Rhizopus japonicus ATCC22959로부터 미생물성 chitosan을 생산하기 위한 최적 조건을 조사하였다. 탄소원으로써 starch와 glucose(1:1)를 3.0%, 질소원으로써 yeast extract를 3.0%, 무기염류로써 ZnSO_4를 0.02% 첨가하고 pH를 5.0으로 맞춘 배지에 Rhizopus japonicus ATCC22959의 포자를 접종한 후 30℃에서 96시간 배양하는 것이었다. Chitosan생산을 위한 기본 배지와 최적 배지에 각각 1.25×10 exp (5)개의 포자를 접종하여 배양한 후 chitosan의 생산성을 비교한 결과는 각각 0.08g/200ml와 0.51g/200ml로 약 6.4배정도 수율이 증가하였다.

Cheese milk를 기질로 하여 pronase등 protease와 palanatase ML등 lipase를 이용하여 EMC를 제조하였다. Cheese milk 가수분해에 관여하는 각 protease의 반응 조건을 살펴본 결과, pronase-30℃, pH 7.0, pancreatin-40℃, pH 8.0, paciflc protease-30℃, pH 7.0과 Asp. sp. 기원 protease-50℃, pH 8.0에서 최대의 활성을 보였으며, lipase의 반응 조건은 pancreatic lipase-50℃, pH 8.0, palatase ML-50℃, pH 7.0과 Candida cylindracea 기원 lipase-40℃, pH 6.0 이었다. 최적 반응조건에서 가수분해를 행한 결과 반응 시간이 증가할수록 유리아미노산의 양과 유리지방산의 양이 증가하는 경향을 보였다. Pacific protease와 pronase에 의해 가수분해시 0.67㎎/㎖과 0.74 ㎎/㎖의 유리 아미노산을 생성하였으며, 유리 아미노산중 glutamic acid와 leucine이 가장 많은 함량을 보였다. Candida cylindracea 기원 lipase를 이용하여 가수분해시 가장 많은 유리 지방산생성량(24.63 ㎎/㎖)을 보였다. 각 EMC의 지방산조성을 살펴본 결과 butyric acid, palmitic acid, stearic acid와 oleic acid의 함량이 보였다. Pancreatin에 의해 가수분해 후 각 lipase를 사용하여 제조한 EMC의 관능검사 결과, pancreatic lipase를 이용한 EMC가 가장 쓴맛이 강하였고, palatase에 의한 EMC는 가장 바람직한 cheese 향기를 가지고 있다

2두의 삼원교잡 모돈(L.×LW×D)으로부터 정상분만시켜 얻은 총 16두의 신생자돈에 Lactobacillus casei YS 생균 분말을 4주동안 경구 투여하여 얻은 성적을 요약하면 다음과 같다. 시험구의 증체량이 대조구에 비해 우수하였으며 투여후 1주일만에 하리예방 효과도 나타났다. 소장상부의 내용물당 유산균 수는 g당 시험구와 대조구모두 10^6cfu 정도로 비슷하였으나 시험구의 coliform수는 뚜렷하게 감소하였다. 분변중의 유산균 및 coliform수는 유산균 투여에도 불구하고 크게 변화하지 않으며 10^6-10^7 cfu/g 정도였다. 소화관 내용물의 pH는 소장상부에서 감소경향이 유의적으로 나타났다. 소장상부에 우세한 균종은 시험구가 L. salivarius, L. fermentum, L. casei였고 대조구는 L. salivarius, L. acidophilus 그리고 L. curvatus였다. 한편, 하리자돈으로부터 분리한 대장균은 Streptomycin, Ampicillin에는 내성을 보였고, Nalidixic acid, Gentamycin, Neomycin에는 감수성이 있었다.

장 건강에 유익한 프리바이오틱스 소재를 개발하기 위하여 배변을 촉진하는 효능을 지닌 붉은팥을 식품 발효에 이용되는 Bacillus subtilis KCCM 11965P로 발효하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 붉은팥의 일반성분은 회분 3.35±0.04%, 조단백질 21.1±0.19%, 조지방 0.35±0.02% 함 유되었다. 붉은팥 원물 1%, 3%, 5%와 Bacillus subtilis KCCM 11965P 3% (v/v)를 접종하여 0, 24, 48, 72시간 배양 하였다. 배양액의 총균수를 측정한 결과 붉은팥 원물을 3% 첨가한 후 72시간 배양군에서 Bacillus subtilis KCCM 11965P 발효가 가장 적합하였다. 발효 시간에 증가함에 따라 총 폴리페놀 함량과 DPPH 라디칼 소거활성이 증가하였다. Protease 활성은 붉은팥 원물 5% 첨가한 후 72시간 배양한 군(2.69±0.003 unit/mL)에서 활성이 가장 높았다. 발효시간과 붉은팥 원물 첨가 농도가 증가함에 따라 α -amylase 활성도 증가하였으며, 붉은팥 원물 5% 첨가한 후 72시간 배양한 군에서 0시간 배양군(1.0±0.1 unit/mL) 보다 26.0±0.2 unit/mL로 증가하였다. Bacillus subtilis KCCM 11965P로 72시간 배양한 후 유리아미노산을 측정한 결과 leucine은 붉은팥 원물 5% 첨가한 0시간 배양군 5.22 mg/L 에서 67.59 mg/L로 증가하였으며, 비필수아미노산인 tyrosine은 5% 첨가 0시간 배양군 10.08 mg/L에서 259.35 mg/L로 증가하였다. 이와 같이 Bacillus subtilis KCCM 11965P로 붉은팥을 발효하면 항산화 활성, protease 효소활성, 및 α-amylase 효소 활성이 증가하였으며, 유리아미노 산과 유기산이 증가하였다. 붉은팥을 발효하는데 Bacillus subtilis KCCM 11965P가 적합할 것으로 판단되며, 붉은팥은 프로바이오틱스를 활성화시켜 장 건강을 증진시킬 수 있는 프리바이오틱스 소재로 개발할 수 있는 가능성을 시사 하였다.