Injection of nematicides such as emamectin benzonate and milbemectin is the most common practice to control the pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, in Korea. These macrocyclolactone nematicides, however, are expensive, limiting their practicability despite of high efficacy. In an attempt to screen affordable alternative organophosphate (OP) and carbamate (CB) nematicides, we identified and characterized three acetylcholinesterases (ACE, EC 3.1.1.7) from B. xylophilus and functionally expressed them using baculovirus system. In inhibition assay using 11 OPs and 3 CBs, all the three ACEs were highly inhibited by paraoxon, DDVP, chlorpyrifos-oxon and mevinphos of OPs and carbofuran and carbaryl of CBs but not inhibited well by the others. Interestingly, inhibition assay revealed that BxACE-3 is less sensitive to all insecticides tested than other two ACEs. In additional bioassay, chlorpyrifos, DDVP and parathion showed a high LC50 but all CBs tested did a very low mortality. The inhibition kinetic data and bioassay data obtained in this study should provide essential information for the development of OP-based nematicidal agents against B. xylophilus. Availability of expressed ACE will also facilitate the development of in vitro screening system to develop potential OP nematicides.

The pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus (Steinner & Buhrer) Nickle, has two different life stages according to several environmental factors: dispersal stage and propagative stages. The dispersal stage is closely related to the migration to other host pines, whereas the propagative stage is coupled to the direct cause of pine wilt. To establish expressed sequence tag (EST) database of two life cycles of B. xylophilus, subtractive EST libraries were constructed using suppressed subtractive hybridization (SSH). From 3,072 and 3,840 sequences of dispersal- and propagative-specific stage cDNA libraries, 1,927 and 2,604 clusters were generated, respectively, which were annotated by BLASTx and Gene ontology (GO). A total of 1,112 (57.7%) and 1,215 (46.7%) clusters from the dispersal- and propagative-specific stage cDNA libraries respectively had the matched BLASTx hits (E≤10-2), among which 913 (47.4%) and 960 (36.9%) were classified into three categories in Gene ontology. From GO database, some respective stage-specific genes were searched and estimated the relative transcripts level according to stages using the quantitative real-time PCR.

근접방사선치료는 일반적으로 외부방사선치료와 병행하여 수행되고 치료단계가 매우 복잡하며 이로 인 해 방사선 사고가 발생될 수 있다. 본 연구에서는 이를 해결하기 위해 근접방사선치료에 사고유형과 영향 분석(Failure mode and effects analysis, FMEA) 방법을 적용하여 프로세스 맵을 구성하고 이를 기반으로 각 치료단계에 대한 위해도를 산출하였다. 프로세스 맵은 “외래 및 진료”와 “근접방사선 모의치료”, “CT 모의 치료”, “근접방사선치료계획”, “방사선치료”로 총 5단계로 구성하였으며, 각 치료단계를 세분화하여 세부단 계를 작성하였다. 위해도를 산출하기 위해 의사와 의학물리사, 선량설계사, 방사선사, 간호사가 참여하여 세부단계마다 발생빈도와 심각도, 불검출도를 평가하였다. 전반적으로 프로세스 맵은 각 치료단계마다 환 자 신원 확인 절차가 우선적으로 수행되며, 이는 다른 환자로 오인하여 서로 다른 치료계획이 수립되어 방 사선사고가 발생될 우려가 있다. 프로세스 맵을 기반으로 작성한 세부단계에 대해 위해도를 평가한 결과, 전반적으로 “외래 및 진료”와 “근접방사선치료계획” 과정이 높은 위해도로 평가되었다. 직종마다 평가한 위해도는 서로 다른 경향을 보였으며, 간호사는 방사선치료를 제외한 모든 과정이 55점 이상의 위해도를 보였으며, “근접방사선 모의치료” 과정이 88.8점으로 가장 높았다. 방사선치료를 수행하는 의료기관마다 치 료단계가 다소 차이가 있으므로 해당 기관에 대한 프로세스 맵을 작성하고 위해도를 산출하여 중점관리 항목을 집중적으로 리스크 관리가 수행되어야 할 것으로 생각된다.