돼지의 체세포 핵이식(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)은 인간에게 약리적 효과가 있는 단백질, 이종 간 장기이식(xenotransplantation)에 사용되는 장기, 질병 연 구 목적의 모델 동물을 제공한다. 특히 형질전환 돼지를 활용한 심장 이식이 세계 최초로 성공한 후 형질전환 돼 지 생산의 안정화는 다음 연구를 위한 중요한 점으로 대 두되고 있으나, 미니돼지의 체세포 핵이식 배아의 생산 효율은 아직 낮은 실정이다. 형질전환의 성공은 양질의 SCNT 배아 생산에서 시작되어야 한다. 이러한 SCNT 배 아의 생산 효율을 향상할 수 있는 요인 중에는 공여 세포 의 형태가 있으며, 성공적인 공여 세포의 생산을 위해서 는 종축에 따른 세포의 특성을 파악하여야 하고, 혈액형 의 차이에서 발생하는 문제점 해결을 위해 OO 타입의 선 별이 필요하다. 본 연구에서는 지속적인 계대 배양을 통 하여 공여 세포로 사용되는 미니돼지의 태아섬유아세포의 계대 배양 조건을 확립하고자 한다. 또한 미니돼지의 혈 액형을 PCR 기반으로 분석하여 분류하고 OO 타입의 선 별을 통하여 이종 간 이식에 용이하게 공여 세포의 조건 을 확립하였다. 이후 sgRNA(single guide RNA)를 사용하 여 CRISPR-Cpf1로 GGTA1(α-1,3 galactosyl-transferase) 유전자를 knock-out 한 미니돼지의 생산으로, 급성면역반 응을 유발하는 Gal(1,3)Gal epitope이 제거된 미니돼지의 세포 주를 구축 및 체세포 핵이식을 통해 GGTA1 knock-out 미니돼지를 생산하였으며, 이러한 연구는 이후 체세포 핵이식 및 이종 간 장기이식에 중요한 기초자료로 사용될 것이라고 생각된다.

The structural diversity and localization of cell surface glycosphingolipids (GSLs), including gangliosides, in glycolipid-enriched microdomains (GEMs) render them ideally suited to play important roles in mediating cell recognition, adhesion, interactions, receptor function, and signaling. Gangliosides, sialic acid-containing GSLs, are most abundant in the nerve tissues. The quantity and expression pattern of gangliosides in brain change drastically throughout development and these changes are mainly regulated through stage-specific expression of glycosyltransferase genes. However, roles of gangliosides in neuronal differentiation of mesenchymal stem cells (MSCs) is unclear. We previously demonstrated for the first time that the glycosyltransferase genes during mouse embryogenesis. So, we investigated the effects of ganglioside gene in differentiation of adipose-derived MSCs (AD-MSCs). GM2 and GD3 ganglioside synthease were increased during neuronal differentiation of AD-MSCs. This study showed that the differentiation of neuronal marker was decreased on the first step of ganglioside synthase UDP-glucose ceramide glucosyltransferase(UGCG) and knock downed GM2 sythase (B4GALNT1). The result of suggested that GM2 and GD3 might be important roles in the neural differentiation of mini-pig AD-MSCs. This work was carried out with the funding of the cooperative research Program for Agriculture Science & Technology Development[Project No. PJ00999901], the Rural Development Adiministration, the KRIBB Research Initiative Program[KGM4251622].