Malignant gliomas and glioblastomas are the most common type of primary brain tumors. The treatment of malignant glioma involves surgery, radiation, and chemotherapy. These therapies have not been successful in curing malignant glioma and typically associated with dismal prognosis. Therefore, we can investigate thymidine kinase activity and cytotoxic effect after transfer suicide gene in U-251 glioma cells. We assessed expression patterns of green fluorescence protein(GFP) after infected with adenovirus in U-251 cells. After infection of HSV-tk in U-251 cells, we observed thymidine kinase activity with [3H]-penciclovir and cytotoxic effect by treated with ganciclovir. We could observe that expression level of GFP was increased according to infected concentrations in U-251 cells. GFP was not expressed in 1moi and 10moi, and slightly expressed in 30moi. Expression level of GFP was largely increased in 50moi and almost cells expressed GFP in 100moi. GFP expression has shown clear image in 100moi compared with other concentrations. We also investigated thymidine kinase activity using [3H]-penciclovir after infection of suicide gene HSV-tk into U-251 cells. Thymidine kinase activity increased in 10moi concentration compared with empty adenovirus infection. We could find that thymidine kinase activity was elevated proportional to HSV-tk infection amount in 30moi and 50moi. For evaluation of cellular cytotoxic effect of HSV-tk, we treated ganciclovir to U-251 cells and assessed cytotoxicity by using MTT assay. We could identifiy that cytotoicity appeared in very low concentration of HSV-tk compared with cancer cells originated with other organs. Cytotoxic effect was shown about 15% of U-251 cells of total cells in 5moi. By infection 10moi of HSV-tk, cytotoxic effect was intensively increased and about 60% of U-251 cells became extinct. About 70% cells exhibited cytotoxic effect in 30moi and more than 80% cells also appeared cytotoxic effect by infection of HSV-tk in 50moi, 100moi, and 200moi. Therefore, we could confirm to gene expression in U-251 cells was increased proportional to infected gene concentrations. Also we could find that thymidine kinase activity elevated with according to infected concentration and cellular cytotoxic effect was shown in very low concentration and higher cytotoxic effect also appeared by infection of suicide gene HSV-tk into U-251 glioma cells. These results suggest that gene therapy with suicide gene will be successful in curing brain tumors containing malignant glioma and glioblastoma.

Beauvericin (BEA) is a cyclohexadepsipeptide produced by the fungus Beauveria bassiana. And it has been reported to have very effective anti-cancer activity. However, the mechanistic studies of BEA on cytotoxicity on cancer cells have not been fully understood. In this study, we examined the cytotoxicity of BEA on the C6 (rat glioma cell line). The cell viabilities of C6 cells, MDA-MB 231 (breast cancer cell line), and HeLa (cervical cancer cell line) were decreased by treatment of BEA. In addition, BEA-treated cells showed membrane blebbings and buddings, which indicates that BEA decreased cell viability by inducing apoptosis. Additionally, we found that the level of apoptosis inducing molecules such as caspase 3, caspase 9 of BEA treated cells was increased and apoptosis regulating molecules (Bcl-2) was decreased. We also found that the activated STAT3 and Src was decreased in BEA-treated condition. In further study, we are going to find out how the BEA can influence Src kinase activity.

Amino acids a re required fo1' protein synthesis and energy sources in all living cell s. System L amino acid trans porters neutral amino aci cls i n a Na +' - independent manner. In ma 1ignan t tumors the L-type amino acid t ranspor te r 1(LA1'1), the first isoform 0 1' system L. is highly expressed to suppor t tumo1' cell growth. ln the present study, the expression 0 1' the system L amino acid transporter and BCH cytotoxicity were examined and compa red in both rat gli a l and C6 g lioma cel ls 1'he rat glia l cells expressed the L-type arnino acid t ra nsporter 2(LA1'2). the second isoform 이 system L, with its subu ni t 4F2hc. whereas the LA1'1 was not expressed. 1'he C6 glioma cells expressed LA1'1 with 4F2hc but not LA1'2 1'he [14C]L-leucine uptakes by the glial and C6 glioma cells were inhibi ted by BCH in a co ncent ration-d e pendant man ner wi th the lC50 values of 270.0 :t 13.7 μ M and 73.1 :t 4.5 μ M, respectively. 1'he cell g rowth was inh ibi ted by BCH in the time, concen tration-dependant manner in the gli al and C6 glioma cell s . 1'he rate of cell growth inhi bit ion induced by BCH in the C6 glioma cells was hi gh er than that in the gli al cells 1'hese results s uggesL that the tra ns ports of neutra l amino acids inc1uding several essenti al amino acids into rat g lial and C6 glioma cel ls a re for the most part mediated by LA1'2 and LA1'1, respectively. Therefore‘ the rat glia1 and C6 gJioma cells are excell ent tools for examing the proper ties of LA1'2 and LA1'1, respectively. Moreover, the spec너 i c inh ibi tion 0 1' LATl in cancel cells might be a new rationa le f'or anti -cancer therapy

명아주과(Chenopodiaceae) 식물인 함초(Salicornia herbacea L., SH) 추출물이 단백질 합성과 항독효과에 미치는 영향을 배양 C6 glioma 세포를 재료로 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 본 연구에서 CdCl2는 배양 C6 glioma 세포에 처리한 농도에 비례하여 세포생존율을 유의하게 감소시켰으며, 이 때 중간독성값(midcytotoxicity value, MCV)은 50μM에서 나타나 고독성인 것으로 나타났다. 광학현미경적 관찰에 있어서, CdCl2의 처리군에서는 세포수와 세포돌기가 대조군에 비하여 유의하게 감소된 반면, FSH 추출물 전처리에서는 CdCl2의 처리군에 비하여 현저한 세포수와 세포돌기의 증가를 나타냈다. 한편, acetaldehyde(ACE)는 배양 C6 glioma에 세포독성을 나타냈다. 단백질 합성에 대한 냉동 함초(freezed-SH, FSH) 추출물은 CdCl2로 감소된 단백질 합성을 유의하게 증가시켰으며, 또한 항독효과에 있어서도 ACE의 독성에 의하여 감소된 세포생존율을 유의하게 증가시킴으로서 ACE에 대한 항독효과를 나타냈다. 이에 비하여, 냉풍 함초(cold-SH, CSH) 추출물은 단백질 합성에 있어서 FSH 추출물 처럼 CdCl2의 처리군에 비하여 유의한 증가를 보였으나 항독효과에 대해서는 아무런 영향을 나타내지 않았다. 이상의 결과로부터 함초 추출물은 단백질 합성능과 항독효과를 나타냄으로서 건강증진을 위한 소재로서의 활용가능성이 클 것으로 생각된다.

인동과에 속하는 인동덩굴(Lonicera japonica Thunb., LJ) 추출물이 활성산소의 일종인 glucose oxidase(GO)에 미치는 영향을 배양 C6 glioma 세포를 재료로 알아보았으며, 또한 LJ 추출물의 항산화 효과를 전자공여능(DPPH-radical scavenging activity)을 비롯하여 항산화 효소의 하나인 SOD의 활성과 비슷한 superoxide dismutase(SOD)-유사활성(SOD-like activity), 지질과산화 억제능(lipid peroxidation inhibitory activity) 및 lactate dehydrogenase(DH) 활성에 의하여 조사하였다. 본 연구에서 GO는 처리 농도 의존적으로 대조군에 비하여 배양 C6 glioma 세포의 생존율을 유의하게 감소시킴으로서 세포독성을 나타냈으며(P<0.01), 이 때 XTT50값은 35 mU·mL-1에서 나타났다. 또한, LJ 추출물은 GO에 의하여 감소된 세포생존율을 유의하게 증가시킴으로써 GO의 세포독성을 방어하였다. 한편, LJ 추출물은 전자공여능을 비롯한 SOD-유사활성, 지질과산화 억제능 및 LDH의 활성 감소를 보임으로서 항산화 효과를 나타냈다. 이상의 결과로부터 LJ 추출물은 항산화 효과에 의하여 GO의 세포독성을 유효하게 방어한 것으로 나타났다.

활성산소종(reactive oxygen species, ROS)인 glucose oxidase(GO)의 산화적 손상이 배양 C6glioma 세포에 미치는 영향 및 이에 대한 연꽃(Nelumbo nucifera GAERTN, NNG) 추출물의 항산화 효과를 세포생존율(cell viability)을 비롯한 DPPH-radical scavenging activity, lipid peroxidation에 의하여 분석하였다. 본 연구에서 H2O2는 배양 C6 glioma세포에 처리한 농도에 비례하여 유의한 세포생존율의 감소를 나타냈다. 한편, GO의 산화적 손상에 대한 NNG추출물의 방어효과를 조사하기 위하여 세포생존율을 조사한 결과 NNG 추출물은 GO의 산화적 손상으로 감소된 세포생존율을 유의하게 증가시켰다. 또한, NNG 추출물은 DPPH-radical scavenging activity의 분석에서 유의한 자유라디칼 소거능을 보였으며, 동시에 지질과산화에 대한 억제능을 보였다. 위의 결과로 부터 GO는 배양 C6 glioma세포에 고독성인 것으로 나타났으며 NNG추출물은 GO와 같은 ROS의 산화적 손상을 방어하는데 효과적인 것으로 나타났다.

본 연구는 t-butyl hydroperoxide(t-BHP)의 산화적 손상에 대한 원지(Polygalae Radix, PR)추출물의 항산화 효과를 알아보기 위하여 배양 C6 glioma 세포를 재료로 세포생존율을 비롯하여 superoxide dismutase(SOD) 유사 활성을 비롯하여 lactate dehydrogenase(LDH) 활성을 조사하였다. 본 실험에서 t-BHP는 농도 의존적으로 배양 C6 glioma 세포의 생존율을 유의하게 감소시켰다. 한편, t-BHP의 세포독성에 대한 원지 추출물의 항산화 효과의 정량분석에 있어서 원지 추출물은 t-BHP의 산화적 손상으로 감소된 세포생존율의 유의한 증가를 비롯하여 LDH 활성감소 및 SOD 유사 활성을 보임으로서 항산화 효과를 나타냈다.