The present study were performed to analysis the hematocrit and the red blood cells content into the blood plasma of the transgenic pigs harboring recombinent human erythropoietin gene (rhEPO). Mouse whey acidic protein (mWAP) linked to rhEPO gene was microinjected into pronuclei of porcine one-cell zygotes. After delivered of offspring, PCR analyses identified one mWAP-rhEPO transgenic founder offspring(F/sub 0/). The first generation of transgenic pig (F/sub 0/) harboring mWAP-hEPO appeared to be a male, and the second generation (F₁) pigs were made by natural mating of F/sub 0/ with domestic swine, and male and female transgenic pigs (F₁) were identified by PCR. The blood samples from transgenic and normal pigs were collected for 50 days during lactation and were counted the red blood cell (RBC) numbers and Hematocrit (HCT) content into the blood. The transgenic pigs expressing rhEPO in their blood gave rise to higher RBC numbers and HCT contents than control animals. rhEPO was secreted both in the blood and milk of genetically engineered pigs harboring rhEPO gene. Therefore, this study provides a model regarding the production of transgenic pig carrying hEPO transgene for biomedical research.
본 연구는 xanthine(X)-xanthine oxidase(XO) system하에서 돼지 난자의 체외성숙과 체외수정에 대한 catalase의 영향을 검토하였다. 그 결과 돼지 난포난자가 X 또는 XO하에서 배양되었을 때, 난포난자의 성숙율은 다른 배양시간에도 불구하고 catalase 첨가 유무에 따른 유의적인 차이를 나타내지 않았다. 그렇지만, X-XO-catalase system하에서 배양한 경우 유의적으로 높은 성숙율을 얻었다(P<0.05). 퇴행난자의 비율은 배양기간이 늘어남에 따라 증가되었으며, 배양 120시간에서는 catalase 첨가시보다 무첨가시에 유의적으로 높았다. 다른 한편으로, 단위발생 난자들이 배양 72시간에 높은 비율로 관찰되었지만, 다양한 배양시간에서 catalase 첨가유무에 따른 차이는 발견되지 않았다. 또 다른 실험에서, 동결-응해된 돼지 정자가 체외수정을 위해 X-XO system으로 처리되었다. 난자투명대에 대한 정자침입율은 none (P<0.05), XO, X+XO하에서 체외수정시 catalase 무첨가시보다 첨가시에 높게 나타났다. 다른 한편으로, 돼지정자가 none, X, XO, X+XO로 처리되었을 때, lipid peroxidation은 catalase 첨가시보다 무첨가시에 높은 비율로 나타났으며, 그 결과 정자침입과 lipid peroxidation에서의 변화가 상반되는 양상을 보였다. 그렇지만, 모든 조건하에서 정자의 sulfhydry (-SH) group의 함량은 catalase 첨가시에 높게 측정되었다. 난자의 투명대에 대한 정자의 접착 정도는 salt-stored 돼지 난자에 대한 정자접착을 통해서 평가되었으며, control group의 경우 X, XO, X+XO group에 비해 높은 정자접착율이 관찰되었다. 그렇지만, catalase 첨가유무에 따른 유의적인 차이는 인정되지 않았다. 본 연구의 결과는 X-XO-catalase system에 대한 난포난자와 정자의 노출이 돼지에서의 체외성숙과 체외수정을 촉진시키는 것으로 생각된다.
This study was conducted to investigate the effect of vitrification solution(VS) on in vitro developmental competence of immature porcine oocytes. The immature porcine oocytes were exposed to the following vitrification solution, at RT. 1) EFS sol. : 20% ethylene glycol (EG) 3 min, 40% EG + 18%(w/v) Ficoll(MV70, 000) + 0.3 M sucrose 30 sec, 2) GE sol. : 10% glycerol 5 min, 10% G + 20% EG 5 min, 25% G +25% EG 30 sec, 3) EG sol : 1.5M EG 2.5 min, 5.5 M EG + 1.0 M sucrose 30 sec. Oocytes were immediately transferred into 1.0 M, 0.5 M, 0.25 M, 0125 M, 0 M sucrose solution for 2.5 min each at RT. After removal of VS, immature oocytes were matured in vitro and subsequently all oocytes were subjected to IVF followed in vitro culture for 7 days. Maturation rates of oocytes were 38.8%, 44.5%, 22.4% and 57.6%, in EFS, EG, GE and Control, respectively, maturation rates of oocytes in EG and Control was significantly higher than EFS and GE(P<0.01). Fertilization rates of oocytes in Control was significantly higher than other treated groups(P<0.05), but no difference were observed among treated groups. Polyspermic rates were no significant difference among four groups. Cleavage rates of oocytes were 21.9%, 47.1%, 19.0% and 65.9%, in EFS, EG, GE and Control, respectively, cleavage rates of oocytes in EG and Control was significantly higher than EFS and GE(P<0.05), but blastocyst formation rates were no significant difference among four groups. These results suggested that the use of EG solution could be a great challenge for reaching a successful vitrification of immature porcine oocytes.
The high incidence of polyspermic fertilization is one of the major causes lowering the overall efficiency of porcine IVF. The common procedure for IVF involves the co-culture of both gametes in the medium drop, which increases sperm concentration and incidence of polyspermy. Therefore, the present study was carried out to increase the efficiency of porcine IVF by reducing polyspermy using a modified swim-up method. This method modifies conventional swim-up washing by placing oocytes directly at the time of washing. Sperm pellet was prepared in the tube and mature oocytes were placed on cell strainer with pore size (Falcon 2350) at the top of the tube. After insemination, the oocytes were stained for examination. Also, the developmental potential of fertilized embryos was measured to evaluate for the feasibility of this method. While having similar penetration rates in both methods (), there was a significant reduction of polyspermy in modified swim-up method () compare to the control ( (p<0.05). Subsequent culture showed higher rate of blastocyst formation in modified swim-up method (20.440.99%) than the control () (P<0.05), even though there was no significant difference. These results suggest that, by controlling the number of spermatozoa reaching the oocytes, porcine oocytes might be protected from polyspermy in vitro. Also, the developmental potential of the fertilized embryos using this method could be improved by increasing the pool of spermatozoa with better quality. Further optimization of the procedure required to implicate this method in routine porcine IVF.
1981년부터 최 등이 재래종 옥수수의 수집종 가운데서 병발한 한계통(MET)을 분얼이 많이되고 또한 개체당 이삭(수)수도 많아서 사료용 옥수수의 육종재료로 가치가 있다고 생각되었으나 이 옥수수에 대한 유전적 분석이 확실히 되어 있지를 않았다. 따라서 본연구에서는 MET와 비분얼성이며 이삭도 하나 밖에 달리지 않는 수원 19호 (Mo17 B68) 교잡종을 이용하여 F1 , F2 , BC1 , 세대를 양성하고 Mather의 세대평균분석법에 의하여 분석한 결과 MET 계통의 다수.다얼성은 염색체상의 유전인자에 의한 다기 보다 세포질적 유전인자에 의한다는 것을 확인하였다. 이같은 결론은 MET계통을 모계로 하여 교잡한 려잡종 세대에서 확실히 얻을 수가 있었다. 즉 MET 계통을 모계로 이용했을 때의 평균분얼과 이삭수는 MET를 부계로 이용했을 때의 분얼수와 이삭수 보다 많았는데 이는 이같은 특성들이 모계유전을 하기 때문이다. 그러나 이같은 특성들이 F1 이나 F2 에서 나타나지 않은 것은 F1 에서 특히 보여주는 잡종강세현상 때문에 옥수수의 정부우세성이 매우커서 상반적으로 분얼이나 이삭의 발달이 억제되었기 때문이라고 생각된다. 그리고 분얼이나 이삭의 절대수가 모계로 이용했던 MET에서 보다 잡종세대가 진전될수록 적어지는 것은 잡종강세외에도 MET계통의 세포질약 내지 유전인자적 축적량(Dose)이 적어지기 때문이라고 생각되어진다. 이같은 MET계통의 특성은 려교잡에 의한 MET계통의 세포질을 유지하거나 축적하므로써 사료용 옥수수의 육종에 이용될 수 있을 것으로 보여졌다.에서 조생종이 높은 발아력을 나타냈으나 16℃ 에서는 조, 중, 만생종 간에 발아력 차이가 없었다. 5. 참깨 종자중과 발아율과의 관계는 단일품종 내에서는 종자중이 무거울수록 발아율이 높았으며 평균 발아일수도 단축되는 경향을 보였으나 공시품종들의 천립중의 경중 특성에 따른 발아력 차이는 없었다.e more the silica filler was added, and the lower the gel temperature was in the epoxy system. In this study it is concluded that the curing of the silica filled epoxy system was found to be accelerated, as silica was added to the epoxy compound.ed by adults who are middle-aged or elderly. If altered colors are applied to the digital products as much as popular culture changes, it can assist the elderly with their weakened physical abilities.동위효소 사이의 특성을 나타냈고, 골격근과 눈 조직에서 피루브산에 대한 LDH의 친화력이 상당히 크므로 LDH가 혐기적 조건에서 효율적으로 기능을 하는 것으로 사료된다.5) and "Cleanliness of clothes & features" (p <0.05) of VIP ward were significantly higher than those of a general ward.tive to apply.아울러 고려(考慮)해야 한다. 이것