아미노글리코사이드계 항생제(Aminoglycosides, AGs) 는 그람음성균과 양성균에 광범위하게 작용하는 동물용 의약품으로, 최근 배양육에 사용된다고 알려져 있어, 안 전성 관리를 위한 분석법 마련이 반드시 필요하다. AGs 는 고극성 화합물로 성분 간의 분리를 위해 이온쌍 시 약(ion-pairing reagent, IPR)을 사용하고 있으나 IPR을 이동상에 첨가하는 기존 분석방법의 경우 용매가 흐르 는 동안 질량분석기로 주입되는 IPR로 인해 기기적인 문 제가 발생할 가능성이 높아, IPR를 바이알에 직접 첨가 하는 분석방법을 검토하였다. 본 연구에서 10종 AGs 성 분에 대한 분석방법을 확인하고 유효성을 검증하였다. 검출한계와 정량한계는 각각 0.0001-0.0038 mg/kg 와 0.004-0.011 mg/kg의 범위로 나타났으며, 0.01-0.5 mg/ kg 범위 내의 직선성(R2)은 0.99 이상이었다. AGs의 시 료 회수율을 확인하고자 소고기와 세포배양배지(cell culture medium) 매질에서 회수율과 상대표준편차로 나 타낸 정밀도를 확인한 결과 각각 70.7-120.6% 및 0.2 to 24.7%로 나타났다. 기존의 이동상에 IP 첨가 방법과 비 교하였을 때 유사한 수준으로 양호하였다. 검증된 AGs 분석법은 국내 유통되는 닭고기, 소고기, 돼지고기 15품 목과 배양육 배지 첨가제 6품목에 적용해보았다. 그 결 과 국내 유통되는 육류 15품목 모두 AGs 성분이 검출 되지 않았으나, 세포배양배지에서 streptomycin은 695.85- 1152.71 mg/kg, dehydrostreptomyci은 6.35-11.11 mg/kg 로 검출되었다. 따라서 IRR을 바이알에 직접 첨가하는 LC-MS/MS 방식은 육류, 세포배양배지, 배지첨가제 중 AGs 분석 및 안전성 평가를 위한 기초자료로 활용될 것 으로 기대된다.

Fowl typhoid (FT) is a septicemic disease caused by Salmonella Gallinarum (S. Gallinarum) and is responsible for severe economic losses in Korea. In this study, 49 aminoglycosides (AMG)-resistant S. Gallinarum were analyzed to determine the phenotypic and genotypic characteristics. Thirty-six (73.5%) out of 49 AMG-resistant S. Gallinarum exhibited resistance to at least one agent in three or more of antimicrobial categories as multidrug-resistant (MDR) isolates. Among the AMG-resistant isolates exhibiting MDR, 21 (58.3%) and 11 (30.6%) of the isolates harbored ant(2")-I, which encodes an aminoglycoside adenylyltransferase, and blaTEM-1, which is a β-lactamase-encoding gene, respectively. The qnrB, cmlA, and sul1 and sul2 genes, which are related to resistance to quinolones, chloramphenicol and sulfonamides, respectively, were detected in 8.3~22.2% of the AMG-resistant isolates that exhibited MDR. Twenty-four (66.6%) of 36 AMG-resistance S. Gallinarum exhibiting MDR carried class 1 integrons with aadA genes cassettes. Several plasmid replicon types, such as B/O, FIIA, FIB, and Frep were considered to play a prominent role in S. Gallinarum, and the presence of these genetic characteristics remain a serious concern to the selection of antimicrobials for the treatment of FT.

A confirmatory method based on liquid chromatography with tandem mass spectrometry was developed for determination of 12 aminoglycosides in milk. Extraction of aminoglycosides from milk was performed using by liquid extraction using a 10 mM phosphate buffer containing 2% (w/v) trichloroacetic acid, followed by performance of a solid-phase clean-up procedure on a hydrophilic-lipophilic balance solid-phase extraction (HLB SPE). Ion-pair chromatography, using a mixture of 20 mM heptafluorobutyric acid (HFBA) in water and acetonitrile as the mobile phase, was used for retention of aminoglycosides on a reversed-phase C18 column. Mass spectral acquisition was performed in the multiple reaction monitoring mode, selecting two precursor ion>product ion transitions for each target compound. Satisfied recoveries (70.1～109.6%) of all aminoglycosides were demonstrated in spiked milk at three levels from 50 ng/g to 200 ng/g. The coefficients of variation ranged from 3.2% to 14.0%. The limits of quantitation (LOQs) for aminoglycosides ranged from 2.5 ng/g to 40.3 ng/g.