozen-thawed stallion semen.