본 연구는 하수 및 가축분뇨 처리장 방류수, 하천수를 이용하여 반코마이신 내성 장구균(Vancomycin Resistant Enterococci, VRE)의 검출여부를 확인하고 검출된 장구 균의 표현형을 분석함으로써 하천에 대한 공공처리시설 의 방류수에 포함되어있는 엔테로코커스의 영향을 파악 하여 항생제 내성균이 환경에 미치는 영향 및 항생제 내 성 연구에 기초 자료가 되고자 하였다. 엔테로코커스의 동정시험 결과 모두 32균주가 검출되었고 이는 모두 E. faecium으로 동정되었다. Multiplex PCR 시행한 결과 32 균주 모두 Van A 표현형에 해당하는 반코마이신 내성 장 구균으로 확인되었다. 조사지점별 세균의 E. faecium 집 락수의 측정 결과 하수처리장 지역에서 평균적으로 가장 높게 나타났고, 하천 지역의 경우 상류지점에서 하류 지 점으로 갈수록 세균의 colony 숫자도 늘어나는 것으로 조 사되었다. 하수처리장 방류수 시료 26균주에 대한 최소억 제농도 검사 결과, 19개의 항생제 중 내성, 감수성을 보인항생제 수는 각각 14, 5종으로 내성을 보이는 항생제의 수가 약 70% 이상으로 대부분을 차지하였다. 하천 시료 6균주에 대한 최소억제농도 검사 결과, 19개의 항생제 중 내성, 감수성을 보인 항생제 수는 각각 14, 5종으로 내성을 보이는 항생제의 수가 약 70% 이상으로 대부분 을 차지하여 하수처리장 방류수 시료의 검사 결과와 동 일하였다.

Antibiotics marker-free with herbicide-resistant tall fescue plants were produced through Agrobacterium: mediated transformation system. Embryogenic calli derived calli were infected with Agrobacterium tumefaciens strain EHA105 harboring the pCAMBIA3300 vector containing the bar and the CP4-EPSPS genes. The PPT-resistant calli and plants were selected with 10 ㎎/L PPT, respectively. Soil-grown plants were obtained about 14-16 weeks after Agrobacterium-mediated transformation. Genetic transformation of the regenerated plants growing under selection was demonstrated by PCR, and Southern blot analysis revealed that one copies of the transgene were integrated into the plant genome of each transgenic plant. Expression of the bar and CP4-EPSPS genes in transgenic plants was confirmed by Northern blot analysis and CP4-EPSPS genes in transgenic plant ELISA uses antibody protein by ELISA Assays. Transgenic plants sprayed of two herbicides with glufosinate ammonium or glyphosate remained green and healthy. We therefore report here a successful and reliable Agrobacterium-mediated transformation of two herbicide-resistances and this method may be useful for routine transformation and has the potential to develop new varieties of tall fescue with several important genes.