작약(芍藥)의 약(葯)으로부터 분리된 화분소포자(花粉小胞子)를 생장조절제가 첨가되지 않은 MS 배지에 배양하였을때 직접 배(胚)발생 과정을 거쳐서 소포자 유래의 배(胚)가 형성되었고, 1mg/l의 PAA가 첨가된 배지에서는 화분소포자 유래의 캘러스가 형성 되었으며 이들 캘러스를 생장조절제를 함유하지 않은 배지에 이식하였을 때 배양 7주 후에 배(胚)가 형성되었다.

Doubled haploid system is a very effective tool which has been widely applied in wheat breeding programmes. Wide-hybridization, wheat X maize cross, is used for the production of wheat doubled haploids (DH). The introduction of doubled haploid (DH) approach into breeding programs has reduced the times and population sizes required for the production of pure lines. We carried out the experiment for development on effective method of producing haploid in wheat. Emasculated spikelets of wheat were pollinated with maize pollen and cultured in the solution containing 40 g/ℓ sucrose and 2,4-D, ABA and GA3 24 h after pollination, and then incubated until embryo rescue. twelve to fourteen days after pollination, the embryos are excised and cultured in half-strength MS basal medium supplemented with 20 g/ℓ sucrose and 1 ㎎/ℓ NAA. The type of plant growth regulators was found to be most significant in production of haploid plants. The application of synthetic auxins to pollinated florets, stimulates haploid embryo development to a stage where the embryos can be rescued onto nutrient media. The percentage of embryos formed was significantly affected by 100 ㎎/ℓ 2,4-D plus 50 ㎎/ℓ BAP and 100 ㎎/ℓ 2,4-D plus 50 ㎎/ℓ GA3. There was varied efficiency in embryo formation from 5.7 to 53%.

Composition of nutrient media, flower bud size, cold pretreatment, heat shock stress, and ethylene inhibitor could have marked effects on microspore embryogenesis. No microspore-derived embryos (MDE) were formed when microspores were isolated from radish (Raphanus sativus L.) flower buds of 1.0-2.5 mm in size, whereas MDE were formed with microspores isolated from 2.5-4.5 and 4.5-6.5 mm flower buds. The microspores isolated from 2.5-4.5 mm flower buds showed high embryo yields. When the isolated microspores were washed with Nitsch & Nitsch (NLN) liquid medium containing 130 g‧L-1 sucrose (NLN-13), the yield of MDE increased significantly when comparing with washing using B-5 liquid medium containing 130 g‧L-1 sucrose.Microspores cultured on half strength NLN liquid medium containing 0.05 mgL-1 silver nitrate (AgNO3) produced the most MDE, showing a more than two-fold increase in yield compared to those cultured on medium without AgNO3. A heat shock pretreatment of microspores at 32°C for 24 h gave high-frequency production of MDE when compare to higher or lower temperatures; no MDE were formed at 42.5°C. Microspore viability is known to decrease rapidly with storage; however, in this experiment, microspore viability was maintained for 24 h at 4°C without media. A polyploidy test indicated that 19.7% of the microspore-derived plants were double haploid, other plants were haploid, and chimeras were haploid and diploid. This protocol is thought to be very useful for efficient production of homozygous lines that is critical for the production of radish F1 hybrids

본 연구는 금낭화 배우체의 형성과 배 발달특성에 관한 기초 자료로 활용하기 위해 수행되었다. 시원세포로부터 발달된 소포자 모세포는 화뢰의 길이가 1 mm일 때 감수분열을 하여 4면체형(tetrahedral) 4분자가 형성되었다. 4개의 소포자는 분리되어 각각 웅성배우체로 발달하였다. 대포자 모세포는 화뢰의 길이 4~5 mm에서 관찰되었다. 대포자의 발달유형은 정상형(polygonum)이었으며, 배낭의 형태는 굽어있는 곡생배주(amphitropous)였다. 3개의 뚜렷한 반족세포는 배낭이 성숙한 후에도 퇴화하지 않고 남아있었다. 개화 전 자웅배우체는 충분히 성숙하였다. 개화 시에 수술과 암술의 길이는 거의 비슷하거나 수술이 0.5 mm 짧아서 자화수정에 적당한 구조를 가지는 것으로 나타냈다. 수정 후 배는 구형, 심장형을 거쳐 자엽배까지 발달하였으며, 종자 산포시 초기 자엽배를 가지고 있음을 알 수 있었다.

가시오갈피의 조직배양을 통한 대량증식방법체계 확립의 한 방법으로 미숙배 배성숙정도 및 배지의 종류가 callus 형성 및 식물체 분화에 미치는 영향을 구명코자 실시한 실험결과는 다음과 같다. 1. 미숙배배양으로부터 캘러스형성은 MS, WPM 배지보다 SH 배지가 더 효과적이었으며, SH 배지에 2,4-D 1mgl를 첨가시 83.3%의 캘러스형성율을 보였다. SH배지에 TDZ을 단독처리하였을 때 보다 양호한 신초 분화를 나타났고 배의 성숙정도가 C단계 (2mm이상)인 미숙배를 치상하였을 때가 미숙배의 크기가 2mm 이하인 A, B단계의 미숙배를 치상하였을 때보다 식물체 분하가 더 잘되었다. 2. SH배지를 기본으로 하여 2,4-D와 TDZ을 조합처리하였을 때 배의 성숙정도가 C(2mm이상)인 배를 2,4-D 0.1mg/l+TDZ 3mg/l 처리시 양호한 신초 분화를 보였다. 3. WPM 배지를 기본으로 하여 2,4-D와 TDZ을 처리하였을 때 배의 성숙정도가 C(2mm이상)인 배를 TDZ 0.1mg/l 처리시 4.7개의 신초로 양호한 결과를 보였다.