Brassinosteroids (BRs) control virtually every aspect of plant growth and development. BRs act alone or with other exogenous and endogenous signals including auxin and light. To screen for the novel player involved in BR signaling in Arabidopsis, we employed cDNA overexpression strategy. We created a cDNA library to be expressed under the 35S overexpression promoter, and introduced into a weak brassinosteroid insensitive 1 (bri1) mutant. The mutant dubbed bri1-5 with long petiole (blp) was identified to display bigger stature especially in hypocotyl and petiole length relative to bri1-5. Sequence analysis of the rescued transgene revealed that blp consisted of a chimeric DNA consisting of a 3’ half of PHYB, 2 bp insertion, and a part of a chloroplast ribosomal RNA. Re-introduction of chimeric DNA into bri1-5 recapitulated blp phenotype. The blp phenotypes being similar to phyB mutants led us to examine both the PHYB transcript and protein levels in the blp 35Spro:PHYB doubly homozygous line. Lower levels of both transcripts and proteins of PHYB suggested that introduction of the chimeric gene interfered with the stability of PHYB transcripts. Our results highlight that overexpression mutagenesis facilitates functional genomics to decipher a function of Arabidopsis genome.
1. 낮은 농도의 지베렐린 처리에서는 돌연변이종의 절간장이 야생종보다 훨씬 많이 신장되어 지베렐린에 의한 절간 신장현상은 파이토크롬 B를 통하여 이루어짐을 보였다. 2. 고농도의 GA처리시 이들간의 초장 및 절간장의 차이는 나타나지 않아 고농도의 지베렐린에 의한 절간신장효과는 파이토크롬 B에 의존하지 않았다. 3. GA3 처리 후 내생 지베렐린의 함량을 조사한 결과 파이토크롬 B 변이종과 야생종간에는 큰 차이를 보이지 않음에도 불구하고 절간 신장률은 변이종이 야생종보다 현저하여 파이토크롬 B가 지베렐린의 반응 정도를 조절함을 입증하였다. 4. GA 생합성 억제제에 의한 내생 지베렐린의 합성이 억제된 경우 파이토크롬 B 변이종과 야생종간의 절간신장은 차이를 보이지 않아 파이토크롬의 절간신장효과는 지베렐린을 통해 일어남을 알 수 있었다.