소나무재선충은 소나무에이즈라고 불리는 소나무해충으로서 전국적으로 큰 피해를 끼치고 있다. 최근 소나무재선충 피해는 경북지역의 경주 및 포항지역에 많이 발생하고 있다. 특히 경주지역에는 역사적인 유적지 및 고분공원이 많은데 이 지역의 소나무 숲에 재선충 피해가 확산되고 있어서 역사적 가치뿐만 아니라 관광산업에 큰 피해가 예상된다. 재선충 피해를 줄이기 위하여 재선충 감염목에 대한 신속한 제거작업이 필요한데 이에 대한 진단이 어려운 실정이다. 본 연구에서는 LAMP-PCR 진단키트를 이용하여 경주 고적지 지역의 재선충 감염이 의심되는 소나무를 진단하였다. 경주남산 및 불국사부근 7개 지역에서 재선충 감염 의심목으로부터 시료를 채취하여 조사해 본 결과 약 50%의 소나무에서 양성반응을 나타내었다. 본 연구를 통하여 경주 고적지의 재선충 감염여부를 신속하게 진단할 수 있었고 경주 유적지의 재선충 피해를 억제하는데 기여할 수 있을 것으로 판단한다.

In 2015, we reported a viral disease extremely fatal to Allomyrina dichotoma larvae spread in the majority of the larva-rearing farms in Korea. Currently, the virus-infected larva is diagnosed by PCR-based amplification but this requires laboratory equipment and agarose gel electrophoresis. Loop-mediated isothermal amplification (LAMP), a highly sensitive DNA amplification method, uses DNA polymerase isolated from Bacillus stearothemophilus and a set of six primers. It has great potential for field use because DNA is amplified under single temperature and the overall reaction completes in 30 min without laboratory equipments. Here, we report the development of on-site diagnosis method for Korean horn beetle larva infected by Allomyrina dichotoma Nudivirus.

‘급속면역금나노입자막대 (RIGS) 키트’라 명명된 RIGS 키트는 간단한 면역 흡착막대 방식으로 사용자가 빠르고 편리하게 이용할 수 있으며 토마토덤불위축바이러스 (TBSV)에 대한 현장진단을 하기 위하여 개발되었다. 토끼의 TBSV 항 혈청에서 정제된 면역글로블린G (IgG)는 단백질A 크로마토그래피법으로 정제되었으며 이후 금 나노입자와 결합하여 니트로셀룰로스막에서 진단 선을 표시하도록 고안되었다. TBSV 항체와 비특이적으로 결합하는 단백질A를 같은 진단막대에서 대조선으로 이용되었다. RIGS-TBSV 키트를 이용한 진단은 의심 식물 시료를 완충액이 들어간 플라스틱 봉지에 넣고 착즙후 진단막대기를 넣으면 5-10분 후 결과를 알 수 있도록 고안되었다. TBSV가 감염된 토마토 즙액에 RIGS 막대기를 넣고 진단한 결과 TBSV 농도에 비례하여 진단 선이 형성됨이 관찰되었으며, 이들 키트들은 TBSV와 연관되지 않은 다른 고추 바이러스들에서는 비특이적 반응이 형성되지 않았다. 이런 결과들은 RIGS-TBSV 키트가 TBSV 진단에 다른 어려운 실험이나 기술이 필요하지 않고 쉽게 병원균을 진단 할 수 있다는 것을 의미한다. 그러므로, RIGS-44 TBSV 키트는 TBSV 감염이 의심되는 식물체들의 현장 진단 뿐만 아니라 실험실에서 의 TBSV 진단에 효과적이라 할 수 있다.

‘급속면역금나노입자막대 (RIGS) 키트’라 명명된 빠르며 사용자 편의 및 간단한 면역흡착막대 방식의 키트가 오이모자이크바이러스 (CMV)의 현장진단을 하기 위하여 개발되었다. 토끼의 CMV항혈청에서 정제된 면역글로블린G (IgG)는 단백질A 크로마토그래피법으로 정제되었으며 이후 금나노입자와 결합하여 니트로셀룰로스막에서 진단선 표시하도록 고안되었다.CMV항체와 비특이적으로 결합하는 단백질A를 같은 진단막대에서 대조선으로 이용되었다. RIGS-CMV 키트를 이용한 진단은 의심 식물 시료를 완충액이 들어간 플라스틱 봉지에 넣은 후 착즙 후 진단막대기를 넣으면 된다. 결과는 5-10분 후알 수 있다. CMV가 감염된 고추, 오이 및 멜론의 즙액에RIGS 막대기를 넣고 진단한 결과 CMV 농도에 비례하여 진단선이 형성됨이 관찰되었으며, 이들 키트들은 CMV와 연관되지 않은 다른 고추바이러스들에서 비특이적 반응이 형성되지 않았다. 이런 결과들은 RIGS-CMV 키트가 매우 민감하며,진단에 별 다른 실험실 기술이나 경험이 필요하지 않는 다는것을 의미한다. 그러므로, RIGS-CMV 키트는 CMV 감염이의심되는 식물체들의 현장 진단 뿐만 아니라 실험실에서의CMV 진단에 효과적이다.

Virus infections of the honeybee(Apis mellifera) have been increasingly investigated during the last decade. In general, honeybee viruses are widespread and most of them persist as inapparent infections. We screened honeybee colonies for the presence of several bee viruses, including deformed wing virus(DWV), black queen virus(BQCV), Kashmir bee virus(KBV), Israeli acute paralysis virus (IAPV), sacbrood virus(SBV), acute bee paralysis virus(ABPV), using uniplex RT-PCR. Frequently simultaneous infections with different viruses are diagnosed in seemingly healthy bee colonies. Therefore we developed a multiplex RT-PCR assay for the simultaneous detection of multiple bee viruses.

To establish a rapid diagnosis method for the monitoring of acaricide resistance in the two-spotted spider mite, Tetranychus urticae, we evaluated the performance of residual contact vial (RCV) method as a routine bioassay for T. urticae by using two widely used acaricides, abamectin and tebupenpyrad. Appropriate concentrations of test acaricides were dissolved in acetone and evenly coated (100 μl) onto the inside wall of a 4-ml glass vial using a rolling machine. The average survival times in untreated control vial was longer than 12 hrs in the absence of food or water regardless of cap being closed or open. Webbing behavior of mites inside the vial, which may interfere with maximum chemical contact, began to be observed from 8 hrs post treatment. The minimum concentrations causing 100% mortality within 8 hrs posttreatment in a susceptible strain of T. urticae were determined to be 30 and 60 ppm in abamectin and tebupenpyrad, respectively. Dose-response curve was significantly affected by temperature in both acaricides, in which the knockdown rate increased greatly as temperature increased. The endpoint mortality at 6-8 hrs posttreatment, however, was not significantly affected by temperature. Nymphal stage of mites showed more rapid intoxication response than adults but endpoint mortality at 6-8 hrs posttreatment was not substantially different between developmental stages. When compared with the results from conventional spray method, RCV method showed moderate to high correlation coefficients (r=0.51~0.98), suggesting that it is a reliable in determining susceptibility of T. urticae. The vial-coated pesticides were stable at least one year when stored at -20°C as determined by LC-MS/MS analysis. Moreover, there was no significant difference in the bioassay results in repeated experiments with three different persons, indicative of high reproducibility of RCV. The RCV diagnostic kit, when used by farmers on site, should provide crucial and essential information for the selection of most suitable acaricides for different field populations of T. urticae.

The H water treatment plant has been operating since 1982 and has had no renovation. It is assumed that the filters have been operated for more than 30 years and therefore are deteriorated. Many of the filters show an unequal state of air scouring during backwashing. For this study one filter, which was presumed most deteriorated among eighteen filters, was selected as a model filter for renovation. Some of the effects seen after renovation of the underdrain system were a lower average filtrated turbidity by approximately 0.02 NTU and an equal backwash state throughout the filter bed. Sand wash efficiencies by backwash before renovation of the underdrain system were 28%, 8%, and 5% at the surface, 50 cm depth, and 100 cm depth, respectively, and after renovation of the underdrain system were 94%, 26%, and 15% , respectively. The standard deviation of the effective sand size was 0.025-0.033 mm before renovation of the underdrain system and 0.002-0.011 mm after renovation of the underdrain system, meanings there was equal backwash pressure throughout the filter. Filtration time after renovation was approximately 2 times longer than before renovation.