복숭아혹진딧물(Myzus persicae )의 성충 발육과 산자수를 , 상대습도 60-70%, 광주기 16L:8D 조건에서 조사하고 생명표를 작성하였다. 복숭아혹진딧물 성충은 까지 수명이 일로 온도의 상승에 따라 성충기간이 짧아졌으며, 산자수는 에서 40.8마리로 최고치를 보였으나 까지 산자수 차이에 유의성이 인정되지 않았다. 다만 에서는 8.4마리로 고온에 영향을 받은 것으로 보인다. 또한 복숭아혹진딧물 성충의 일일 산자수는 에서 5.1마리였고, 와 에서는 모두 2.8마리로 온도가 높거나 낮아지면서 일일산자수가 적어졌다. 온도별 총 산자수를 이용하여 작성한 산자 모형을 보면 에서 51.0마리로 최고값을 보인다. 또한 약충 발육시 사망률과 성충 수명, 산자수를 이용하여 생명표를 작성하였는데 복숭아혹진딧물은 Ro가 에서 36.5, 은 0.4, Dt는 1.6, 기간증가율은 1.5, 세대기간은 8.1로 가 복숭아혹진딧물 증가에 가장 적합한 온도로 나타났다.
복숭아혹진딧물(Myzus persicae)의 온도별 발육상을 조사하기 위해 에서 까지 간격으로 8개 온도에서 조사를 하였으며, 상대습도는 , 광주기는 16L:8D 조건으로 처리하였다. 일반적으로 진딧물의 약충 단계는 1령에서 4령가지로 구분하나 본 연구에서는 1-2령을 (1st-2nd nymph), 3-4령을(3rd-4th nymph)이라 하여 2단계로 구분하였다. 대부분의 온도에서 사망률은 초기 1-2령이 3-4령보다 더 높았으나 에서는 오히려 3-4령의 사망률이 대부분을 차지하였다. 온도별 발육기간은 에서 12.4일로 가장 길었고 온도가 상승함에 따라 점차 짧아져 에서는 4.9일로 가장 짧았으나 30에서 까지는 오히려 5.0일과 6.3일로 발육 기간이 길어지는 양상을 보였다. 약충의 발육영점온도는 이고, 유효적산온도는 116.5일도 이었다. 각 온도별 발육률은 변형된 Sharpe와 DeMichele의 비선형 모형에 잘 적합되었다. 발육단계별 발육기간을 표준화하여 누적시킨 값을 3개의 변수를 갖는 Weibull function에 적용하여 보았을 때 1-2령3-4령 전체 약충 순으로 발육기간이 짧아지는 경향을 보여 주었고 는 0.87-0.94로 나타났다.
진디혹파리(Aphidoletes aphidimyza Rondani 1847)의 발육실험 조건은 RH, 광조건은 16L:8D이었다. 알에서 번데기 기간까지 종합한 발육기간은 에서 43.9, 44.5일이였고, 에서 14.3, 15.8일이였으며, 발육영점온도는 10.7, 이고, 유효적산온도는 210.8, 245.5일도였다. 두 종의 진딧물을 먹이로 한 온도별 발육율은 변형된 Sharpe와 DeMichele의 비선형모형에 잘 적합되었다. 진디혹파리의 발육 단계별 발육완료 시기 분포 모형을 생리적 연령을 이용하여 Weibull function으로 보았을 때 알유충번데기 순으로 점차 발육 완료가 짧은 기간에 이루어지는 것을 볼 수 있었고 적합도를 나타내는 은 0.86-0.93, 0.85-0.94로 누적 발육율을 비교적 잘 보여주고 있다. 성충 수명은 에서 8.7, 9.2일이였고 에서 3.1, 2.7일이였다. 이들 결과를 종합해 보면 알 기간에서 의 경우 발육기간은 짧았으나 부화율이 미만으로 낮았고, 유충은 에서 번데기에 이르지 못하고 모두 사망하였고 에서는 발육기간이 길어져 이상에서는 유충과 번데기가 부의 영향을 받아 기존의 보고와 상이하였다. 또한 성충수명에서 의 경우 성충수명은 길었으나 케이지 내에서 움직임이 전혀 없었고, 산란 또한 하지 않았으며 에서도 성충기간이 짧아 산란 수가 아주 적거나 없을 것으로 생각된다. 따라서 진디혹파리를 진딧물 방제에 이용할 경우 성충이 자유롭게 움직이며 산란할 수 있는 이상 미만의 온도가 좋을 것으로 생각한다.
목화진딧물(Aphis gossypii Glover)의 성충수명, 산자수는 15-32.5, 습도는 , 광주기는 16L: 8D조건에서 조사하였고 이를 이용하여 생명표를 작성하였다. 를 기준으로 온도가 내려감에 따라서 수명이 길어지고 산자수가 증가하였다. 특히 에서 산자수가 61.8마리로 가장 많았다. 이와 다르게 성충의 일일 출산 수는 까지 온도가 올라감에 따라 증가하였고(일일평균 5.6마리) 이후 감소하였다. 온실에서 성충수명은 20.0일, 산자수는 59.6마리로 의 항온조건보다 수명은 길고 산자수는 더 많았다. 목화진딧물의 생명표를 작성한 결과 순증가률(Ro)은 에서 54.9이였고, 내적자연증가률()과 기간증가률()은 에서 0.5와 1.6으로 최고 값이었고, 배수기간(DT)과 평균세대기간(T)은 에서 1.4와 6.8로 가장 작았다. 따라서 이들 수치를 통해 보았을 때 목화진딧물이 생활사를 완성하는데 최적 조건은 라 생각한다.
목화진딧물 발육실험은 15-35, 습도는 60-70%, 광주기는 16:8 (L:D h)에서 수행 하였다. 진딧물 약충 사망률은 초기 1-2령의 사망률이 대부분을 차지하고, 온도의 상승에 따라 사망률이 높아져 32.5에서 36%였으며, 35에서는 1-2령의 사망률이 44%, 3-4령이 56%로 이 온도에서는 진딧물의 발육이 이루어지지 많았고, 3-4령의 사망률이 1-2령의 사망률보다 높게 나타난다. 전체약충의 온도별 발육기간을 보면 15-3까지 온도의 상승에 따라 발육기간이 11.5에서 4.6일로 짧아지는 경향을 보였고, 고온의 영 향을 받은 것으로 생각되는 32.5에서는 오히려 발육기간이 5.5일로 길어졌다. 발육영 점 온도는 5.이였고, 유효적 산온도는 106.8일도였다. 온도별 발육율은 변형된 Sharpe와 DeMichele의 비 선형 모형 에 잘 적합되었다. 발육단계별 발육기간을 표준화하여 누적시킨 값들은 3개의 변수를 갖는 Weibull function에 적합되었다.
포유동물의 암컷 생식기관에 존재하는 다양한 종류의 matrix metallo-proteinase (MMP)는 난소와 자궁의 구성성분의 주기적인 변화를 조절하며 이중 난소의 MMP는 난포의 성장과 배란 그리고 퇴화 동안 조직재구성에 매우 중요한 역할을 한다고 알려져 있다. 본 실험에서는 근래에 새로 발견된 사람의 난포액에 존재하는 분자량 약 110kDa인 MMP-2 isoform GA110을 동정하고 자 하였다. 난포액으로부터 GA110 단백질을 분리하기 위하여 난포액에 5mM ethylenediaminetetraacetic acid(EDTA)를 처리한 후 DEAE Sepharose Fast Flow를 이용한 chromatography를 시행하였다. 그 결과, 난포액 단백질들은 0.2M NaCl 의 분획에서 GA110 활성을 나타내었고 anti-human MMP-2 antibody에 대한 면역반응도 뚜렷이 나타났다. DEAE Sepharose Fast Flow에서 얻은 분획 중 GA110의 활성과 면역반응을 모두 나타내는 분획만을 모아 Gelatin Sepharose 4B affinity chromatography로 다시 분리하였다 분리한 결과 resin에 흡착된 단백질 (eluate) 분획들에서 매우 뚜렷한 GA110 gelatinase 활성을 나타내었으며 면역반응 또한 관찰되었다. 이 분획들의 단백질을 농축한 후 zymography를 시행하여 나타난 GA110 단백질 band를 잘라 내었으며 이로부터 단백질을 electroelution하여 농축한 후 reducing agent인 2-mercaptoethanol를 처리하였다. 이를 전기영동 후 MMP-2 (propeptide region) antibody를 사용하여 immunoblotting 한 결과 70-72kDa의 단백질만이 면역반응을 나타내었다. 마지막으로 위와 같이 준비된 70-72kDa 단백질의 아미노산 서열을 Edman degradation 방법으로 분석하였다. 그 결과 이 단백질의 N 말단의 10개의 아미노산 배열 순서가 알려진 사람의 proMMP-2의 전체 배열순서 중 propetide domain의 N 말단에서부터 다섯 번째에서 시작하여 10개의 아미노산의 서열과 정확하게 일치하였다. 위 결과들로 미루어 사람의 난포액에 존재하는 MMP-2의 새로운 isoform인 GA110은 70-72kDa의 ProMMP-2가 disulfide bond를 통해 homodimer 구조를 이루고 있는 것으로 여겨진다.
본 연구에서는 구조물의 변위 제약조건을 고려한 위상 최적설계를 체스판무늬 검색 알고리즘과 가상하중을 이용하여 수행하였다. 본 연구에서는 변위 제약조건의 민감도 계산을 위하여 가상 변위장을 도입하였으며, 밀도와 유효강성계수의 상관관계를 정의하기 위하여 가상재료를 도입하였다. 또한, 선형 유한요소를 이용한 위상 최적화 기법에서 일반적으로 나타나는 체스판무늬를 제거하기 위하여 밀도 재분배방법을 이용하였다. 그리고, 변위 제약조건을 고려한 경우와 그렇지 않은 경우의 수치예제를 비교 검토함으로써 본 연구의 타당성을 검증하였다.
This project has been worked out for isolation of EPA-producing bacteria from marine source of sea water, sea sediment and intestinal contents eviscerated from some red-muscle fish such as mackerel, horse-mackerel and spike fish. The samples were precultured on the media of PPES-II glucose broth and then pure-cultured on Nutrient agar and P-Y-M glucose. Lipids extracted from those bacterial mass collected by centrifugation were analysed in terms of lipid class and fatty acid composition. The results are resumed as follows : 1. 112 strains from sea water and 76 strains from sea sediment were tested for their EPA producing capability, but both strains of (SA-67 and SA-91) from the former and four strains(SS-35, 37, 51 and 71) from the latter have been proved to produce EPA above the level of 2% of total fatty acids. The strains such as GS-11, 29, 31, HM-9, 29, B-18, 33, 107, YL-129, 156, 203, 77, 104 and 256 which were isolated from fish intestinal contents, have also produced EPA at higher level than 2% of total fatty acids. 2. Contents of total lipids extracted from the cultures of these strains grown at 25℃, range from 2.8% to 6.9% (on dry weight %), and they are mainly composed of polar lipids(40.9~52.9%) such as phosphatidyl glycerol(+cardiolipin)(?) and phosphatidyl ethanolamine (33.8~40.0%), with smaller amount of free fatty acid (11.2~20.2%). 3. EPA was isolated from a mixture of fatty acid methyl esters obtained from the lipid of each strain by HPLC in silver-ion mode and was identified by GC-Mass spectrometry. 4. The strains of SW-91, GS-11, GS-29, HM-9, B-18 and YL-203 grown at 25℃ have a level of 5% EPA in their total fatty acids, and the GS-11 and HM-9 strains show a tendency of increase in the EPA level with an increase of growth temperature.
Some seeds of the Rutaceae family, Zanthoxylum piperitum, Z. schinifolium officinalis, Poncirus trifoliata, Citrus unshin, were investigated to clarify their antioxidative components. Finely powdered samples were extracted by hexane, followed by dichioromethane and then 70% methanol in a hot bath. Its unsaponifiables containing X-and Y-tocopherol with trace amount of β-and δ-tocopherol. also showed comparatively weak activity, although the hexane fraction itself had no significant antioxidative effect on lard. Levels of total tocopherols in the samples averages 42. 24-154. 11 mg/lOOg total extractives. The dichloromethane-and 70% methanol extractives showed strong antioxidative activity, from which antioxidative substances were purified with benzene-acetone(6:5, V/V) on a silica gel column, and with a solvent mixture of acetonitrile-methanol-H2O(40:40:20, V/V/V) on a Sep-Pak C18 hydrolyzed by 5% KOH-ethanol. The recovered unsaponifiables were, then, separated on a column of high performance liquid chromatography. The unsaponifiables produced by hydrolysis of the isolates from dichloromethane extractives has epi-catechin(40.0-57.1%) and (+)-catechin〈l9.1~24.4% to total phenolic substances, on area base) as major component, accompanied by chlorogenic acid, gallic acid(?), trans-p-coumaric acid and tralls-p-ferulic acid including some unknown components, and those derived from 70% methanol extractives also comprise (+)-catechin(31.3~39.6% to total components, on area base), epi-catechin(2O.2~36.4%), trans-p-cournaric acid(8.4-15.3%) and trans-p-ferulic acid(7.7~14.1%) as predominant component with some minor coponents, but the fraction supposed to be gallic acid(?) is not present. The antioxidative activities of the phenolic components isolated in this work were in order of epi-catechin〉catechin〉chlorogenic acid〉trans-p-ferluic acid〉trans-p-coumaric acid.
Contents of vitamin D3 and 25-OH-vitamin D3 in marine animal products(20 species) were determined by HPLC. The isomers of vitamin D, D2 and D3, were not clearly separated on a reversed phase, μ Bonda Pak, with 20% methanol-acetonitrile, and on a normal phase, Zorbax SIL. with 0.4% isopropanol-hexane, but 25-OH-vitamin D2 and-D3 were separated on either μ Bonda Pak with 10% methanol-acetonitrile, or on Zorbax SIL with 2.2% isopropanol-hexane, respectively. Although levels of vitamin D3 and 25-OH-vitamin D3 varied remarkably according to species, their average value(fish : l,l87sim36,007 I.U/sample 100g, mussel : 58~1,706 I.U/sample 100g, pickle: 1,208~79,358 I.U/sample 100g) was greatly higher than that of meat(80~100 I.U/sample 100g) and dairy products(400~800 I.U/sample 100g). Fatty tissues of fish and pickled fish intestines contained high level of vitamin D3 and 25-OH-vitamin D3, while the clam and mussel known to have various kinds of sterol including δ7-sterol showed very low levels of vitamin D3 and its derivative.
Levels of total lipids in the seeds of three species of the Pinaceae family were determined and their fatty acid compositions were also analyzed by a gas-chromatograph equipped with a capillary column coated with Carbowax 20M. The results are summarized as follows: Lipid contents of the seeds amounted to 56.9% in P. koraiensis, 29.9% in P. thunbergii, and 21.2% in P. rigida. In all lipids 19~20 fatty acid were detected and, surprisingly, fatty acids having δ5-non-methylene interrupted conjugate double bond such as δ5, 9-C18:2,δ5, 9, 12-C18:3 and δ5, 11, 14-C20:3 occurred in appreciable amounts. In the lipids of P. koraiensis, the main component was C18:2Ω6(45.0%), followed by C18:1Ω 9(26.9%) and δ5, 9, 12-C18:3(14.6%), and then δ5, 9-C18:2(2.2%) and δ5, 11, 14-C20:3 were also present. Levels of saturated fatty acid such as C16:0 and C18:0 were as low as 7.5%. The seed oil of P. thunbergii predominantly comprised C18:2Ω6(45.2%), and was then occupied by equal amounts δ5, 9, 12-C18:3(18.1%) and C18:1Ω9(18.1%). Its δ5, 11, 14-C20:3(5.8%) level was the highest in the samples tested. δ5, 9-C18:2(2.8%) was also detected with other minor components. In the oils from the seeds of P. rigida, C18:2Ω6 was present as a main component, accompanied by C18:1Ω9(21.6%) and δ5, 9, 12-C18:3(20.3%). The latter showed higher level than in any other samples. A minor component corresponding to δ5, 9, 12, 15-C18:4(not confirmed by GC-Mass) occurred in P. thunbergii and P. rigida.