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pp.122-128
본 연구는 probiotics 균주 선발을 위해 동치미로부터 식중독균에 대해 높은 항균활성을 보이는 유산균을 분리동정하여 배양조건을 확립하고, 위산, 담즙산, 췌장액에 대한 저항성 실험을 비교, 분석하여 probiotics 균주로 사용 가능성을 탐색하고자 하였다. 2% CaCO3를 첨가한 MRS agar를 이용하여 김치 무리로부터 식중독균의 저해능이 우수한 8 균주를 분리하였다. 식중독균에 대해 항균활성실험 결과 J4가 B. cereus는 19.85±0.53 mm, L. monocytogenes는 18.37±0.38 mm, S. aureus는 22.49±0.37 mm, E. coli는 17.90±0.64 mm, S. enterica는 16.28±0.53 mm, V. parahaemolyticus는 24.59±0.29 mm의 생육저해환을 형성하여 가장 높은 항균력을 나타내었다. J4 균주의 16S rDNA 염기서열을 분석한 결과 L. sakei와 99% 상동성을 나타내어 L. sakei J4라 명명하였다. L. sakei J4의 최적배양조건은 pH 8.5, 30, 정치배양시 가장 활발하게 생육이 진행됨을 확인하였다. L. sakei J4는 인공위액에서의 생존율 24.3±3.0%, 담즙산에서의 생존율 25.8±0.4%, 췌장액에서의 생존율 101.2±4.5%로 다른 균주보다 상대적으로 생존율이 높았으며, 향후 alginate를 이용한 캡슐화, chitosan을 이용한 재코팅 등의 연구방법을 정립하여 인공위액에 대한 저항성을 높인다면 프로바이오틱스 균주로서 조건을 충족시킬 수 있으리라 사료된다.
Various lactic acid bacteria were isolated from Korean Dongchimi (whole radish Kimchi with added water) in order to study their antimicrobial activity, optimal culture conditions and probiotics. Among the eight isolated strains, J4 showed the highest inhibitory effect on pathogens (Bacillus cereus KCTC 3624, Listeria monocytogenes KCTC 13064, Staphylococcus aureus subsp. aureus KCTC 3881, Escherichia coli KCTC 2441, Salmonella enterica subsp. enterica KCTC 2514, Vibrio parahaemolyticus KCTC 2729). It was identified as Lactobacillus sakei based on its morphological and 16S rRNA gene sequence, and designated as L. sakei J4. The optimal pH of the medium, culture temperature and shaking speed for the antimicrobial substance (s) production were pH 8.5, 30oC and 0 rpm, respectively. L. sakei J4 had 24.3% of survival after 2 hr incubation in the artificial gastric juice, 25.8% of survival after 24 h incubation in the presence of 0.3% oxgall and 101.2% of survival after 24 hr incubation in the 0.5% pancreatic juice. These results suggest that Lactobacillus sakei J4 may be commercially used for the probiotic culture.
